橄榄苦苷调节IL-6/STAT3信号通路对肺癌细胞恶性生物学行为的影响

目的 初步探讨橄榄苦苷(Ole)调节白细胞介素-6(IL-6)/信号转导与转录激活子3(STAT3)信号通路对肺癌细胞恶性生物学行为的影响。方法 MTT法检测细胞增殖抑制率,筛选Ole最佳干预浓度;将A549细胞分为对照组、Ole低、中、高剂量组、rIL-6组(Ole高剂量+IL-6/STAT3通路激活剂)。A549细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡依次用EdU染色、Transwell、流式细胞术检测;增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(Cleaved Caspase-3)及IL-6/STAT3信号通路蛋白表达用Western Blot法检测;构建肺癌移植瘤模型,测定移植瘤的体积和质量,免疫组化检测移植瘤中Ki-67、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达,TUNEL染色检测肿瘤组织细胞凋亡。结果 与对照组比较,Ole低、中、高剂量组EdU阳性细胞率、迁移与侵袭细胞数、PCNA、MMP-2、IL-6、p-STAT3/STAT3表达显著降低,细胞凋亡率、Cleaved Caspase-3表达显著升高(P<0.05);IL-6/STAT3通路激活剂rIL-6减弱了Ole对A549恶性生物学行为抑制作用(P<0.05);体内实验表明,Ole显著降低移植瘤质量、体积及Ki-67、MMP-9、IL-6、p-STAT3/STAT3蛋白表达,升高肿瘤细胞凋亡率(P<0.05)。结论 Ole在体内体外可能通过抑制IL-6/STAT3信号通路,进而抑制A549细胞的恶性生物学行为。

基于IL-6/STAT3信号通路探讨山楂酸对小鼠结肠癌CT26细胞增殖、凋亡的影响

目的从IL-6/STAT3信号通路探讨山楂酸(MA)对小鼠结肠癌CT26细胞增殖、凋亡的影响。方法体外培养CT26细胞,设置空白组、10、20、30、35、40μmoL·L^(-1)MA组。干预24 h后,采用CCK-8法检测山楂酸对细胞活力的影响,采用RT-PCR检测IL-6 mRNA表达水平,采用流式细胞仪检测各组细胞凋亡率,采用Western blotting检测各组细胞中STAT3通路相关蛋白的表达水平。设置空白组、IL-6(20 ng·μL^(-1))刺激组、不同浓度MA与IL-6共刺激组,采用Western blotting检测各组细胞p-STAT3、STAT3蛋白的表达水平。设置空白组、MA组、磷酸酶抑制剂(正钒酸钠)组和MA+正钒酸钠组,采用Western blotting检测各组细胞p-STAT3、STAT3蛋白的表达水平。结果与空白组相比,CCK-8结果显示20、30、35、40、45、50μmoL·L^(-1)浓度的山楂酸均能降低CT26细胞活力(P<0.05),IC50=37.32μmoL·L^(-1);RT-PCR结果显示30、35、40μmoL·L^(-1)给药组细胞中IL-6 mRNA水平下降(P<0.05);流式细胞术结果显示30、35、40μmoL·L^(-1)给药组细胞凋亡率增加(P<0.05);Western blotting结果显示35、40μmoL·L^(-1)给药组细胞中STAT3通路相关蛋白p-STAT3、Bcl-2蛋白表达水平下降(P<0.05),MA+正钒酸钠组能恢复MA单独给药组中被降低的p-STAT3蛋白水平(P<0.05)。结论MA可能通过降低IL-6的表达水平,抑制STAT3的磷酸化,从而降低抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,促进肿瘤细胞凋亡,抑制其增殖。

