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人IL-2Rα链基因负调控元件结合蛋白的分离纯化
1
作者
张玉健
邢光新
+4 位作者
莽锐
程小款
衡凤燕
吴宁华
沈 琲
《基础医学与临床》
CSCD
1999年第6期80-85,共6页
淋巴细胞表面高亲和力IL-2R的出现受IL-2Ra基因的诱导表达控制,而IL-2Ra链基因的表达受到严格的时空的调控。在IL-2Ra基因上游除存在正调控元件外还存在负调控元件(-391TCATCCCAGG-381,NRE)及其下游不完全反转重复序列(-153CCTGG...
淋巴细胞表面高亲和力IL-2R的出现受IL-2Ra基因的诱导表达控制,而IL-2Ra链基因的表达受到严格的时空的调控。在IL-2Ra基因上游除存在正调控元件外还存在负调控元件(-391TCATCCCAGG-381,NRE)及其下游不完全反转重复序列(-153CCTGGTTTGA-143NIRS)。本组曾通过紫外交联实验发现Jurkat细胞有一种蛋白质与NIRS和NRE特异结合。本文利用肝素-亲和柱层析及序列特异DNA亲和层析认1010Jurkat细胞中获得了分子量约为75kD的NRE特异结合蛋白。EMSA实验表明,纯化后的蛋白与NRE所形成的结合物能被NIRS及HIVLTR的负调控元件所竞争,提示该NRE结合蛋白不仅可能参与IL-2Ra基因的转录调控,而且可能在HIV基因表达过程中起某种作用。
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关键词
il-2rα链
负调控元件
结合蛋白
DNA
亲和层析
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职称材料
人白细胞介素2受体α链cDNA导入哺乳细胞及其克隆与稳定表达的研究
被引量:
2
2
作者
邹全明
朱锡华
+2 位作者
蔡武城
李昌本
赵寿元
《免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
1991年第1期12-17,共6页
按DNA—磷酸钙共沉淀法将人白细胞介素2受体α链cDNA转染中国仓鼠卵巢细胞(CHOdhfr^-)及小鼠成纤维细胞(L929),获得稳定表达人IL-2Rα链的CHOdhfr^+细胞克隆。经RNA点渍杂交分析、荧光标记IL-2染色法、特异性ELISA和玫瑰花环试验检测证...
按DNA—磷酸钙共沉淀法将人白细胞介素2受体α链cDNA转染中国仓鼠卵巢细胞(CHOdhfr^-)及小鼠成纤维细胞(L929),获得稳定表达人IL-2Rα链的CHOdhfr^+细胞克隆。经RNA点渍杂交分析、荧光标记IL-2染色法、特异性ELISA和玫瑰花环试验检测证明,哺乳细胞表达的重组IL-2Rα链具有结合IL-2和抗Tac McAb的能力。还报道了T细胞白血病Jukat及Molt-4等细胞系异常表达IL-2R的结果,并作了分析讨论。
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关键词
人
il-2rα链
CDNA
哺乳细胞
克隆
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职称材料
题名
人IL-2Rα链基因负调控元件结合蛋白的分离纯化
1
作者
张玉健
邢光新
莽锐
程小款
衡凤燕
吴宁华
沈 琲
机构
中国医学科学院基础医学研究所
出处
《基础医学与临床》
CSCD
1999年第6期80-85,共6页
基金
国家自然科学基金!3948007
文摘
淋巴细胞表面高亲和力IL-2R的出现受IL-2Ra基因的诱导表达控制,而IL-2Ra链基因的表达受到严格的时空的调控。在IL-2Ra基因上游除存在正调控元件外还存在负调控元件(-391TCATCCCAGG-381,NRE)及其下游不完全反转重复序列(-153CCTGGTTTGA-143NIRS)。本组曾通过紫外交联实验发现Jurkat细胞有一种蛋白质与NIRS和NRE特异结合。本文利用肝素-亲和柱层析及序列特异DNA亲和层析认1010Jurkat细胞中获得了分子量约为75kD的NRE特异结合蛋白。EMSA实验表明,纯化后的蛋白与NRE所形成的结合物能被NIRS及HIVLTR的负调控元件所竞争,提示该NRE结合蛋白不仅可能参与IL-2Ra基因的转录调控,而且可能在HIV基因表达过程中起某种作用。
关键词
il-2rα链
负调控元件
结合蛋白
DNA
亲和层析
Keywords
human
il-
2
rα
chain gene negative
r
egulato
r
y element (N
r
E)-binding ptotein DNA-affinity ch
r
omatog
r
aphy
分类号
Q513.03 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
人白细胞介素2受体α链cDNA导入哺乳细胞及其克隆与稳定表达的研究
被引量:
2
2
作者
邹全明
朱锡华
蔡武城
李昌本
赵寿元
机构
第三军医大学免疫学教研室
复旦大学遗传学研究所
出处
《免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
1991年第1期12-17,共6页
文摘
按DNA—磷酸钙共沉淀法将人白细胞介素2受体α链cDNA转染中国仓鼠卵巢细胞(CHOdhfr^-)及小鼠成纤维细胞(L929),获得稳定表达人IL-2Rα链的CHOdhfr^+细胞克隆。经RNA点渍杂交分析、荧光标记IL-2染色法、特异性ELISA和玫瑰花环试验检测证明,哺乳细胞表达的重组IL-2Rα链具有结合IL-2和抗Tac McAb的能力。还报道了T细胞白血病Jukat及Molt-4等细胞系异常表达IL-2R的结果,并作了分析讨论。
关键词
人
il-2rα链
CDNA
哺乳细胞
克隆
Keywords
Human inte
r
leukin-
2
r
ecepto
r
a chain cDNA, T
r
ansfection, Mammalian cells, Stable exp
r
ession
分类号
R392.11 [医药卫生—免疫学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
人IL-2Rα链基因负调控元件结合蛋白的分离纯化
张玉健
邢光新
莽锐
程小款
衡凤燕
吴宁华
沈 琲
《基础医学与临床》
CSCD
1999
0
下载PDF
职称材料
2
人白细胞介素2受体α链cDNA导入哺乳细胞及其克隆与稳定表达的研究
邹全明
朱锡华
蔡武城
李昌本
赵寿元
《免疫学杂志》
CAS
CSCD
北大核心
1991
2
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职称材料
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