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IL38促进牙周膜干细胞的炎症反应
1
作者
徐曦
郎广平
+1 位作者
吴梦鑫
韩盈盈
《遵义医科大学学报》
2023年第8期738-745,共8页
目的利用牙周膜干细胞研究细胞因子IL38是否参与牙周炎的炎症反应过程。方法利用20μg/mL牙龈卟啉单胞菌脂多糖Pg-LPS刺激牙周膜干细胞24 h建立牙周炎炎症体外模型;利用IL38 siRNA、IL38过表达质粒及相应对照进行牙周膜干细胞的转染,进...
目的利用牙周膜干细胞研究细胞因子IL38是否参与牙周炎的炎症反应过程。方法利用20μg/mL牙龈卟啉单胞菌脂多糖Pg-LPS刺激牙周膜干细胞24 h建立牙周炎炎症体外模型;利用IL38 siRNA、IL38过表达质粒及相应对照进行牙周膜干细胞的转染,进而研究IL38对牙周膜干细胞炎症反应的影响;利用qPCR方法检测牙周膜干细胞中炎症细胞因子的释放,利用Western blot检测P50及P65蛋白质表达情况,利用CCK-8实验检测牙周膜干细胞的增殖情况。结果IL36亚家族中只有IL38在Pg-LPS刺激牙周膜干细胞中显著上升;在正常及炎症状态下,IL38沉默降低了细胞因子IL17A、TNFA及IL1B的mRNA表达水平,但IL38过表达逆转了上述结果;Western blot结果表明,IL38过表达促进P50及P65蛋白质表达水平;IL38过表达也增加了牙周膜干细胞的增殖,而IL38沉默抑制了其增殖能力。结论在体外实验中,IL38具有刺激牙周膜干细胞炎症细胞因子表达及增殖的能力。
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关键词
il38
牙周炎
牙周膜干细胞
炎症
增殖
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职称材料
高纯度白介素-3与假单胞菌外毒素融合蛋白的表达、纯化及质谱鉴定
2
作者
廖乐乐
娄世锋
+1 位作者
曾翰庆
白凤霞
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第6期138-141,151,共5页
旨在利用简单的表达纯化工艺,获得纯度较高、有活性的重组免疫毒素IL3-PE38KDEL并对其物理学及免疫学性质进行鉴定。利用PQE30-IL3-PE38KDEL/SG12009工程菌表达重组免疫毒素IL3-PE38KDEL,在提取包涵体后经一步强阳离子柱层析得到纯度较...
旨在利用简单的表达纯化工艺,获得纯度较高、有活性的重组免疫毒素IL3-PE38KDEL并对其物理学及免疫学性质进行鉴定。利用PQE30-IL3-PE38KDEL/SG12009工程菌表达重组免疫毒素IL3-PE38KDEL,在提取包涵体后经一步强阳离子柱层析得到纯度较高的免疫毒素复性纯化产物,用Westenblotting、质谱、氨基测序等先进技术对产物鉴定。结果显示,发酵后目的蛋白表达量占总菌体的17.56%,经强阳离子柱层析纯化复性后的目的蛋白纯度达到90%以上,Western blotting、质谱、氨基测序结果均表明,纯化产物分子量为54.9kD且具有相应的免疫学活性,序列与预期序列完全一致。纯化复性方法对重组免疫毒素IL3-PE38KDEL的生物性质及纯度有较大影响,因此选择一种适当的纯化复性方法至关重要。
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关键词
重组免疫毒素
IL3-PE38KDEL
纯化复性
质谱鉴定
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职称材料
可抗脑瘤的化合物
3
《国际医药卫生导报》
2001年第08B期23-23,共1页
成胶质细胞瘤是常见的恶性脑瘤.长期以来,它的治疗包括外科手术、放射治疗,偶尔也用化学治疗.但上述治疗无一能延长生存期.
关键词
脑肿瘤
药物治疗
化合物
白细胞介素13
IL13-PE38QQR
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职称材料
重组靶向毒素hIL6(T22)-PE38在大肠杆菌中的表达及其细胞毒性
被引量:
1
4
作者
彭超
李岩松
+1 位作者
何晶龙
郭德军
《中国生物制品学杂志》
CAS
CSCD
2011年第1期14-19,29,共7页
目的 在大肠杆菌中表达、纯化重组靶向毒素hIL6(T22)-PE38,并检测其细胞毒性。方法以PHis-hIL6(T22)-PE38质粒为模板,PCR扩增hIL6(T22)-PE38基因,插入表达载体pET-28a(+)的NcoⅠ和XhoⅠ多克隆位点,构建重组表达质粒,分别转化至大肠杆菌...