白术内酯Ⅰ调节IL-6/STAT3信号通路对子宫内膜癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的探讨白术内酯Ⅰ调节白细胞介素-6(IL-6)/信号传导及转录激活蛋白3(STAT3)信号通路对子宫内膜癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法用不同浓度白术内酯Ⅰ(0、25、50、75、100、150μmol/L)处理子宫内膜RL-952细胞,MTT法检测细胞存活率;将RL-952细胞分为对照组(无处理)、白术内酯Ⅰ(50μmol/L)组、IL-6组(10 ng/mL)、白术内酯Ⅰ(50μmol/L)+IL-6组(10 ng/mL),MTT法、Edu染色检测细胞增殖;qRT-PCR法检测细胞中IL-6、STAT3表达水平;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;western blot检测MMP-2、Ki-67、IL-6、p-STAT3、STAT3蛋白表达水平。结果与0μmol/L比较,25μmol/L、50μmol/L、75μmol/L、100μmol/L、150μmol/L白术内酯Ⅰ干预的RL-952细胞存活率显著下降,呈浓度依赖性(P<0.05);与对照组比较,白术内酯Ⅰ组RL-952细胞活力、增殖率、迁移和侵袭个数、IL-6和STAT3 mRNA表达、MMP-2、Ki-67、IL-6、p-STAT3/STAT3蛋白表达水平显著性降低(P<0.05),细胞凋亡率显著性升高(P<0.05),IL-6组RL-952细胞活力、增殖率、迁移和侵袭个数、IL-6和STAT3 mRNA表达、MMP-2、Ki-67、IL-6、p-STAT3/STAT3蛋白表达水平显著性升高(P<0.05),细胞凋亡率显著性降低(P<0.05);与白术内酯Ⅰ组比较,白术内酯Ⅰ+IL-6组RL-952细胞活力、增殖率、迁移和侵袭个数、IL-6和STAT3 mRNA表达、MMP-2、Ki-67、IL-6、p-STAT3/STAT3蛋白表达水平显著性升高(P<0.05),细胞凋亡率显著性降低(P<0.05);与IL-6组比较,白术内酯Ⅰ+IL-6组RL-952细胞活力、增殖率、迁移和侵袭个数、IL-6和STAT3 mRNA表达、MMP-2、Ki-67、IL-6、p-STAT3/STAT3蛋白表达水平显著性降低(P<0.05),细胞凋亡率显著性升高(P<0.05)。结论白术内酯Ⅰ可能通过抑制IL-6/STAT3信号通路来抑制子宫内膜癌RL-952细胞增殖、迁移和侵袭。

苦参碱调节IL-6/STAT3信号通路对炎症性肠病大鼠肠黏膜损伤的影响

【目的】观察苦参碱调节白细胞介素6(IL-6)/信号转导子和转录激活子3(STAT3)信号通路对炎症性肠病(IBD)大鼠肠黏膜损伤的影响。【方法】以三硝基苯磺酸(TNBS)结肠灌注法构建IBD大鼠模型,随机分为模型组,苦参碱低、高剂量组,苦参碱高剂量+colivelin(STAT3激活剂)组,每组10只;再选10只大鼠结肠灌注等体积生理盐水作为正常组。经苦参碱和colivelin处理后,检测各组大鼠体质量和疾病活动指数(DAI),采用苏木素-伊红(HE)染色法检测大鼠结肠黏膜组织病理学变化,透射电镜观察大鼠结肠黏膜组织超微结构变化,采用酶联免疫吸附分析(ELISA)和比色法分别检测大鼠血清和结肠黏膜组织白细胞介素6(IL-6)、C-反应蛋白(CRP),超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平,采用蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测大鼠结肠黏膜组织IL-6/STAT3通路相关蛋白表达。【结果】与正常组比较,模型组大鼠结肠黏膜组织发生严重病理损伤且其超微结构受损明显,DAI,结肠黏膜组织病理评分,血清和结肠黏膜组织CRP、IL-6、MDA水平,结肠黏膜组织IL-6蛋白表达及p-STAT3/STAT3比值显著升高(P<0.05),体质量、血清和结肠黏膜组织SOD水平显著降低(P<0.05);与模型组比较,苦参碱低、高剂量组大鼠结肠黏膜组织病理损伤及其超微结构受损均减轻,DAI,结肠黏膜组织病理评分,血清和结肠黏膜组织CRP、IL-6、MDA水平,结肠黏膜组织IL-6蛋白表达及p-STAT3/STAT3比值均降低(P<0.05),体质量、血清和结肠黏膜组织SOD水平均升高(P<0.05),且呈剂量依赖性;与苦参碱高剂量组比较,苦参碱高剂量+colivelin组大鼠结肠黏膜组织病理损伤及其超微结构受损加重,DAI,结肠黏膜组织病理评分,血清和结肠黏膜组织CRP、IL-6、MDA水平,结肠黏膜组织IL-6蛋白表达及p-STAT3/STAT3比值升高(P<0.05),体质量、血清和结肠黏膜组织SOD水平降低(P<0.05)。【结论】苦参碱可通过阻止IL-6/STAT3信号通路激活降低炎症及氧化应激水平,进而减轻IBD大鼠肠黏膜损伤。

