过敏性鼻炎患者外周血CD4^(+)2型辅助T(Th2)细胞中IL-18的表达升高

目的 探讨过敏性鼻炎(AR)患者外周血2型辅助T(Th2)细胞白细胞介素18(IL-18)、 IL-18结合蛋白亚型a(IL-18BPa)和IL-18受体α(IL-18Rα)的表达水平及过敏原对其表达的影响。方法 采用大籽蒿花粉过敏原粗提液(ASWE)和梧桐花粉过敏原粗提液(PPAE)、室尘螨过敏原粗提液(HDME)激发外周血单个核细胞和免疫磁珠分选后的CD4^(+)T细胞,流式细胞术检测上述标本CD4^(+)Th2细胞中IL-18、 IL-18BPa和IL-18Rα的表达,BioPlex检测血浆IL-4的水平,并分析其与IL-18+Th2细胞比例的相关性。结果 与正常对照相比,AR患者外周血CD4^(+)Th2细胞中IL-18+细胞的比例增加,IL-18的平均荧光强度(MFI)增强;IL-18Rα MFI降低。过敏原可直接诱导分选后的HC CD4^(+)Th2细胞表达IL-18和IL-18Rα, AR患者CD4^(+)Th2细胞表达IL-18Rα。AR患者血浆IL-4水平升高,并与IL-18+Th2细胞的比例相关。结论 过敏原可能通过诱导外周血CD4^(+)Th2细胞表达IL-18参与AR发病。

桑叶和鸭跖草对人TH_1、TH_2细胞IFN-γ、IL-4水平影响的体外实验研究

目的 用体外实验观察中药桑叶、鸭跖草对正常人外周血Th1 、Th2 细胞IFN γ、IL 4水平的影响。方法 选取健康献血员 3 0名无菌采集静脉抗凝血 ,用淋巴细胞分离液分离外周血单核细胞 (PBMC) ,并调成 1× 10 6 /ml浓度加PHA P10 μg/ml。分二组 ,分别加入含中药桑叶、鸭跖草的小鼠血清及不含药小鼠血清(对照 ) ,置 5 %CO2 细胞培养箱 3 7℃孵育 48h ,取上清液川流式细胞术检测IFN γ、IL 4水平。结果 正常人外周血单核细胞Th1 /Th2 处于动态平衡 ;桑叶组Th1 、Th2 细胞的IFN γ、IL 4水平明显升高 ,与对照组相比P<0 0 5 ;鸭跖草组Th1 、Th2 细胞的两类细胞因子水平虽有所上升 ,但与对照纽相比不显著 (P >0 0 5 )。结论 中药桑叶具有提高正常人Th1 、Th2 细胞的IFN γ、IL 4水平 ,鸭跖草的作用不明显。

观察全身热疗、化疗联合治疗晚期NSCLC患者对其机体Th1Th2平衡及IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10、VEGF水平的影响

目的 探讨全身热疗、化疗联合应用于晚期非小细胞肺癌患者治疗过程中的具体效果及对机体Th1/Th2平衡、IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10、VEGF水平的影响情况.方法 研究组晚期NSCLC患者选择全身热疗+化疗,对照组晚期NSCLC患者选择局部热疗+化疗.结果 研究组临床总有效率(60.00%)显著高于对照组(33.33%),P<0.05;两组治疗前Th1/Th2、VEGF、IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10检测值对比均P>0.05,治疗后研究组Th1/Th2、IL-2、IFN-γ水平提高幅度以及VEGF、IL-4、IL-10水平下降幅度均大于对照组(P<0.05).结论 应用全身热疗、化疗联合治疗晚期NSCLC患者可显著提高其临床疗效,有利于改善相应实验室检查指标.

