过表达miR-144-3p下调感染巨噬细胞 IL-6 mRNA抑制BCG的存活

探究miR-144-3p对巨噬细胞IL-6 mRNA表达量和巨噬细胞免疫能力的影响,为结核诊疗提供理论参考。方法(1)建立BCG感染THP-1巨噬细胞模型,qPCR检测感染不同时间miR-144-3p和IL-6 mRNA表达变化;(2)瞬转miR-144-3p模拟物/抑制剂来过表达/抑制miR-144-3p后,qPCR检测感染不同时间miR-144-3p和IL-6 mRNA表达变化;皮尔森相关系数分析miR-144-3p和IL-6 mRNA的相关性;(3)CCK-8检测瞬转miR-144-3p模拟物/抑制剂后,CCK-8检测BCG感染的巨噬细胞增殖能力;CFU检测BCG存活状态。结果显示:(1)巨噬细胞感染BCG后,miR-144-3p和IL-6 mRNA表达均显著上升(P<0.05),miR-144-3p表达量在12 h达到峰值,IL-6 mRNA表达量在24 h达到峰值;(2)巨噬细胞感染BCG后,过表达miR-144-3p使IL-6 mRNA表达显著下降(P<0.01);抑制miR-144-3p使IL-6 mRNA表达显著上升(P<0.01);皮尔森相关系数分析结果显示两者存在负相关性;(3)过表达/抑制miR-144-3p不影响巨噬细胞增殖能力,但过表达miR-144-3p能抑制巨噬细胞中BCG的存活。结论:BCG感染巨噬细胞后miR-144-3p和IL-6 mRNA表达均显著上升;过表达/抑制巨噬细胞miR-144-3p,miR-144-3p可能负调控IL-6 mRNA表达;过表达miR-144-3p能抑制BCG存活,进而增强巨噬细胞的先天免疫能力。

骨髓增生异常综合征患者骨髓基质细胞IL-32mRNA表达及其与细胞凋亡的相关研究

目的:探讨骨髓增生异常综合征(MDS)患者骨髓基质细胞IL-32 mRNA的表达及其与骨髓单个核细胞凋亡的相关性。方法:收集山东大学附属济南市中心医院26例MDS患者和10例缺铁性贫血(IDA,对照组)患者骨髓液,分离骨髓单个核细胞,分离培养骨髓基质细胞,采用RT-PCR检测骨髓基质细胞中IL-32 mRNA表达,采用Annexin V-FITC/PI双染色流式细胞术检测骨髓单个核细胞凋亡情况,采用直接免疫荧光标记全血溶血法,流式细胞术检测患者骨髓淋巴细胞及NK细胞计数情况。结果:MDS患者骨髓基质细胞IL-32 mRNA表达显著性高于对照组,RA、RAS及RCMD患者骨髓基质细胞IL-32 mRNA表达显著高于RAEB(P<0.05),而RAEB与对照组之间无显著差异。MDS组骨髓单个核细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.05),RA、RAS及RCMD患者骨髓单个核细胞凋亡率均显著高于RAEB(P<0.05),RAEB与对照组之间无显著差异。MDS患者细胞凋亡与骨髓基质细胞IL-32 mRNA表达显著相关(r=0.870)。M DS患者骨髓中NK细胞数量与对照组无显著差异。结论:骨髓基质细胞IL-32 mRNA的表达与M DS细胞凋亡显著相关,骨髓基质细胞分泌IL-32可能是M DS骨髓细胞凋亡的原因之一,推测MDS骨髓微环境异常参与了骨髓细胞的凋亡。