目的 在大肠杆菌中表达、纯化重组靶向毒素hIL6(T22)-PE38,并检测其细胞毒性。方法以PHis-hIL6(T22)-PE38质粒为模板,PCR扩增hIL6(T22)-PE38基因,插入表达载体pET-28a(+)的NcoⅠ和XhoⅠ多克隆位点,构建重组表达质粒,分别转化至大肠杆菌BL21(DE3)、Rosettablue(DE3)和BL21(DE3)pLysS中,IPTG诱导表达,并对表达条件进行优化。表达产物经亲和层析纯化后,检测其细胞毒性。结果重组表达质粒pET-28a-hIL6(T22)-PE38经双酶切和测序证明构建正确。表达的重组毒素相对分子质量约56 000,在大肠杆菌Rosettablue(DE3)中表达量最高。最适诱导表达条件为:1 mmol/L IPTG 28℃诱导4 h。重组毒素能选择性地杀伤人骨髓瘤细胞U266和鼠骨髓瘤细胞SP2/0,体外对U266和SP2/0细胞的IC50分别为0.5~1.0和1.0~1.5μg/ml。结论重组靶向毒素hIL6(T22)-PE38在大肠杆菌中成功获得可溶性表达,纯化的蛋白可明显选择性杀伤U266和SP2/0细胞。
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关键词
免疫毒素类
IL6(T22)-PE38
原核细胞
基因表达
细胞毒性
原文传递
题名
IL38促进牙周膜干细胞的炎症反应
1
作者
徐曦
郎广平
吴梦鑫
韩盈盈
机构
遵义医科大学口腔医学院附属口腔医院
遵义医科大学
出处
《遵义医科大学学报》
2023年第8期738-745,共8页
基金
国家自然科学基金资助项目(NO:82160181)
贵州省卫生健康委科学技术基金资助项目(NO:2023-201)
遵义市科技联合基金[NO:遵市科合HZ字(2022)377、(2021)284]。
文摘
目的利用牙周膜干细胞研究细胞因子IL38是否参与牙周炎的炎症反应过程。方法利用20μg/mL牙龈卟啉单胞菌脂多糖Pg-LPS刺激牙周膜干细胞24 h建立牙周炎炎症体外模型;利用IL38 siRNA、IL38过表达质粒及相应对照进行牙周膜干细胞的转染,进而研究IL38对牙周膜干细胞炎症反应的影响;利用qPCR方法检测牙周膜干细胞中炎症细胞因子的释放,利用Western blot检测P50及P65蛋白质表达情况,利用CCK-8实验检测牙周膜干细胞的增殖情况。结果IL36亚家族中只有IL38在Pg-LPS刺激牙周膜干细胞中显著上升;在正常及炎症状态下,IL38沉默降低了细胞因子IL17A、TNFA及IL1B的mRNA表达水平,但IL38过表达逆转了上述结果;Western blot结果表明,IL38过表达促进P50及P65蛋白质表达水平;IL38过表达也增加了牙周膜干细胞的增殖,而IL38沉默抑制了其增殖能力。结论在体外实验中,IL38具有刺激牙周膜干细胞炎症细胞因子表达及增殖的能力。
关键词
il38
牙周炎
牙周膜干细胞
炎症
增殖
Keywords
il38
periodontitis
human periodontal ligament stem cells
inflammation
proliferation
分类号
R780.2 [医药卫生—口腔医学]
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职称材料
题名
高纯度白介素-3与假单胞菌外毒素融合蛋白的表达、纯化及质谱鉴定
2
作者
廖乐乐
娄世锋
曾翰庆
白凤霞
机构
重庆医科大学附属第二医院血液内科
重庆医科大学检验系重点实验室
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第6期138-141,151,共5页
文摘