射干麻黄重楼汤加减对过敏性哮喘冬季发作患者血清IL-4及Th1/Th2因子影响研究

目的：探讨射干麻黄重楼汤加减对过敏性哮喘冬季发作患者血清IL-4及Th1/Th2因子的影响。方法：研究对象选取74例过敏性哮喘患者,均尘螨点刺结果阳性,随机分成两组,每组37例。均予多索茶碱、特布他林等常规治疗,对照组予屋尘螨变应原提取物皮下注射,研究组在上述基础上予中药射干麻黄重楼汤加减口服。检测治疗前后血清Th1/Th2因子、特异性SIgG4以及ECP,评估肺功能和日夜间过敏性哮喘症状评分,比较治疗效果及安全性。结果：与治疗前比较,两组IL-2、IFN-γ升高（P〈0.05）。IL-4、IgE降低（P〈0．05），户尘螨SIgG4、粉尘螨SIgG4升高（P〈0．05），ECP降低（P〈0．05），PEF、FEV1、FEV1／FVC升高（P〈0．01），日间、夜间过敏性哮喘评分降低（P〈0．01）；与对照组比较，研究组IL-2、IFN-γ较高（P〈0．05），IL-4、IgE较低（P〈0．05），户尘螨SIgG4、粉尘螨SIgG4较高（P〈0．05），ECP较低（P〈0．05），PEF、FEV1、FEV1／FVC较高（P〈0．01），日间、夜间过敏性哮喘评分较低（P〈0．01），总有效率较高（P〈0．05），安全性无差异（P〉0．05）。结论：射干麻黄重楼汤加减治疗过敏性哮喘效果理想,且能调节血清Th1/Th2细胞因子平衡,值得借鉴。

参芪地黄汤联合羟氯喹治疗IgA肾病的疗效观察及对Th1/Th2平衡的影响

目的:观察参芪地黄汤联合羟氯喹(HCQ)治疗气阴两虚型IgA肾病(IgAN)的临床疗效及其对Th1/Th2平衡的影响。方法:将42例气阴两虚型IgA肾病患者随机分成观察组和对照组,各21例,对照组给予口服HCQ,观察组在对照组基础上另予参芪地黄汤,两组均连续干预8周。比较两组患者的临床疗效和治疗前后中医症状评分、常规生化指标[血肌酐(SCr)、白蛋白(Alb)]、24 h尿蛋白定量(24 h-uPQ)、细胞因子[γ干扰素(INF-γ)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-10(IL-10)]及辅助性T淋巴细胞(Th)水平。结果:观察组临床总有效率(81.0%)高于对照组(57.1%)(P<0.05);治疗后两组患者各项中医症状评分均较治疗前降低,且观察组低于对照组(P<0.05);治疗后两组患者SCr、24 h-uPQ、INF-γ、Th1和Th1/Th2水平均较治疗前降低,且观察组低于对照组(P<0.05);治疗后两组患者Alb、IL-4、IL-10及Th2水平均较治疗前升高,且观察组高于对照组(P<0.05);结论:参芪地黄汤联合HCQ能明显改善气阴两虚型IgAN患者的临床症状,有效控制尿蛋白和延缓肾功能衰竭,调节免疫功能及缓解微炎症状态,临床疗效确切。

IL-4、IL-10和抗IL-12受体β1mAb抑制IL-23诱导正常人记忆T细胞IFN-γ产生

目的探讨重组人白介素23(IL23)是否能够诱导正常人T细胞IFNγ的产生,作用的靶细胞亚群和调节因素。方法正常人PBMC在抗CD3(antiCD3)单克隆抗体或antiCD3和抗CD28(antiCD28)单克隆抗体刺激的条件下与IL23进行培养,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养液中IFNγ的水平;同时采用流式细胞仪,在单个细胞水平上分析IL23诱导PBMCIFNγ表达的T细胞亚群。结果在未经任何刺激的情况下,PBMC产生很低或不产生IFNγ。IL23呈剂量依赖方式促进由antiCD3活化的PBMCIFNγ产生。细胞亚群分析的结果表明,IL23诱导记忆CD4+和CD8+T细胞表达IFNγ,对活化的CD4+T细胞作用较为明显。Th2细胞因子(IL4、IL10)和抗IL12受体β1mAb(IL12Rβ1)抑制IL23诱导T细胞IFNγ产生。结论IL23促进活化的记忆CD4+和CD8+T细胞IFNγ的产生。Th2细胞因子和抗IL12Rβ1mAb抑制由IL23诱导IFNγ产生,提示这些细胞因子和抗体对IL23引起的自身免疫病具有拮抗作用。