麻杏石甘汤对咳嗽变异型哮喘大鼠IL-6/STAT3信号通路及TRPV1感受器的影响

【目的】探讨麻杏石甘汤对咳嗽变异型哮喘(CVA)大鼠的治疗作用及机制。【方法】将60只大鼠随机分为正常组,模型组,麻杏石甘汤低、高剂量组,麻杏石甘汤高剂量+信号转导和转录激活因子3(STAT3)激活剂Colivelin(Col)组,每组12只。除正常组外,其他各组大鼠采用腹腔注射卵清蛋白结合艾条熏蒸法构建CVA模型。对应治疗后,观察大鼠体征和咳嗽次数,肺功能仪检测气道阻力(RE),Diff-Quik染色计数嗜酸性粒细胞(EOS),苏木素-伊红(HE)染色法观察肺、支气管组织病理学特征,酶联免疫吸附分析(ELISA)检测肺组织单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量,Western Blot法检测肺组织白细胞介素6(IL-6)、STAT3、瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)蛋白表达水平。【结果】与正常组比较,模型组大鼠出现明显哮喘症状,肺组织可见炎性细胞浸润严重,支气管上皮细胞坏死、纤毛粘连、黏液多,RE,EOS数目,MCP-1、TNF-α含量,以及IL-6、STAT3、TRPV1蛋白表达水平均升高(P<0.05);与模型组比较,麻杏石甘汤低、高剂量组大鼠哮喘症状明显改善,肺及支气管损伤减轻,RE,EOS数目,MCP-1、TNF-α含量以及IL-6、STAT3、TRPV1蛋白表达水平呈剂量依赖性降低(P<0.05);与麻杏石甘汤高剂量组比较,麻杏石甘汤高剂量+Col组大鼠哮喘加重,肺及支气管损伤加重,RE,EOS数目,MCP-1、TNF-α含量以及IL-6、STAT3、TRPV1蛋白表达水平升高(P<0.05)。【结论】麻杏石甘汤可有效改善CVA大鼠症状,其机制与抑制IL-6/STAT3信号通路及TRPV1高表达有关。

ALDH3A1通过IL-6/STAT3信号通路激活GMA诱导的恶性转化16HBE细胞上皮间充质转化

目的:甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)作为一种广泛应用于各种复合材料合成和改性的化学物,已被国际癌症研究机构(IARC)归类为2A类致癌物,但其具体的致癌机制仍不明确。本研究拟探讨GMA诱导16HBE细胞发生恶性转化的关键分子机制是否与醛脱氢酶3A1(ALDH3A1)的表达变化相关。方法:在课题组前期建立的GMA诱导的恶性转化16HBE细胞模型中使用瞬时转染技术过表达ALDH3A1后,分别通过Western blot和qPCR法分析IL-6/磷酸化转录3激活剂(STAT3)通路及上皮间充质转化(EMT)过程标志物E钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、基质金属蛋白酶3(MMP3)、Snail的蛋白和mRNA表达情况。结果:Western blot和qPCR检测结果表明,与对照组相比,ALDH3A1过表达组细胞中E-cadherin表达增加,而IL-6、STAT3、p-STAT3、MMP3及Snail均表达降低(P<0.05),同时MMP3、Snail、Vimentin转录水平下调(P<0.05)。ALDH3A1通过抑制IL-6/STAT3通路激活,减弱了GMA诱导的恶性转化16HBE细胞中EMT过程多个关键蛋白的表达。结论:ALDH3A1与GMA诱导的16HBE细胞恶性转化过程密切相关,并且通过IL-6/STAT3通路激活促使细胞上皮间充质转化能力增强。本研究的结果将有助于阐明GMA的致癌机制,并为GMA暴露的健康效应评估提供了潜在的生物标志物。

