IL-6反式信号传导通路抑制剂sgp130Fc抑制脓毒症小鼠炎性反应及调节免疫细胞

目的探讨IL-6反式信号传导通路对脓毒症模型小鼠免疫炎性反应的调节作用。方法将80只小鼠随机分为假手术组(sham,n=15)、脓毒症组(CLP,n=30)及脓毒症^(+)抑制剂sgp130Fc组(CLP^(+)sgp130Fc,n=20)、sgp130Fc组(sgp130Fc,n=15)。于造模1 h后腹腔注射sgp130Fc 0.5 mg/kg。10 d内每天监测各组小鼠存活率以及体质量。造模后24 h,用ELISA检测血浆IL-6、IL-10、MCP-1及TNFα的浓度;收集外周血液并制备单细胞悬液,用流式细胞测量术进行白细胞分选。结果与假手术组比较,脓毒症组小鼠生存率和体质量显著降低(P<0.05),术后24 h血浆炎性因子IL-6、IL-10、MCP-1及TNFα水平上升(P<0.05);血液中CD3^(+)CD4^(+)T淋巴细胞比例明显降低,CD3^(+)CD8^(+)T淋巴细胞比例明显升高,CD45^(+)CD19^(+)B淋巴细胞比例明显降低(P<0.05)。与脓毒症组比较,脓毒症^(+)抑制剂sgp130Fc组小鼠生存率显著提高;术后24 h血浆炎性因子IL-6、IL-10、MCP-1及TNFα水平降低,CD3^(+)CD4^(+)T淋巴细胞比例显著升高,CD3^(+)CD8^(+)T淋巴细胞比例显著降低,CD45^(+)CD19^(+)B淋巴细胞比例明显升高(P<0.05)。结论抑制IL-6反式信号传导通路能降低脓毒症小鼠死亡率,可能与其调控免疫细胞失衡和抑制炎性反应有关。

miR-210通过激活IL-6/STAT3炎性信号通路促进复发反流性食管炎患者的恶性发展

目的探究miR-210是否通过上调IL-6/STAT3炎性信号通路活性促进复发反流性食管炎患者的恶性发展和不良预后。方法选取2015年8月至2017年5月郑州市第七人民医院消化内科收治的95例复发反流性食管炎患者(观察组)和同期于我院体检的95名健康志愿者(对照组)为研究对象。分别采用酶联免疫吸附法(ELISA)、反转录-聚合酶链反应法(qRT-PCR)、蛋白质免疫印迹法(Western blotting)和HE染色法观察两组受试者血清及食管组织内miR-210及其下游IL-6/STAT3炎性信号分子表达差异及其组织病理变化差异。Pearson相关性分析探究患者血清miR-210表达与其临床病理分级和预后之间的相关性。结果观察组血清miR-210及炎性因子IL-6、IL-1β和TNF-α的表达较对照组显著上调,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组病变食管组织内miR-210及下游IL-6/STAT3炎性信号通路相关分子的mRNA和蛋白表达较对照组均显著上调,差异有统计学意义(P<0.05)。HE染色结果显示,观察组食管组织炎性病理损伤较对照组明显加重。Pearson相关性分析结果表明,观察组血清miR-210的表达与患者临床病理分级呈正相关(r=0.926,P=0.012),而与患者预后呈负相关(r=-0.935,P=0.010)。结论miR-210可能通过激活下游IL-6/STAT3炎性信号通路,促进复发反流性食管炎患者的恶性发展和不良预后,靶向miR-210有望成为临床该类患者治疗的新路径,同时可考虑将血清miR-210作为上述患者的早期诊断指标。

IL-6在人胃癌细胞株AGS中生物学效应及其信号传导途径

目的探讨白细胞介素6(I-L6)在人胃腺癌细胞株AGS中产生生物学效应的信号传导途径。方法通过MTT法检测IL-6刺激AGS细胞后对其生长增殖的影响;采用电泳迁移变动试验(EMSA)和Westernblot观察IL-6刺激前后AGS细胞中IL6相关转录因子Stat3和参与IL-6信号传导功能的蛋白激酶Jak1的诱导活化状态,并确定该细胞中的IL6信号传导通路;通过免疫细胞化学染色确定磷酸化Stat3在AGS细胞内的定位。结果IL-6可显著促进AGS细胞的增殖;转录因子Stat3和蛋白激酶Jak1都能在AGS细胞中被IL-6诱导激活,且Stat3的活性与IL6的刺激呈一定的剂量和时间依赖性;磷酸化Stat3的染色定位于AGS细胞核。结论JAK/STAT信号传导途径的活化介导了IL-6对AGS细胞增殖的促进功能。