IL-32在子痫前期孕产妇胎盘中的水平变化及其分布

目的:通过研究子痫前期(preeclampsia,PE)孕产妇胎盘中IL-32含量的变化与来源,为临床上PE的早期诊断和防治提供更多的依据和策略。方法:收集南方医科大学附属中山市博爱医院2020年-2021年期间住院并诊断为PE的孕产妇胎盘作为实验组,以正常孕产妇胎盘作为对照组,通过免疫印迹技术、RT-PCR和免疫组化等检测胎盘中IL-32水平改变以及在胎盘不同细胞的定位表达。结果:在PE孕产妇的胎盘中,IL-32的蛋白表达水平增加,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。运用实时荧光定量PCR方法,进一步发现PE孕产妇中胎盘IL-32的mRNA转录水平增加,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。运用免疫组化技术研究发现PE孕产妇的胎盘切片中的IL-32呈现高表达,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。IL-32在绒毛的滋养层细胞胞浆中表达明显升高,而在血管内皮细胞等其他细胞中表达有轻度升高。结论:PE孕产妇中胎盘滋养层细胞生成IL-32增加,可能参与了PE血管内皮细胞功能障碍、胎盘功能和免疫失衡,这为PE的疾病预测、早期诊断、早期干预、疾病预后评估以及药物研发提供新的依据和思路。

DHX32 mRNA在肺癌组织中的表达情况及其临床意义

目的探讨DHX32 mRNA在肺癌组织中的表达情况及其临床意义。方法选取2020年8月至2022年5月我院收治的285例肺癌患者,采用RT-PCR法检测肺癌组织和癌旁组织的DHX32 mRNA表达情况,分析其与肺癌患者病理特征的关系。结果肺癌组织中的DHX32 mRNA相对表达量高于癌旁组织(P<0.05)。DHX32 m RNA诊断肺癌的AUC为0.837(95%CI:0.771~0.890),敏感度为76.67%,特异性为76.55%。DHX32 m RNA与肺癌患者吸烟情况、病灶数目、组织学类型、病理分期、分化程度存在联系(P<0.05)。结论DHX32 mRNA在肺癌患者中表达升高,检测其表达情况可用于肺癌的诊断及病情的评估。

灵芝多糖体外对小鼠脾细胞IL-2,IL-3 mRNA表达的影响

目的观察灵芝多糖体外对小鼠脾细胞ＩＬ－２、ＩＬ－３ｍＲＮＡ的表达水平是否有影响。方法逆转录多聚酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ｍＲＮＡ表达，凝胶图象光密度分析系统进行相对定量。结果在原代小鼠脾细胞培养开始时加入不同浓度的灵芝多糖ＧＬＢ７（５，１０，２０，４０ｍｇ·Ｌ－１），培养１２ｈ及２１ｈ后观察ＧＬＢ７与ＩＬ－２及ＩＬ－３ｍＲＮＡ表达水平之间的量效关系。发现在一定范围内，随着ＧＬＢ７浓度的升高，ＩＬ－２及ＩＬ－３ｍＲＮＡ表达水平也相应提高，对ＩＬ－２ｍＲＮＡ的提高率分别为１０．４％，２１．９％，３７．８％，４６．６％；对ＩＬ－３ｍＲＮＡ的提高率分别为１５．４％，３５．２％，５２．４％，７４．５％。１９９８－０４－０８收稿，１９９８－０７－２６修回＊国家自然科学基金资助课题，Ｎｏ３９４００１６５作者简介：王庆彪，男，２６岁，硕士；雷林生，男，３８岁，医学博士，副教授培养１２ｈ和３０ｈ的上清液中ＩＬ－２样活性及ＩＬ－３样活性处理组与对照组相比亦有明显升高，且有一定的浓度依赖关系。

电针对佐剂性关节炎大鼠病灶局部皮肤组织IL-1β、IL-1ra mRNA表达的影响

目的 :观察电针对单侧佐剂性关节炎大鼠的疼痛试验评分、炎症灶局部病理反应 ,以及病灶局部皮肤组织IL 1β、IL 1ramRNA表达的影响。方法 :通过将完全弗氏佐剂 50 μL注入SD大鼠左后肢外踝关节皮下制造单侧佐剂性关节炎疼痛模型 ,电针“环跳”穴、“阳陵泉”穴 (刺激参数为0 .5～ 1.5V ,4～ 16Hz,3 0min) ,应用跖、背屈关节评分连续观察大鼠 7d内的痛反应曲线 ,应用HE组织化学染色方法观察病灶局部皮肤组织炎性病理反应 ,应用RT PCR技术检测IL 1β、IL 1ramRNA表达情况。结果 :电针可明显减少炎症痛大鼠的疼痛评分 ,抑制佐剂性关节炎大鼠病灶局部炎性病理反应 ,并抑制病灶局部皮肤组织IL 1βmRNA表达 ,促进IL 1ramRNA表达 ,使IL 1ra/IL 1β比值上升 (P <0 .0 1)。结论 :电针可能通过调节炎症灶局部致炎细胞因子及抗炎细胞因子之间的平衡 ,从根本上解除局部病灶免疫细胞的激活状态 ,达到扶正祛邪、平衡阴阳的调控作用 ,从外周途径缓解疼痛。