免疫趋化因子CXCR4通过IL-6/STAT3信号通路调控胃癌炎症因子分泌和凋亡

目的研究趋化因子CXCR4通过IL-6/STAT3信号通路对胃癌细胞凋亡的影响及对相关机制。方法荧光定量PCR和免疫印迹法(Western blotting)检测人胃癌组织和癌旁组织(PCT)中免疫趋化因子CXCR4 mRNA和蛋白表达。其次,在人胃癌细胞系SGC7901中转染敲低和过表达CXCR4慢病毒。TUNEL染色检测SGC7901细胞凋亡情况;MTT检测SGC7901细胞增殖情况;Western blotting检测细胞凋亡相关蛋白Bax和Bcl2表达。进一步地,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测炎症因子分泌水平;实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测IL-6/STAT3信号通路IL-6 mRNA表达;Western blot检测STAT3-Ser727蛋白表达。此外,SGC7901细胞中敲低CXCR4后联合IL-6/STAT3信号通路激动剂脂多糖(LPS),同时SGC7901细胞中过表达CXCR4后联合IL-6/STAT3信号通路抑制剂angoline或bruceantinol,然后用TUNEL染色检测SGC7901细胞凋亡情况、Western blot检测细胞凋亡相关蛋白Bax和Bcl2表达。结果RT-PCR和Western blot检测发现,相比较于癌旁组织,胃癌组织中免疫趋化因子CXCR4表达升高。单细胞凝胶电泳检测表明,敲低和过表达CXCR4不会引起SGC7901细胞DNA损伤。TUNEL染色、MTT细胞增殖检测和Western blot检测发现,SGC7901细胞中敲低CXCR4促进细胞凋亡,过表达CXCR4抑制细胞凋亡。ELISA检测发现,SGC7901细胞中敲低CXCR4促进促炎因子IL-1β和TNF-α表达,抑制抑炎因子IL-10和TGF-β表达,而过表达CXCR4则表现出相反的效果。此外,SGC7901细胞中敲低CXCR4后激活IL-6/STAT3信号通路可降低SGC7901细胞凋亡,而抑制IL-6/STAT3信号通路可明显抑制过表达CXCR4对SGC7901细胞增殖的诱导作用。结论免疫趋化因子CXCR4通过IL-6/STAT3信号通路调控胃癌细胞凋亡和炎症因子分泌过程。

基于IL-6/STAT3信号通路观察维生素D3对子宫肌瘤细胞的影响

目的:基于IL-6/信号转导及转录激活因子3(STAT3)通路观察维生素D3(VitD3)对子宫肌瘤细胞的影响。方法:选取子宫肌瘤患者的子宫肌瘤组织进行细胞原代培养,采用CCK-8法检测不同剂量VitD3对子宫肌瘤细胞活力的影响,将细胞随机分为3组,采用无显著毒性的剂量0、20、50 U/g进行后续实验。采用CCK-8法检测VitD3对人子宫肌瘤细胞增殖能力的影响;采用流式细胞术检测细胞凋亡;流式分选检测细胞线粒体膜电位的变化;RT-PCR法检测细胞凋亡相关基因Bcl-2、Caspase-9、Bax的m RNA表达水平;Western blot法检测P-STAT3、IL-6及STAT3的蛋白表达水平。结果:与VitD30 U/g组比较,VitD320、50 U/g组细胞增殖率显著降低(P<0.05),凋亡率显著增加(P<0.05),线粒体膜电位明显降低(P<0.05),抗凋亡相关基因Bcl-2的m RNA表达水平显著下调(P<0.05),促凋亡相关基因Bax和Caspase-9的m RNA表达显著上调(P<0.05),并下调p-STAT3和IL-6的蛋白表达水平(P<0.05),具有浓度依赖性。结论:VitD3可能通过介导IL-6/STAT3通路,减弱子宫肌瘤细胞增殖能力并且促进细胞凋亡。