旨在利用简单的表达纯化工艺,获得纯度较高、有活性的重组免疫毒素IL3-PE38KDEL并对其物理学及免疫学性质进行鉴定。利用PQE30-IL3-PE38KDEL/SG12009工程菌表达重组免疫毒素IL3-PE38KDEL,在提取包涵体后经一步强阳离子柱层析得到纯度较高的免疫毒素复性纯化产物,用Westenblotting、质谱、氨基测序等先进技术对产物鉴定。结果显示,发酵后目的蛋白表达量占总菌体的17.56%,经强阳离子柱层析纯化复性后的目的蛋白纯度达到90%以上,Western blotting、质谱、氨基测序结果均表明,纯化产物分子量为54.9kD且具有相应的免疫学活性,序列与预期序列完全一致。纯化复性方法对重组免疫毒素IL3-PE38KDEL的生物性质及纯度有较大影响,因此选择一种适当的纯化复性方法至关重要。
关键词
重组免疫毒素
IL3-PE38KDEL
纯化复性
质谱鉴定
Keywords
Recombinant immunotoxin IL3-PE38KDEL Renaturation and purification Mass spectrometry
分类号
Q51 [生物学—生物化学]
下载PDF
职称材料
题名
可抗脑瘤的化合物
3
出处
《国际医药卫生导报》
2001年第08B期23-23,共1页
文摘
成胶质细胞瘤是常见的恶性脑瘤.长期以来,它的治疗包括外科手术、放射治疗,偶尔也用化学治疗.但上述治疗无一能延长生存期.
关键词
脑肿瘤
药物治疗
化合物
白细胞介素13
IL13-PE38QQR
分类号
R739.41 [医药卫生—肿瘤]
R730.53 [医药卫生—肿瘤]
下载PDF
职称材料
题名
重组靶向毒素hIL6(T22)-PE38在大肠杆菌中的表达及其细胞毒性
被引量:
1
4
作者
彭超
李岩松
何晶龙
郭德军
机构
黑龙江八一农垦大学食品学院
吉林大学人兽共患病研究所
出处
《中国生物制品学杂志》
CAS
CSCD
2011年第1期14-19,29,共7页
文摘
目的 在大肠杆菌中表达、纯化重组靶向毒素hIL6(T22)-PE38,并检测其细胞毒性。方法以PHis-hIL6(T22)-PE38质粒为模板,PCR扩增hIL6(T22)-PE38基因,插入表达载体pET-28a(+)的NcoⅠ和XhoⅠ多克隆位点,构建重组表达质粒,分别转化至大肠杆菌BL21(DE3)、Rosettablue(DE3)和BL21(DE3)pLysS中,IPTG诱导表达,并对表达条件进行优化。表达产物经亲和层析纯化后,检测其细胞毒性。结果重组表达质粒pET-28a-hIL6(T22)-PE38经双酶切和测序证明构建正确。表达的重组毒素相对分子质量约56 000,在大肠杆菌Rosettablue(DE3)中表达量最高。最适诱导表达条件为:1 mmol/L IPTG 28℃诱导4 h。重组毒素能选择性地杀伤人骨髓瘤细胞U266和鼠骨髓瘤细胞SP2/0,体外对U266和SP2/0细胞的IC50分别为0.5~1.0和1.0~1.5μg/ml。结论重组靶向毒素hIL6(T22)-PE38在大肠杆菌中成功获得可溶性表达,纯化的蛋白可明显选择性杀伤U266和SP2/0细胞。
关键词
免疫毒素类
IL6(T22)-PE38
原核细胞
基因表达
细胞毒性
Keywords
Immunotoxins
IL6(T22)-PE38
Prokaryotic cells
Gene expression
Cytotoxicity
分类号
Q511 [生物学—生物化学]
Q78 [生物学—分子生物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
IL38促进牙周膜干细胞的炎症反应
徐曦
郎广平
吴梦鑫
韩盈盈
《遵义医科大学学报》
2023
0
下载PDF
职称材料
2
高纯度白介素-3与假单胞菌外毒素融合蛋白的表达、纯化及质谱鉴定
廖乐乐
娄世锋
曾翰庆
白凤霞
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2010
0
下载PDF
职称材料
3
可抗脑瘤的化合物
《国际医药卫生导报》
2001
0
下载PDF
职称材料
4
重组靶向毒素hIL6(T22)-PE38在大肠杆菌中的表达及其细胞毒性
彭超
李岩松
何晶龙
郭德军
《中国生物制品学杂志》
CAS
CSCD
2011
1
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