小青龙汤及其加味方对变应性鼻炎大鼠IL-4和IL-4mRNA表达的影响

目的:观察小青龙汤及其加味方对变应性鼻炎(AR)大鼠血浆IL4含量和脾细胞IL4mRNA表达水平的影响。方法:采用卵蛋白全身致敏与局部攻击方法制作AR大鼠模型,观察小青龙汤加味治疗后血浆IL4含量和脾细胞IL4mRNA的表达。结果:模型组血浆IL4含量和脾细胞IL4mRNA的表达明显升高,小青龙汤加味治疗组血浆IL4含量和脾细胞IL4mRNA的表达明显降低,小青龙汤加味治疗组优于小青龙汤治疗组。结论:小青龙汤加味治疗AR的作用途径之一可能是通过降低IL4mRNA的表达水平,间接降低IL4含量,从而减轻鼻粘膜变应性炎症。

PRRS病毒感染对猪细胞因子IL-2、IL-4和IL-10mRNA转录的影响

通过构建猪细胞因子IL 2、IL 4和IL 10的缺失cDNA竞争分子,利用定量竞争PCR技术对猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)病毒感染过程中细胞因子IL 2、IL 4和IL 10的mRNA进行转录水平变化的定量检测,研究PRRS病毒感染对猪细胞因子IL 2、IL 4和IL 10mRNA转录的影响。结果表明猪Th1型细胞因子IL 2的mRNA转录水平分别在PRRS病毒感染后1d、28d和56d出现3个mRNA转录高峰;而Th2型细胞因子IL 4的mRNA转录水平在病毒感染后56d内,一直处于低水平,而后才逐渐升高;IL 10的mRNA转录水平在病毒感染后6d内,一直处于低水平状态,第6d后才逐渐上升,至42d到达高峰,而后下降,恢复正常。结果显示PRRS病毒感染可导致Th2型细胞因子IL 4和IL 10基因转录的抑制。

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中IL-4和IL-13mRNA的表达

目的 :探讨Th2型细胞因子在系统性红斑狼疮 (SLE)发病机制中的作用及其意义。方法 :应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测了 34例活动期SLE患者和 30例正常人外周血单个核细胞 (PBMC)中IL 4和IL 1 3mRNA的表达水平。结果 :活动期SLE患者IL 4和IL 1 3的阳性表达率与正常人对照组相比均无明显差异 ( P >0 0 5) ;活动期SLE患者PBMC中IL 4和IL 1 3mRNA的平均表达水平 ( 0 9386± 0 1 6 89,0 8983± 0 1 1 53)均明显高于正常人对照组 ( 0 54 94± 0 1 51 0 ,0 6 0 85±0 0 90 3) ,差异非常显著 (P <0 0 0 1 )。结论 :Th2型细胞因子IL 4和IL 1 3在SLE患者中呈高水平表达 ,这可能与SLE患者外周血T细胞高度活化、功能异常有关。

睾丸局部感染时Sertoli细胞IL-1、IL-6 mRNA的表达

目的 研究大鼠Sertoli细胞在抗感染中的免疫调节作用。方法 以溶脲脲原体 (ureaplasmaurealyticum ,UU)和致病性大肠杆菌直接注入大鼠膀胱模拟上行性感染的途径 ,分别在 1、2和 3周处死大鼠 ,从大鼠睾丸组织分离获得高纯度的Sertoli细胞 ,然后抽提总RNA ,用RT PCR方法比较正常组与UU感染组、致病性大肠杆菌组之间IL 1、IL 6mRNA表达的差异。结果 与正常组相比 ,UU感染后 ,其IL 1mRNA在 1、2周时升高 ,3周时下降 ;IL 6在 1、2周时下降 ,3周时升高 ;而致病性大肠杆菌感染后 ,其IL 1mRNA在 1、2周时均升高 ,3周下降 ;IL 6在 1周时升高 ,2周时下降 ,3周时又升高。结论 大鼠Sertoli细胞在抗感染免疫中 ,可通过IL 1、IL