木犀草素通过抑制IL-6/STAT3信号通路抑制结肠癌细胞生长

目的探究木犀草素抑制结肠癌细胞生长的相关机制。方法反转录定量聚合酶链反应(reverse transcription quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)和Western blot法分析木犀草素对白细胞介素(interleukin,IL)-6/信号转导和转录激活因子3(STAT3)/磷酸化STAT3。采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)分析IL-6的蛋白分泌情况。细胞增殖实验和Transwell实验分别用于分析木犀草素和IL-6在结肠癌细胞中的生长和迁移。结果脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)刺激促进巨噬细胞M1型极化,增加IL-6的表达和分泌,而木犀草素抑制了LPS的上述作用。M1型极化增加了结肠癌细胞(SW620和SW480)的增殖速度、迁移和侵袭能力以及STAT3的磷酸化。木犀草素通过减少M1型极化来抑制这些效应。为了证实木犀草素的作用是通过IL-6/STAT3信号通路介导的,笔者用重组IL-6蛋白和抗IL-6抗体处理SW620和SW480细胞研究,发现IL-6促进细胞增殖,增强迁移和侵袭,并增加STAT3磷酸化,与抗IL-6抗体效果相反。此外,IL-6促进LPS诱导的M1型极化,而抗IL-6抗体增强了木犀草素诱导M1型极化降低的作用。结论木犀草素通过抑制IL-6/STAT3信号通路抑制结肠癌细胞的生长、迁移和侵袭能力。

蒲公英多糖对溃疡性结肠炎大鼠IL-6/STAT3信号通路的影响

目的:观察蒲公英多糖对溃疡性结肠炎大鼠模型IL-6/STAT3信号通路的调控作用。方法:清洁级SD大鼠40只,雌雄各半,随机分为4组(n=10):空白组、模型组、阳性对照组、蒲公英多糖组。采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)诱导结肠炎大鼠模型,阳性对照组采用美沙拉嗪10 mg/kg·d灌胃,蒲公英多糖组采用蒲公英多糖10mg/kg·d灌胃,治疗4周后处死,观察大鼠结肠粘膜病理改变,检测大鼠血清白介素-6(IL-6)含量、结肠髓过氧化物酶(MPO)、白介素-6受体(s IL-6Rα)、糖蛋白130(gp130)、转录活化因子3(STAT3)、IL-6 mRNA表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清IL-6含量明显升高(P<0.01),MPO阳性密度明显增高(P<0.01),s IL-6Rα、gp130含量明显增高(P<0.01),肠组织STAT3、IL-6 mRNA相对表达量明显增高(P<0.01);与模型组比较蒲公英多糖组、美沙拉嗪组大鼠血清IL-6含量明显降低(P<0.01),MPO阳性密度明显降低(P<0.01),s IL-6Rα、gp130含量明显降低(P<0.01),肠组织STAT3、IL-6 mRNA相对表达量与模型组比较明显降低(P<0.05)。结论:蒲公英多糖能够降低溃疡性结肠炎大鼠IL-6水平,下调IL-6/STAT3通路中s IL-6Rα、gp130蛋白表达量,进而下调大鼠肠组织STAT3、IL-6 mRNA的转录水平,缓解结肠组织的炎症状态,保护和修复粘膜组织,起到治疗溃疡性结肠炎的作用。

Survivin反义寡核苷酸对人卵巢癌细胞株IL-6/STAT3信号通路的影响和意义

目的通过分析人卵巢癌细胞株转染Survivin反义寡核苷酸(ASODN)后IL-6/STAT3信号通路及其下游相关癌基因的表达以及其侵袭能力的改变,探讨Survivin ASODN在抑制人卵巢癌细胞转移中的可能作用、机制和临床价值。方法脂质体(LipofectamineTM2000)介导Survivin ASODN转染人卵巢癌SKOV3细胞株(实验组),同时设空脂质体对照,Transwell小室检测细胞株侵袭能力的改变,荧光定量PCR检测两组细胞株中白细胞介素6(IL-6)、信号转导与活化因子3(STAT3)、Survivin、血管内皮生长因子(VEGF)基因的表达,Western blot检测IL-6、STAT3、磷酸化的信号转导与活化因子3(p-STAT3)、Survivin、VEGF-A蛋白的表达。结果实验组细胞株中IL-6、STAT3、Survivin、VEGF基因表达均较对照组明显下调(P<0.05);实验组细胞株中IL-6、STAT 3、p-STAT 3、Survivin、VEGF-A蛋白表达均较对照组明显下调(P<0.05)。实验组细胞株侵袭能力较对照组明显下降(P<0.01)。结论 ASODN靶向抑制Survivin可有效降低人卵巢癌细胞侵袭转移能力,抑制IL-6/STAT3信号通路及其下游相关致癌基因的表达活性。Survivin ASODN可能在防治卵巢癌复发和转移治疗中有临床价值。

