慢性阻塞性肺疾病患者血清lncRNA IL-6-AS1水平及其与肺功能的相关性分析

目的分析慢阻肺患者血清lncRNA IL-6-AS1水平变化及其与肺功能相关性。方法筛选2020年1月到2021年6月在我院接受治疗的慢阻肺患者132例及同期健康老年体检者70例做对照,对比患者血清lncRNA IL-6-AS1水平和肺功能指标并分析其相关性。实时定量PCR(RT-PCR)检测血清lncRNA IL-6-AS1水平,采用肺功能仪检测呼气峰流速(Peak expiratory flow,PEF)占预计值百分比,第1 s用力呼气容积(Forced expiratory volume1,FEV_(1))占预计值的百分比% pred),第1 s用力呼气容积与用力肺活量(Forced volume vital capacity,FVC)比值。结果与对照组相比,慢阻肺患者lncRNA IL-6-AS1相对表达水平为(1.43±0.13),急性加重期组患者lncRNA IL-6-AS1相对表达水平为(1.73±0.17),表达水平显著上调,而PEF% pred,FEV_(1)%pred和FEV_(1)/FVC显著降低。相关性分析结果表明,lncRNA IL-6-AS1与PEF% pred,FEV_(1)% pred和FEV_(1)/FVC呈负相关。结论老年慢阻肺患者血清lncRNA IL-6-AS1水平呈高表达,与患者肺功能下降有关。lncRNA IL-6-AS1可能是慢性阻塞性疾病临床诊疗很有潜力的分子靶点。

lncRNA PRKCQ-AS1调控miR-143-3p/IL-6/STAT3通路影响肝癌细胞增殖、迁移、侵袭及诱导凋亡的实验研究

目的:探讨lncRNA PRKCQ-AS1对肝癌细胞增殖、迁移、侵袭及诱导凋亡的影响及分子机制。方法:Hep3B细胞分为si-NC组、si-PRKCQ-AS1组、pcDNA-NC组、pcDNA-PRKCQ-AS1组、miR-NC组、miR-143-3p组、anti-miR-NC组、anti-miR-143-3p组、si-PRKCQ-AS1+anti-miR-NC组、si-PRKCQ-AS1+anti-miR-143-3p组。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测lncRNA PRKCQ-AS1、miR-143-3p和IL-6 mRNA表达水平;Western blot检测蛋白表达;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞增殖;Transwell检测细胞迁移和侵袭;流式细胞术检测细胞凋亡;双荧光素酶报告实验验证PRKCQ-AS1和miR-143-3p的靶向关系。结果:肝癌细胞系中lncRNA PRKCQ-AS1表达水平升高,miR-143-3p表达水平降低(P<0.05)。lncRNA PRKCQ-AS1低表达或miR-143-3p高表达,肝癌细胞Hep3B中PRKCQ-AS1表达水平降低,C-myc、MMP2、MMP9表达水平降低,Cleaved-caspase-3表达水平升高,细胞增殖活性降低,细胞迁移、侵袭数减少,细胞凋亡率升高(P<0.05)。lncRNA PRKCQ-AS1靶向调控miR-143-3p。lnc-RNA PRKCQ-AS1低表达,IL-6 mRNA和p-STAT3蛋白表达水平降低(P<0.05)。低表达miR-143-3p可以逆转lncRNA PRKCQ-AS1低表达对Hep3B细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡以及IL-6/STAT3通路的影响。结论:lncRNA PRKCQ-AS1低表达可能通过上调miR-143-3p进一步抑制IL-6/STAT3通路从而抑制肝癌细胞增殖、迁移和侵袭,并诱导细胞凋亡。

HNF1A-AS1靶向miR-363-3p抑制IL-6诱导的血管瘤内皮细胞增殖、迁移和侵袭

目的探究HNF1A-AS1对IL-6诱导的血管瘤内皮细胞(hemangioendothelial cells,HemEC)增殖、迁移和侵袭的影响及可能机制。方法用RT-qPCR法检测35例血管瘤患者的瘤组织及瘤旁正常皮肤组织中HNF1A-AS1、miR-363-3p和IL-6的mRNA表达水平,分析瘤组织中HNF1A-AS1和miR-363-3p表达的相关性。体外分离培养HemEC,用双荧光素酶报告基因实验验证HNF1A-AS1与miR-363-3p的调控关系。将IL-6分别作用于转染si-NC、si-HNF1A-AS1、si-HNF1A-AS1与anti-miR-NC、si-HNF1A-AS1与anti-miR-363-3p的HemEC后,用CCK-8法和克隆形成实验检测各组细胞的增殖,用Transwell法检测各组细胞的迁移和侵袭,Western印迹法检测各组细胞中Ki67、MMP-2和MMP-9蛋白的表达水平。结果与正常皮肤组织比较,血管瘤组织中IL-6 mRNA表达水平明显升高,且增生期IL-6 mRNA表达水平低于消退期(P<0.05)。与瘤旁正常皮肤组织相比,血管瘤组织中HNF1A-AS1的表达升高(P<0.05),miR-363-3p的表达降低(P<0.05),且二者的表达呈负相关(r=-0.758,P<0.05)。HNF1A-AS1在HemEC细胞中靶向负调控miR-363-3p的表达。IL-6可促进HemEC中HNF1A-AS1的表达、细胞OD值、克隆形成数、迁移和侵袭数及Ki67、MMP-2和MMP-9的蛋白表达(P<0.05),而降低miR-363-3p表达(P<0.05)。下调si-HNF1A-AS1降低了IL-6诱导的HemEC细胞OD值、克隆形成数、迁移和侵袭数及Ki67、MMP-2和MMP-9的蛋白表达(P<0.05)。下调miR-363-3p降低了下调si-HNF1A-AS1对IL-6诱导的HemEC细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用(P<0.05)。结论HNF1A-AS1在血管瘤组织中表达升高,下调其表达通过靶向上调miR-363-3p抑制IL-6诱导的血管瘤内皮细胞增殖、迁移和侵袭。