半定量RT-PCR测定中药成分对小鼠脾T细胞IL-2mRNA水平的影响

应用半定量RT-PCR方法,测定了9种中药成分对小鼠脾脏T细胞IL-2mRNA水平的影响。结果显示,体内注射黄芪多糖、淫羊藿多糖、当归多糖、蜂胶黄酮和黄芪皂甙能够使ConA诱导的小鼠脾T细胞IL-2mRNA水平显著升高,蜂胶多糖、板兰根多糖、人参皂甙、淫羊藿黄酮不能影响细胞内IL-2mRNA丰度;中药成分体外诱导时与体内应用时的作用效应相同,但与对照相比较,蜂胶多糖在体外能够显著促进IL-2mRNA的诱生,与体内不同。

IL-1βmRNA、TNF-αmRNA在成人牙周炎患者牙龈组织中表达的研究

目的 :检测白细胞介素 1β(IL_1β)mRNA、肿瘤坏死因子α(TNF_α)mRNA在成人牙周炎患者牙龈组织中表达 ,探讨IL_1β和TNF_α与牙周炎致病机理的关系。 方法 :采用RT_PCR方法检测IL_1βmRNA、TNF_αmRNA在 19例成人牙周炎患者炎症牙龈和 9例牙周健康者牙龈组织中表达。结果 :IL_1βmRNA表达强度在成人牙周炎病变牙龈(0 819± 0 0 45 )显著高于正常牙龈 (0 30 6± 0 0 87) (t=3 71,P <0 0 1)。TNF_αmRNA表达强度在成人牙周炎病变牙龈 (0 6 96± 0 0 98)显著高于正常牙龈 (0 ) (t=7 0 9,P <0 0 1)。结论

慢性阻塞性肺疾病患者外周血淋巴细胞NLRP3 mRNA的表达及血清IL-1β、IL-18检测的意义

目的通过对慢阻肺患者外周血淋巴细胞NLRP3 mRNA及血清中炎症介质IL-1β、IL-18的检测,探讨NLRP3炎症小体在慢阻肺发病中的作用。方法选取60例确诊AE慢阻肺患者,根据有无呼吸衰竭,分为2组,每组30例,急性加重期患者经治疗症状体征好转达到缓解期水平后作为慢阻肺组,同期门诊健康体检者30例作为健康对照组。采用ELISA检测各个组血清中IL-1β、IL-18的浓度,采用PCR检测各组中NLRP3 mRNA的表达量。结果 AECOPD组和慢阻肺缓解组患者的NLRP3 mRNA表达量和血清中IL-1β和IL-18的浓度均显著高于健康对照组(P<0.05);AE慢阻肺组患者的NLRP3 mRNA表达量和血清中IL-1β和IL-18的浓度均显著高于慢阻肺缓解组(P<0.05);慢阻肺合并呼吸衰竭患者的NLRP3 mRNA表达量和血清中IL-1β和IL-18的浓度显著高于未合并呼吸衰竭患者(P<0.05);慢阻肺患者NLRP3 mRNA表达量与血清中IL-1β、IL-18的浓度呈正相关,相关系数r分别为0.69和0.70(P<0.05);IL-1β的浓度与IL-18的浓度呈正相关,相关系数r=0.65(P<0.05)。结论 NLRP3和IL-1β、IL-18参与慢阻肺的炎症反应,其浓度升高导致慢阻肺病情严重程度增加。