过敏性紫癜患儿血浆IL-2、IFN-γ、IL-4与TGF-β1的变化及其意义

目的探讨儿童过敏性紫癜(henoch-schonlein purpura,HSP)血浆白细胞介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)、白细胞介素-4(IL-4)与转化生长因子β1(TGF-β1)的变化及其意义。方法四川省人民医院儿科2009年2月至2010年2月收治的急性期HSP患儿46例(HSP组)以及同期常规体检健康儿童30例(对照组),均采用Luminex-100液相芯片技术检测血浆细胞因子IL-2、IL-4及IFN-γ,双抗体夹心ABC-ELISA法检测血浆TGF-β1,比较两组IL-2、IL-4、IFN-γ及TGF-β1的水平。结果 HSP组IL-2、IFN-γ水平均低于对照组,IL-4、TGF-β1的表达水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 HSP患儿存在细胞因子分泌紊乱,可能是HSP患儿发病的分子生物学基础。

Th2细胞因子和抗IL-12Rβ1mAb抑制由IL-23诱导PBMCIFN-γ的产生

目的:探讨重组人白介素23(IL-23)诱导正常人PBMC IFN-γ的产生,细胞亚群和调节因素。方法:正常人PBMC在不同条件下与IL-23进行培养,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养液中IFN-γ的水平。同时采用流式细胞仪,分析IL-23诱导PBMC IFN-γ表达的细胞亚群。结果:IL-23呈剂量依赖性诱导PBMC IFN-γ产生,并可与IL-2协同诱导IFN-γ的产生。细胞亚群分析的结果表明,IL-23诱导高表达CD56+NK细胞产生IFN-γ,对CD4+和CD8+T细胞无明显作用。Th2细胞因子和抗IL-12受体β1mAb(IL-12Rβ1)抑制IL-23诱导IFN-γ产生。结论:IL-23可直接作用于CD3-CD56+NK细胞,诱导产生IFN-γ。Th2细胞因子和抗IL-12Rβ1mAb抑制IL-23诱导IFN-γ产生,提示可以用于由IL-23引起自身免疫病的治疗。

小檗碱通过抑制Th1恢复IFN-γ/IL-4平衡减轻迟发型超敏反应

目的:观察小檗碱对卵清蛋白(ovalbumin,OVA)诱导的迟发型超敏反应(delayed type hypersensitivity,DTH)模型小鼠的作用并探讨其机制。方法:32只小鼠随机分为对照组、DTH组、小檗碱组、DTH+小檗碱组,制备DTH模型给予小檗碱处理;测量小鼠足垫肿胀厚度,苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE)法观察炎性细胞浸润,酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测足垫组织匀浆中γ干扰素(interferon-γ,IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白介素-4(interleukin-4,IL-4)的表达,制备脾脏单个核细胞,刀豆蛋白(concanavalin A,Con A)实验观察IFN-γ水平,卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏实验检测上清IFN-γ、IL-4表达。结果:小檗碱处理明显降低小鼠足垫肿胀程度,减少炎症细胞浸润,抑制足垫组织中IFN-γ、TNF-α炎性因子释放,并减少脾脏组织中IFN-γ的分泌,抑制Th1反应,恢复IFN-γ/IL-4平衡(P<0.01,P<0.001),差异均有统计学意义。结论:小檗碱通过抑制Th1反应,恢复IFN-γ/IL-4平衡发挥对迟发型超敏反应的抑制作用。