姜黄素通过IL-6/STAT3信号通路调控Th17/Treg平衡治疗溃疡性结肠炎

目的:观察姜黄素对溃疡性结肠炎(UC)模型小鼠的疗效及对IL-6/STAT3信号通路中相关分子表达和结肠组织中Treg、Th17细胞水平的影响,探究姜黄素是否通过IL-6/STAT3信号通路调控Th17/Treg平衡以有效治疗UC。方法:采用葡聚糖硫酸钠(DSS)制备UC小鼠模型,将50只健康雌性BALB/c小鼠随机分为5组:正常对照组,UC模型组及姜黄素低、中、高剂量组。HE染色观察小鼠结肠黏膜组织损伤程度并评分,Western blot检测结肠组织中IL-6、STAT3及p-STAT3的蛋白水平,流式细胞术分析结肠组织中Treg和Th17细胞的水平,Western blot检测结肠组织中Treg转录因子FOXP3和Th17转录因子RORγt的表达情况。结果:UC小鼠结肠部位溃疡形成,镜下可见炎症和充血等病理改变,姜黄素中剂量组的黏膜损伤基本恢复正常,只有少量炎性细胞。与正常组相比,UC小鼠结肠组织IL-6、STAT3和p-STAT3的蛋白水平均显著增高;与模型组相比,姜黄素中剂量组IL-6、STAT3和p-STAT3的蛋白水平均明显降低,接近正常组,并且中剂量姜黄素能显著降低Th17细胞的水平和转录因子RORγt的表达,而显著升高Treg细胞的水平和转录因子FOXP3的表达。姜黄素低剂量组和高剂量组对上述指标均无明显影响。结论:姜黄素可以有效治疗DSS诱导的小鼠UC,其作用机制可能是通过IL-6/STAT3信号通路来调控Th17/Treg平衡。

IL-6/STAT3信号通路在溃疡性结肠炎发病中的机制及香连丸对其的干预作用

目的通过STAT3抑制剂及香连丸的干预,观察溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠结肠组织IL-6、STAT3蛋白变化,探讨UC发病中IL-6/STAT3信号通路的变化机制。方法将100只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、模型组、中药组(香连丸)、抑制剂组、中药+抑制剂组。采用经典TNBS灌肠法复制UC大鼠模型,造模成功后予抑制剂AG-490腹腔注射及香连丸灌胃干预。观察大鼠结肠黏膜组织损伤程度并评分,透射电镜观察各组结肠黏膜情况,Western blotting检测IL-6、STAT3蛋白变化。结果 UC模型大鼠结肠部位溃疡形成,肉眼及镜下观察可见炎症、充血、水肿等病理改变。与正常组比较,UC模型大鼠结肠组织IL-6、STAT3蛋白表达均显著增高(P<0.001);与模型组比较,中药组、抑制剂组及中药+抑制剂组结肠组织中IL-6、STAT3蛋白表达水平相对降低(P<0.001)。结论 IL-6/STAT3通路相关因子表达异常是溃疡性结肠炎发生的重要分子生物学基础,香连丸可通过调节IL-6/STAT3通路抑制UC肠黏膜STAT3的活化,促进炎症细胞凋亡,从而起到临床治疗作用。

海南五指山裸花紫珠通过IL-6/STAT3信号通路对结肠癌体外耐药的逆转作用及其机制研究

目的:探讨海南五指山裸花紫珠对结肠癌体外耐药的逆转作用及其机制。方法:以HCT-8细胞和HCT-8/5-Fu耐药株细胞作为考查对象,分别分为空白对照组、海南五指山裸花紫珠组、5-Fu组和联合组。采用CCK8实验检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;荧光定量PCR法检测细胞耐药基因;Western blot检测IL-6/STAT3信号通路相关蛋白表达。结果:海南五指山裸花紫珠和5-Fu可显著抑制HCT-8细胞和HCT-8/5-Fu细胞增殖,其作用呈浓度依赖性。海南五指山裸花紫珠25 mg/mL+5-Fu对HCT-8/5-Fu细胞耐药逆转倍数为1.88倍,海南五指山裸花紫珠50 mg/mL+5-Fu对其耐药逆转倍数为3.92倍。各给药组HCT-8细胞和HCT-8/5-Fu细胞凋亡率较空白对照组均显著升高(P<0.05)。与空白对照组比较,各给药组HCT-8细胞Bcl-2、HSP-27 mRNA表达均显著降低(P<0.05),海南五指山裸花紫珠组、联合组HCT-8/5-Fu细胞Bcl-2、HSP-27 mRNA表达均显著降低(P<0.05)。除5-Fu组HCT-8/5-Fu细胞外,各给药组IL-6、STAT3蛋白表达较空白对照组均显著升高(P<0.05)。结论:海南五指山裸花紫珠可通过激活IL-6/STAT3信号通路实现对结肠癌细胞体外耐药的逆转作用。