丹参多酚酸盐对实验性肝硬化大鼠肝组织TNF-α和IL-6 mRNA的表达影响

目的:观察丹参多酚酸盐对肝硬化大鼠肝组织TNF-α和IL-6 mRNA表达影响。方法:SD大鼠40%CCL4-橄榄油溶液建立肝硬化大鼠模型,随机分成4组:模型组、丹参多酚酸盐治疗低、中、高剂量组,分别每天腹腔注射葡萄糖溶液、丹参多酚酸盐12、24、48 mg/kg 2周。另取10只大鼠正常对照。治疗结束后观察各组大鼠死亡率,肝组织外观,光度法测门静脉血内毒素水平,光镜下观察病理形态学改变,Real-time RT-PCR法检测肝脏组织TNF-α和IL-6 mRNA的表达变化。结果:模型组大鼠死亡率42.86%,丹参多酚酸盐高剂量组无死亡率;与正常组比较,模型组内毒素水平显著升高(P<0.01),经丹参多酚酸盐治疗后低剂量组内毒素水平降低(P<0.05),丹参多酚酸盐中剂量组与高剂量组显著降低(P<0.01)。丹参多酚酸盐治疗组肝脏色泽、质地、边缘、表面光滑度及组织病理较模型对照组有明显改善。高剂量组TNF-αmRNA和各治疗组IL-6mRNA表达量与模型组相比有显著统计学差异(P<0.01),中剂量组TNF-αmRNA表达量与模型组相比有统计学差异(P<0.05)。结论:丹参多酚酸盐降低肝硬化大鼠死亡率,改善肝硬化大鼠肝组织炎症程度,抑制肝组织TNF-α和IL-6 mRNA表达。

泡球蚴感染小鼠肝组织T-bet、GATA-3、ROR-γt和IL-17 mRNA表达水平的研究

目的:研究泡球蚴感染小鼠肝组织T-bet、GATA-3、ROR-γt和IL-17mRNA表达水平的变化特点,初步探讨Th17细胞与Th1/Th2在棘球蚴感染中的相互关系。方法:通过腹腔接种多房棘球绦虫的幼虫原头蚴混悬液制备泡球蚴感染小鼠模型,持续观察10个月,分别在感染2天、8天、1月、3月、6月和10月处死小鼠,收集肝脏组织。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测各组小鼠肝脏组织T-bet、GATA-3、ROR-γt和IL-17 mRNA的表达水平。结果:T-bet mRNA的表达水平在感染早期开始增高,1月时达高峰后又开始缓缓下降至感染前水平;GATA-3 mRNA的表达水平在感染1月时明显升高,随后一直保持较高的表达水平;ROR-γt mRNA的表达水平在感染早期开始增高,感染1月时达到高峰,随后缓慢下降。IL-17 mRNA表达水平自感染早期开始持续性增高,到感染3月时达高峰,之后又逐渐降低至感染前水平。各组小鼠肝组织ROR-γt mRNA表达水平与T-bet mRNA表达水平呈正相关(r=0.67),IL-17 mRNA表达水平与ROR-γt mRNA表达水平有相关性(r=0.35),P值均<0.05。结论:泡球蚴感染宿主早期,主要以Th1型和Th17型细胞免疫为主,感染中后期出现Th1向Th2转化,机体呈现出以Th2细胞为主的优势应答。

补肾强督方对强直性脊柱炎患者外周血IL-18、IFN-γ、IL-4 mRNA表达水平的影响

目的探讨补肾强督方治疗强直性脊柱炎(AS)的可能作用机制。方法30例AS患者予补肾强督方进行治疗,疗程为6个月。研究AS患者及健康志愿者外周血中白细胞介素18(IL-18)、干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素4 mRNA(IL-4 mRNA)表达水平及经补肾强督方治疗前后AS患者外周血中IL-18、IFN-γ、IL-4 mRNA表达水平的变化。结果AS患者外周血单个核细胞IL-18 mRNA、IFN-γ mRNA表达水平及IFN-γ mRNA/IL-4 mRNA较正常对照组显著增高(P<0.001)。经用补肾强督方治疗后,IL-18 mRNA、IFN-γ mRNA表达水平及IFN-γ mRNA/IL-4 mRNA明显下降(P<0.001)。AS患者红细胞沉降率水平与IL-18 mRNA、IFN-γ mRNA、IL-4 mRNA表达水平呈极显著相关(P<0.001);C反应蛋白水平与IL-18 mRNA表达水平呈显著相关(P<0.05),与IFN-γ mRNA表达水平呈非常显著相关(P<0.01)。结论AS患者外周血中IL-18 mRNA、IFN-γ mRNA水平比正常组明显升高;用补肾强督方治疗后,患者IL-18 mRNA、IFN-γ mRNA水平均有明显下降。