孟鲁司特联合舒利迭治疗哮喘的临床疗效及对Th17、Treg细胞平衡和IL-4、IFN-γ表达的影响

目的研究孟鲁司特联合沙美特罗替卡松(舒利迭)治疗对哮喘患者辅助性T细胞17(Th17)、调节性T(Treg)细胞平衡以及白介素-4(IL-4)、γ干扰素(IFN-γ)表达的影响。方法临床纳入126例哮喘患者作为研究对象,所有患者按床位单双号分为两组各63例。其中63例患者采用沙美特罗替卡松治疗作为对照组,另63例患者在上述基础上联合孟鲁司特治疗作为研究组。观察两组患者肺功能水平变化情况、炎症因子水平变化情况以及免疫功能水平变化情况。结果治疗前两组患者FEV1、FVC以及FEV1/FVC比较,差异均无统计学意义;治疗后研究组FEV1、FVC以及FEV1/FVC水平明显大于对照组(P<0.05)。治疗前两组患者IL-4、IFN-γ水平比较,差异均无统计学意义;治疗后研究组IL-4、IFN-γ水平优于对照组(P<0.05)。治疗前两组患者Th17、Treg值比较,差异均无统计学意义;治疗后研究组Th17、Treg值与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论孟鲁司特联合舒利迭治疗哮喘效果较好,明显提高患者肺功能水平,抑制炎症反应,改善免疫功能,值得临床应用及推广。

慢性乙型肝炎患者IFN-r、IL-2、IL-4、IL-10的活性测定及其相关性研究

目的 :探讨慢性乙型肝炎 (CHB)患者外周血单个核细胞 (PBMC)Th1 、Th2 两类细胞因子的分泌情况及其对肝功能的影响。方法 :以夹心ELISA法检测 41例CHB患者PBMC经PHA刺激后 ,培养上清液中Th1类细胞因子 (IFN -r、IL -2 )和Th2 类细胞因子 (IL -4、IL -10 )的活性 ,PCR法检测患者外周血清HBVDNA。结果 :CHB患者无论血清HBVDNA阳性组还是阴性组 ,IL -2活性较对照组显著降低 (P <0 0 1) ,IFN -r降低 ,但差异不显著 (P >0 0 5 ) ;血清HBVDNA阳性组IL -2活性较HBVDNA阴性组显著增高 (P <0 0 1) ,IL -10显著降低 (P <0 0 5 ) ,IL -4降低但无显著性差异 (P >0 0 5 ) ;血清HBVDNA阳性组ALT与GGT活性显著高于阴性组 ( P <0 0 5 )。结论 :在CHB患者体内存在着Th1 、Th2 免疫应答失衡 ,Th1、Th2两类细胞因子水平的改变引起细胞免疫功能紊乱 ,由此造成HBV持续性感染及肝损伤。

TGF-β_1对γδT细胞TLR-4受体及IL-2、IFN-γ水平的影响

目的探讨转化生长因子β_1(TGF-β_1)对γδT淋巴细胞Toll样受体4(TLR-4)蛋白表达的影响,及TGF-β_1对γδT淋巴细胞分泌淋巴因子白细胞介素2(IL-2)、干扰素γ(IFN-γ)的影响。方法从健康志愿者外周血中分离纯化γδT淋巴细胞,并用外源性TGF-β_1、脂多糖(LPS)刺激γδT淋巴细胞,分为4组培养:空白对照组、LPS组、LPS+TGF-β_1组、TGF-β_1组。培养12 d后采用酶联免疫吸附法检测淋巴因子IFN-γ、IL-2的表达,Western blot检测TLR-4蛋白的表达,PCR检测TLR-4基因的转录。结果与空白对照组相比,LPS组、LPS+TGF-β_1组TLR-4蛋白的转录及表达水平升高(P<0.05),淋巴因子IL-12和IFN-γ的表达增加;TGF-β_1组TLR-4蛋白的表达、转录及IL-2的表达降低(P<0.05)。与LPS组相比,LPS+TGF-β_1组TLR-4蛋白的转录及表达、淋巴因子IL-12和IFN-γ的表达降低(P<0.05)。结论TGF-β_1能抑制γδT淋巴细胞TLR-4蛋白的表达,降低γδT淋巴细胞分泌IFN-γ、IL-2淋巴因子的水平。