SOCS6通过JAK2/STAT3信号通路对人牙周膜成纤维细胞炎症及凋亡的影响

目的:探究SOCS6通过JAK2/STAT3信号通路对人牙周膜成纤维细胞(hPDLFs)炎症及凋亡的影响。方法:取对数生长期的hPDLFs,分组如下:对照组、0.1 mg/L LPS组、1 mg/L LPS组、5 mg/L LPS组,qRT-PCR观察LPS对hPDLFs中SOCS6 mRNA表达的影响,Western blot观察LPS对hPDLFs中SOCS6蛋白表达的影响,CCK-8法观察LPS对hPDLFs细胞活力的影响,ELISA法观察LPS对hPDLFs细胞炎症因子TNF-α、IL-1β的含量的影响。慢病毒滴度检测、靶细胞感染预实验及细胞转染,并且qRT-PCR检测细胞SOCS6 mRNA表达。取对数生长期的hPDLFs,过表达转染SOCS6后,LPS诱导hPDLFs炎症细胞模型,用JAK2信号激活剂香豆霉素A1(CA1)处理过夜,分组如下:LPS组(5 mg/L LPS)、LPS+oe-NC组、LPS+oe-SOCS6组、LPS+oe-SOCS6+CA1组,CCK-8法检测各组细胞活力,流式细胞术检测各组细胞凋亡,ELISA法检测细胞炎症因子TNF-α、IL-1β的含量,Western blot检测细胞SOCS6、p-JAK2、p-STAT3蛋白表达。结果:SOCS6在hPDLFs细胞表达,随着LPS刺激,SOCS6基因表达下调,并且LPS浓度越高,细胞中SOCS6基因表达下调越明显。而且,hPDLFs细胞过表达SOCS6基因后,p-JAK2、p-STAT3蛋白表达明显降低,细胞炎症因子TNF-α、IL-1β含量减少,凋亡率下降。结论:SOCS6在LPS诱导的牙周炎细胞模型中表达下调,过表达SOCS6后细胞活力显著升高,凋亡率降低,此作用可能与抑制JAK2/STAT3信号通路及炎症因子IL-1β、TNF-α的表达有关。

MAPK^(ERK1/2)信号通路在狼疮肾炎外周血单个核细胞表达白细胞介素-6mRNA中的作用

目的探讨有丝分裂原活化蛋白激酶-细胞外调节激酶1/2(MAPKERK1/2)信号通路在狼疮肾炎(LN)患者外周血单个核细胞(PBMC)中自发高水平表达白细胞介素(IL)-6mRNA中的作用。方法分离培养患者PBMC,利用蛋白免疫印迹法和反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法分别检测MAPKERK1/2磷酸化活化程度和IL-6mRNA表达水平,并与正常人群比较。结果26例LN患者与21名健康对照者比较,LN患者PBMCMAPKERK1/2信号通路呈高度活化状态,体外培养可自发表达高水平IL-6mRNA,两组间差异有统计学意义(P<0.05)。应用特异性阻断剂PD98059阻断LN患者PBMCMAPKERK1/2信号通路活化可显著抑制IL-6mRNA的自发高表达。结论LN患者PBMC中MAPKERK1/2信号通路异常活化,并在PBMC自发高水平表达IL-6mRNA中起作用。

基于IL-6/STAT3通路探讨芍药汤对溃疡性结肠炎Th17/Treg平衡的调节机制

目的:探讨白细胞介素-6(IL-6)/信号传导及转录激活因子3(STAT3)通路在湿热内蕴证溃疡性结肠炎(UC)辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)失衡中的作用及芍药汤的干预机制。方法:将60只SD大鼠随机分为空白组、模型组、美沙拉嗪组(0.42 g·kg^(-1))、芍药汤低、中、高剂量组(11.1、22.2、44.4 g·kg^(-1)),除空白组外,其他各组采用复合病因造模建立湿热内蕴证溃疡性结肠炎模型,各组分别给予生理盐水、美沙拉嗪组、芍药汤低、中、高剂量治疗14 d。末次给药24 h后处死大鼠提取脾脏、结肠组织,采用苏木素-伊红(HE)染色观察结肠组织病理学改变,免疫组化(IHC)法检测结肠组织白细胞介素-17(IL-17)、转化生长因子-β1(TGF-β1)水平;流式细胞术检测脾脏Th17/Treg细胞水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测结肠组织IL-6、STAT3蛋白水平。结果:与空白组比较,模型组结肠出现充血、糜烂等病变,脾Treg细胞百分比显著降低(P<0.01),Th17细胞百分比显著升高(P<0.01),结肠组织IL-6、STAT3蛋白水平显著升高(P<0.01);与模型组比较,各药物组结肠损伤减轻,脾Treg细胞百分比显著升高(P<0.01),Th17细胞百分比显著降低(P<0.01),结肠组织中IL-6、STAT3蛋白水平显著降低(P<0.01)。结论:芍药汤通过抑制IL-6/STAT3信号通路调节Th17/Treg平衡,进而改善湿热内蕴证UC大鼠的病理损伤,影响其免疫功能。

托珠单抗在成人斯蒂尔病中的治疗进展

AOSD在1971年首次由Bywaters描述，以弛张热、皮疹、关节痛和CRP、ESR、白细胞和铁蛋白等升高为特征。研究表明IL-6在AOSD发病机制中起重要作用，阻断IL-6信号传导通路可达到治疗AOSD的目的。2002年IL-6受体拮抗剂第一次成功用于治疗AOSD，其后陆续有报道显示IL-6受体拮抗剂治疗AOSD的有效性和安全性。