基于IL-6/STAT3信号通路探讨粪菌移植干预湿热蕴结型肠癌小鼠的作用机制

目的:研究IL-6/STATE3通路在粪菌移植(FMT)干预湿热蕴结型肠癌小鼠中的作用。方法:20只小鼠建立湿热蕴结型肠癌小鼠模型,并分为模型组和FMT组,另选10只为对照组。FMT组自造模后每日给予15 g/kg粪菌剂量灌肠处理,灌肠体积0.2 mL。对照组和模型组给予等体积生理盐水灌肠处理。1周后取直肠组织检测小鼠肿瘤体积、肿瘤质量;检测小鼠直肠组织中Ki-67的表达以及IL-6/STAT3信号通路活化情况。结果:相比于对照组,模型组Ki-67表达明显提升,IL-6/STAT3通路的活化程度较大(P<0.05);相比于模型组,FMT组肿瘤体积以及肿瘤质量显著减少,Ki-67表达明显降低,IL-6/STAT3通路的活化程度降低(P<0.05)。结论:FMT通过抑制IL-6/STATE3通路活化,抑制湿热蕴结型肠癌小鼠肿瘤细胞的增殖来发挥作用。

六君子汤干预IL-6/STAT3信号影响肿瘤环境下C2C12细胞分化机制的研究

目的基于小鼠肺癌细胞/小鼠成肌细胞(Lewis/C2C12)体外共培养模型研究六君子汤防治肿瘤恶病质的分子机制。方法采用Lewis/C2C12细胞共培养方法模拟肿瘤恶病质的环境,并将细胞分为模型组、六君子汤组、信号传导及转录激活蛋白3(Signal transducer and activator of transcription3,STAT3)抑制剂Stattic组、联合用药组,并以正常培养的成肌细胞(C2C12)作为空白对照。各组药物分别作用细胞48h后,采用MTT法检测各组药物对肿瘤环境下C2C12细胞生长的影响;免疫荧光法检测肿瘤环境下C2C12细胞中肌球蛋白重链(MyHC)的表达情况;酶联免疫吸附测定(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA),检测共培养条件下C2C12培养基上清中白介素-6(interleukin-6,IL-6)的含量;蛋白质印迹法(Western Blot,WB)检测肿瘤环境下C2C12细胞中IL-6/STAT3信号通路相关蛋白表达情况的影响。结果MTT结果显示六君子汤和Stattic最佳浓度分别为1000μg/m和3μM;倒置显微镜下观察到当Lewis/C2C12共培养比例为1:1时,肌管出现萎缩、变细,MyHC蛋白表达最强;Elisa检测结果显示,与模型组比较三个药物组中IL6含量均降低;Western blot检测显示,与空白对照组比较,模型组STAT3、JAK2、MAFbx、MuRF1蛋白表达显著升高,三组药物干预后出现表达降低的改变。结论六君子汤可缓解肿瘤环境下肌肉蛋白的降解,其机制与抑制泛素蛋白酶体系统(Ubiquitin-proteasome system,UPS)活性有关,六君子汤可通过抑制IL-6/STAT3信号的活性从而关闭UPS途径,另外还可能通过调控其他信号而关闭UPS途径,从而缓解肿瘤恶病质肌肉降解。