雷公藤红素对小鼠的免疫抑制作用及其对IL-6 mRNA表达影响的研究

目的:研究雷公藤红素对小鼠的免疫抑制作用及对细胞因子IL-6 mRNA表达的影响。方法:采用碳粒廓清、迟发型变态反应、血清溶血素测定和T淋巴细胞转化实验,观察雷公藤红素对小鼠免疫功能的影响;运用RT-PCR半定量法研究雷公藤红素对小鼠肝脏IL-6 mRNA表达影响。结果:雷公藤红素能抑制小鼠血清溶血素水平(400μg/kg),且与剂量呈依赖关系;小鼠耳廓肿胀度研究表明,雷公藤红素能使迟发型变态反应程度减轻(400μg/kg);雷公藤红素剂量在0.25μg/mL时,可以明显抑制植物血凝素(PHA)诱导的细胞增殖;雷公藤红素800μg/kg能对抗CCl4引起的急性肝损伤小鼠肝脏IL-6 mRNA含量的升高。结论:雷公藤红素在一定程度上能抑制小鼠的免疫功能,能抑制炎症细胞因子IL-6基因的过度表达。

妇科千金片对急性盆腔炎大鼠子宫、卵巢NF-κB、IL-6 mRNA表达的影响

妇科千金片是国家中药保护品种,广泛妇科炎症及其它各类慢性炎症,临床疗效确切,但其作用的物质基础及机制尚不十分明确。我们的前期研究发现妇科千金片能促进急性盆腔炎大鼠血清IgA、IgG、IgM的表达,明显降低外周血白细胞总数,使中性粒细胞比例下降而淋巴细胞比例升高[1],这些研究提示妇科千金片的抗炎作用与免疫调节密切相关。近年来。

依达拉奉对单肺通气患者围术期细胞因子IL-6、IL-8及其mRNA表达的影响

目的:观察依达拉奉对单肺通气患者围术期炎性细胞因子IL-6、IL-8及其mRNA表达的影响。方法:择期拟行肺叶切除术肺癌患者24例,ASAⅠ级或Ⅱ级,年龄48～67岁,随机分为2组:对照组(C组)和依达拉奉组(E组),每组12例。麻醉诱导:两组均静脉注射咪唑安定0.03mg/kg、芬太尼3μg/kg,吸入8%七氟醚。麻醉诱导后,E组给予依达拉奉0.5mg/kg;C组给予等量生理盐水。麻醉维持:间断静脉注射维库溴铵0.04～0.08mg/kg、芬太尼0.05～0.1mg,七氟醚呼气末浓度维持在1.8%～2.7%。两组均在麻醉后切皮前(T1)、膨肺后60min(T2)、术后1h(T3)采取血样测定白细胞介素IL-6、IL-8血浆浓度及其mRNA表达。结果:与T1比较,两组IL-6、IL-8血浆浓度及其mRNA表达于T2-3明显上升(P<0.05);与C组相比,E组IL-6、IL-8血浆浓度及其mRNA表达于T2-3显著低于C组(P<0.05)。结论:依达拉奉应用于单肺通气患者可有效抑制机体促炎细胞因子的生成和释放。

神昌注射液对脑栓塞大鼠IL-6 IL-8 mRNA表达的影响

目的:探讨神昌注射液对缺血再灌注脑损伤大鼠脑组织IL-6、IL-8 mRNA表达的影响。方法:MCAO法造成大鼠脑缺血再灌注损伤模型,静脉给药7次,采用荧光定量RT-PCR法测定大鼠脑组织IL-6、IL-8mRNA表达。结果:神昌注射液明显降低缺血再灌注脑损伤大鼠脑组织IL-6、IL-8mRNA表达。结论:神昌注射液抗脑缺血损伤的作用机制之一可能是通过减少IL-6和IL-8的表达、减轻其引发的一系列损伤。