再生障碍性贫血外周血Th17和CD4^+ CD25^+ Treg细胞表达情况研究

本研究旨在探讨成人再生障碍性贫血(aplastic anemia,AA)外周血Th17和CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)表达情况。45例初发AA患者分为轻型AA(n=25)和重型AA(n=25)两组,15例正常人作为对照。应用流式细胞术检测AA患者外周血中Th17和CD4+CD25+Treg的比例,ELISA检测血清及刺激后外周血单个核细胞(PBMNC)上清液中的白介素(IL-17)、γ干扰素(IFN-γ)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,并与正常对照组比较。结果表明:重型AA(SAA)组外周血Th17细胞比例,血清中IL-17及IFN-γ表达高于轻型AA(MAA)和正常人组,而重型AA组外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞比例降低。与轻型AA和正常对照相比,重型AA患者单个核细胞培养后上清液中IL-17及IFN-γ表达水平显著增加。AA患者血红蛋白计数与Th17细胞及血清IL-17表达呈负相关,与CD4+CD25+Treg表达成正相关。结论:重型AA患者外周血Th17细胞应答增强,而CD4+CD25+Treg细胞缺乏,贫血的严重程度与外周血Th17/Treg免疫应答失衡密切相关。

复方黑骨藤对佐剂性关节炎大鼠IL-4、IFN-γ及TGF-β1表达的影响

目的:研究复方黑骨藤对佐剂性关节炎大鼠模型血清中IL-4、IFN-γ和TNF-α及关节滑膜组织中TGF-β1的表达水平的影响,以深入探讨复方黑骨藤对类风湿关节炎的治疗作用及其相关机制。方法:构建大鼠弗氏完全佐剂性(AA)关节炎模型,通过ELISA与免疫组化方法分别检测大鼠血液中IL-4、IFN-γ、TNF-α的含量和大鼠膝关节滑膜组织中TGF-β1的含量。结果:模型组与正常组比较,血清的IFN-γ、TNF-α水平升高,IL-4和滑膜组织中的TGF-β1水平降低(P<0.01)。复方黑骨藤组与模型组比较血清中IFN-γ、TNF-α水平显著下降,IL-4、TGF-β1水平上调,与模型组有显著性差异。结论:本实验研究表明复方黑骨藤能显著抑制IFN-γ、TNF-α的表达,增强IL-4、TGF-β1的表达,调整大鼠Th1/Th2细胞及其细胞因子失衡,从而减轻关节滑膜炎症的持续发展和软骨破坏,对实验性类风湿关节炎的滑膜组织中T细胞增生及浸润具有显著的抑制作用。

卒中相关感染患者外周血皮质醇、IFN-γ、IL-4和IL-10的变化

目的探讨卒中相关感染(SAI)患者血清皮质醇及血浆γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素10(IL-10)水平的变化。方法连续收集发病24 h内入院的急性脑梗死或脑出血患者共85例,根据入院7 d内有无感染将患者分为感染组(n=29)和非感染组(n=56)。分别于入院第1天和第7天,采用化学发光法测定血清皮质醇水平,双抗体夹心酶联免疫反应测定血浆IFN-γ、IL-4和IL-10水平。采用多因素非条件逐步Logistic回归分析法分析SAI的易感因素。结果入院第1天和第7天,感染组皮质醇、IL-4和IL-10水平均显著高于非感染组(P<0.05),IFN-γ水平显著低于非感染组(P<0.05)。入院第1天,相关性分析显示,皮质醇与IFN-γ水平呈负相关(r=-0.299,P=0.024),与IL-4、IL-10水平呈正相关(r=0.298,P=0.040;r=0.306,P=0.026)。Logistic回归分析显示,入院第1天皮质醇水平升高是SAI发生的独立危险因素(OR=0.903,95%可信区间为0.816～1.000,P=0.05)。结论皮质醇、IFN-γ、IL-4和IL-10在SAI发生中起重要作用。