齐墩果酸通过调控IL-6/STAT3信号通路影响结肠癌细胞的增殖和凋亡

目的探讨齐墩果酸(OA)对人结肠癌细胞(HT-29)增殖与凋亡的影响及其分子机制。方法体外培养HT-29细胞,用40、80、120μmol·L^(-1) OA进行干预后,用白介素-6(IL-6)刺激,MTT法和集落形成实验检测细胞增殖情况,倒置显微镜观察细胞密度变化,流式细胞术检测细胞周期,DAPI染色和Annexin V/PI流式细胞仪检测细胞凋亡,Caspase-3活力测定试剂盒测定Caspase-3活力,反转录-聚合酶链反应和Western blot实验检测IL-6/STAT3信号通路活化及其通路相关基因和蛋白的表达。结果OA可显著抑制HT-29的增殖能力(P<0.01),并诱导其凋亡(P<0.01),显著抑制IL-6/STAT3信号通路的活化。结论OA通过抑制IL-6/STAT3信号通路的活化,抑制HT-29增殖和促进其凋亡。

IL-6/STAT3信号通路与肝癌研究进展

IL-6是一种多效细胞因子,主要通过IL-6/STAT3信号通路发挥生物学效应。IL-6在肿瘤微环境中含量丰富,异常激活的IL-6/STAT3信号通路可通过影响肿瘤细胞增殖、迁移、侵袭、血管生成和凋亡等过程参与肝细胞癌(HCC)发生发展。靶向药物可通过阻断该信号通路显著抑制肝癌细胞恶性生物学行为,miRNAs可多靶点作用于IL-6/STAT3信号通路,抑制肝癌发生发展。深入了解IL-6/STAT3信号通路与HCC的关系有助于阐明其发病机制,并为HCC治疗提供新方向。

IL-6/STAT3信号通路在结直肠癌发展和治疗中的进展

结直肠癌(colorectal cancer,CRC)是我国常见的恶性肿瘤,发病率逐年增长,探究CRC的发展机制及治疗方案尤为重要。IL-6/STAT3信号通路是CRC发展的关键途径之一,可通过参与肠癌细胞的抗凋亡、增殖及肿瘤血管生成等多种恶性表型促进肿瘤发展。此外,临床研究表明,针对IL-6/STAT3信号通路的靶向药物对CRC的治疗有益,有望成为治疗CRC的有效药物。本文就该通路在CRC发展及治疗中的最新进展作一综述。

IL-6/STAT3信号通路与小鼠联合原位肝劈开和门静脉分支结扎术后肝脏再生的关系

目的:建立联合原位肝劈开和门静脉分支结扎(associating liver partition and portal vein ligation for staged heptectomy,ALPPS)小鼠模型,研究IL-6/STAT3信号通路与ALPPS促进肝脏再生的关系。方法:将45只BALB/C小鼠随机分为3组,分别为ALPPS组、门静脉分支结扎(portal vein ligation,PVL)组和假手术(SHAM)组,每组15只。PVL组即结扎支配左外叶、中叶右侧和右叶的门静脉分支,保留支配中叶左侧和尾状叶的门静脉分支血流。ALPPS组即在PVL组的基础上,沿着中叶缺血线将中叶离断。SHAM组即离断肝韧带,游离肝脏各叶。通过测定血浆ALT值,评估ALLPS和PVL术后肝功能情况。用肝脏再生指数评估肝脏再生情况。免疫组化检测Ki-67阳性蛋白表达来评估肝细胞增殖情况。免疫印迹技术被用来检测肝组织IL-6/STAT3信号通路变化情况。结果:术后48 h的ALPPS组ALT值高于PVL组,且两者有统计学差异(P=0.000)。而ALPPS和PVL术后96 h的ALT值较48 h下降,且两者在术后96 h的ALT值无明显统计学差异(P=0.094)。术后48 h和96 h的ALPPS组的肝脏再生指数(P48 h=0.000,P96 h=0.000)和Ki-67阳性细胞与肝细胞总数比值(P48 h=0.001,P96 h=0.000)高于PVL组,且两者有统计学差异。术后48 h的ALPPS组IL-6蛋白的表达和STAT3蛋白的磷酸化程度高于SHAM组(PIL-6=0.000, Pp STAT3=0.000)和PVL组(PIL-6=0.011,Pp STAT3=0.003),且有统计学差异。结论:成功建立了小鼠ALPPS模型,ALPPS比PVL更能促进肝脏再生和IL-6/STAT3信号通路与ALPPS介导肝脏再生的过程存在密切的关系。