喘可治注射液对COPD大鼠IL-12/IL-12R/STAT4信号通路的影响

目的观察喘可治注射液(CKZ)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺组织IL-12/IL-12R/STAT4信号通路的影响。方法 50只SD大鼠随机分为正常组,模型组,CKZ高、中、低剂量(CKZ-H、CHZ-M、CKZ-L)组。除正常组外,各组复制COPD大鼠模型,并给予相应药物治疗,观察CKZ对COPD大鼠血清和肺泡灌洗液(BALF)中γ-干扰素(IFN-γ)、白细胞介素12(IL-12)、白细胞介素12受体(IL-12R)以及肺组织信号转导子和转录激活子4(STAT4)m RNA表达的影响。结果喘可治注射液各剂量组肺组织病理形态均有不同程度的改善,且降低COPD大鼠血清和BALF中IFN-γ、IL-12、IL-12R(除CKZ-L组BALF中IL-12R外)水平(P<0.05,P<0.01),可抑制大鼠肺组织STAT4 m RNA的表达(P<0.01,P<0.05)。结论喘可治注射液能一定程度改善COPD大鼠肺组织病理损害,其作用机制可能与其抑制IFN-γ、IL-12、IL-12R表达,干扰IL-12/IL-12R/STAT4信号通路对靶基因的激活,下调STAT4 m RNA表达,进而调节Th1/Th2分化失衡有关。

山核桃树枝水煎剂的抑瘤作用及其对S_(180)荷瘤小鼠IL-2和IL-4影响的实验研究

目的:探讨山核桃树枝水煎剂(DJM)的抑瘤作用及其对S180荷瘤小鼠外周血白细胞介素-2(IL-2)和白细胞介素-4(IL-4)水平的影响。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)的方法检测荷瘤鼠外周血IL-2和IL-4的水平。结果:DJM对荷瘤鼠的抑瘤率为35.68%,DJM对荷瘤鼠外周血IL-2水平较模型组明显升高(P<0.01),IL-4水平较模型组降低(P<0.05)。结论:DJM对S180荷瘤小鼠肿瘤组织的生长具有明显的抑制作用;DJM可通过提高荷瘤小鼠外周血IL-2水平,降低IL-4水平来逆转Th1/Th2漂移,发挥抗肿瘤作用。

DV2 NGC株感染BALB/C小鼠后IL-4、IFN-γ产生动态的研究

目的 :观察 2型登革病毒NGC株感染BALB C小鼠后其IL 4、IFN γ产生动态 ,研究登革病毒感染的免疫机制。方法 :用不同含量的DV2NGC株经皮下多点注射 ,间接ELISA法测定感染后不同时间各组小鼠血浆IL 4、IFN γ含量。结果 :DV2NGC株感染小鼠产生IL 4和IFN γ动态不同。初次感染早期 ,IL 4水平明显升高 ,而IFN γ处于较低水平 ;再次感染后第 1天 ,IL 4水平达最高峰 ( 4 2 94 6 6 8± 349 0 38pg ml) ,IFN γ则于第 4天和第 11天达较高水平 ,两者的产生彼消此长 ,且产生动态与感染病毒量有关。结论 :DV2NGC株感染早期 ,体液免疫和细胞免疫相互影响 ,体液免疫占主导作用 ,为Th2应答优势。但在登革热感染后期 ,细胞免疫一定程度抑制Th2应答 。

慢性丙型肝炎病毒感染者外周血单个CD4^+Th细胞内IFN-γ及IL-4的表达

目的 :研究慢性丙型肝炎病毒 (HCV )感染者外周血单个核细胞 (PBMC )中Th细胞内IL 4和IFN γ的表达情况 ,探讨Th1/Th2细胞及其细胞因子在慢性HBV感染中的作用。方法 :常规分离PBMC ,在PMA、ionomycin、monensin的刺激下 ,应用FCM检测慢性HCV感染者外周血Th细胞内IL 4和IFN γ表达情况 ,采用ELISA法检测血清可溶性白细胞介素 2受体 (sIL 2R)水平。结果 :在慢性HCV感染者中 (包括慢性HCV携带者、慢性丙型肝炎以及肝硬化患者 )分泌IFN γ的细胞百分数远高于对照组 (P <0 0 1) ;各实验组分泌IL 4的细胞百分数均很低 ,并且与疾病的进展无任何关联。在慢性HCV感染者中血清sIL 2R水平明显高于健康对照组 ,并且与分泌IFN γ的细胞百分数呈正相关。结论 :在HCV感染的不同阶段 ,血清sIL 2R和IFN γ水平均升高 ,Th1细胞因子或Th1细胞可能在慢性HCV感染肝脏损伤的发病机制中起重要作用。