中国荷斯坦牛IL8基因遗传多态性与泌乳性状以及体细胞评分的关联

以上海某奶牛场30个公牛家系的610头中国荷斯坦牛为试验材料,采用聚合酶链式反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术对Interleukin-8(IL8)基因的遗传多态性进行了分析,采用混合动物模型分析了IL8基因突变位点与测定日产奶量、测定日乳脂率、测定日乳蛋白率、305d校正产奶量、305d乳脂量、305d乳蛋白量及测定日体细胞评分7个性状的相关性,寻找可用于生产实际的分子标记。共检测到KK、KA和AA3种基因型,频率分别为0.187、0.451和0.362,等位基因K和A的频率分别为0.412和0.588。该位点突变对测定日产奶量、305d乳蛋白量、305d校正产奶量和305d乳脂量以及体细胞评分影响达到极显著水平(P<0.01),对测定日乳蛋白率的影响达到显著水平(P<0.05),对测定日乳脂率影响不显著(P>0.05)。多重比较表明:KK基因型对测定日产奶量、305d校正产奶量、305d乳蛋白量和305d乳脂量极显著高于AA和KA基因型(P<0.01)。KK基因型的体细胞评分(SCS)最小二乘均值极显著低于KA、AA基因型(P<0.01)。对于测定日的乳蛋白率AA基因型显著低于KA、KK型(P<0.05)。IL8基因遗传突变对中国荷斯坦牛泌乳性状和乳房炎抗性有较大的遗传效应,可用于中国荷斯坦牛的分子标记辅助选择。

鲤鱼IL8的克隆及序列分析

利用DD-RTPCR(正常鲤鱼外周血白细胞和经有丝分裂源刺激后白细胞的总RNA)获得的差异显示片段B10克隆(编码IL8的一段序列),对该基因进行DIG标记,对有丝分裂原刺激的鲤鱼外周血白细胞cDNA文库进行核酸杂交筛选,从0.8×104个重组噬菌体中,经过2轮筛选最终获得阳性克隆,挑选了3个分别命名为IL8-1,IL8-2,IL8-3。测序后经NCBI Blast分析表明,阳性克隆具有完整阅读框架,均为编码鲤鱼IL8的全长cDNA,编码的多肽由98个氨基酸残基组成,其相对分子质量理论推导值为10 848.9 Da,等电点为8.68。且与2003年12月Dev Comp Immunol.杂志报道的荷兰鲤鱼氨基酸的同源性达84%。

健胃愈疡颗粒对消化性溃疡患者胃黏膜IL8和TGFβ1表达的影响

目的:观察健胃愈疡颗粒(柴胡、党参、白芍、延胡索、白及、甘草等)对消化性溃疡患者胃黏膜IL8和TGFβ1表达的影响,探讨健胃愈疡颗粒的疗效机制。方法:56例胃溃疡(肝郁脾虚证)患者,随机分为治疗组和西药对照组,另设正常对照组;治疗组予健胃愈疡颗粒;对照组予法莫替丁片加硫糖铝片,4周为1个疗程,HP阳性者加用阿莫西林胶囊和甲硝唑片;治疗前后胃镜下取溃疡边缘黏膜活检。免疫组化及RT-PCR检测TGFβ、IL8表达水平;结果:(1)IL8在正常胃黏膜中呈阴性或偶有阳性表达,治疗前两组表达高于正常组(P<0.01),治疗后均减少至接近正常水平,两组无显著性差异(P>0.05)。(2)TGFβ1在正常胃黏膜中有少量表达,两组治疗前较正常胃黏膜增加,两组间差异无显著性(P>0.05);治疗后两组表达均显著增加,且治疗组高于对照组(P<0.05);结论:健胃愈疡颗粒可能通过抑制炎性细胞因子IL8的表达,增强促溃疡愈合因子TGFβ1的表达,达到促进溃疡愈合的目的。

加味芎蝎散对咳嗽变异性哮喘大鼠咳嗽反应及气道平滑肌中IL8-CXCR1通路蛋白表达的影响

目的探讨加味芎蝎散对咳嗽变异性哮喘(CVA)大鼠咳嗽反应及气道平滑肌中IL8-CXCR1的干预作用。方法40只大鼠随机分为4组:正常组,CVA组,顺尔宁组,中药组。分别于2、4、6 d记录吸入辣椒素溶液后大鼠的咳嗽次数;采用酶联免疫法对气道灌洗液(BALF)Th1/Th2相关炎症分子表达进行观测;免疫组化法对气道壁血管指标CD31、气道平滑肌IL8、CXCR1、MMP9的表达影响进行研究。结果中药、顺尔宁组在不同程度上都能够减少CVA大鼠咳嗽次数,且中药组在起效时间及抑制程度上明显优于顺尔宁组;肺泡灌洗液中中药组及顺尔宁组TH1细胞分泌的炎症介质IFNγ升高,而TH2细胞分泌IL4、IL8降低;CVA组气道平滑肌组织MMP9和肺间质CD31及IL8、CXCR1表达增高,中药组及顺尔宁组表达较CVA组减低。结论加味芎蝎散在改善CVA大鼠咳嗽方面疗效确切;其作用机制可能与基于IL8-CXCR1靶点,从而调节TH1/TH2免疫失衡,抑制细胞迁移和血管新生有关。

澳系进口荷斯坦牛IL8基因遗传多态性与体细胞评分及泌乳性状的关联分析

以海丰奶牛场来自72个公牛家系588头胎澳系进口荷斯坦牛为试验材料,分析白介素8(Interleukin-8,IL8)基因2个突变位点对日产奶量、乳脂率、乳蛋白率、305d产奶量、305d乳脂量、305d乳蛋白量及体细胞评分(SCS)7个性状的影响,寻找可用于生产应用的分子标记。用PCR-SSCP技术对IL8基因的遗传多态性进行分析,采用最小二乘模型分析多态位点与各泌乳性状及SCS的相关性。结果表明,IL8基因5′侧翼区序列-180位点发生了G→A的突变,检测到GG、GA和AA 3种基因型,频率分别为0.226、0.476和0.298,等位基因G和A的频率分别为0.464和0.536;该位点突变对305d脂肪产量有显著影响,而对其它泌乳性状及SCS均无显著影响。GG基因型305d脂肪产量显著高于GA基因型(P<0.01),而AA基因型305d脂肪产量与GG、GA基因型之间无显著差异(P>0.05)。IL8基因2 789发生A→G的突变,共检测到GG、GA和AA 3种基因型,频率分别为0.297、0.506和0.197,等位基因G和A的频率分别为0.550和0.450;该突变位点对测定日乳脂率、乳蛋白率、305d校正奶量和SCS有显著影响(P<0.05)。AA基因型乳脂率极显著高于GA、GG基因型(P<0.01);AA基因型乳蛋白率极显著高于GA基因型(P<0.01);GG基因型的体细胞评分(SCS)极显著高于GA、AA基因型(P<0.01);对于305d校正奶量而言,GA基因型显著高于AA基因型(P<0.05)。IL8基因遗传突变对澳系进口荷斯坦牛泌乳性状和乳房炎抗性有较大的遗传效应,可用于其分子标记辅助选择。

贵州地方鸡IL8RB基因多态性及其对肉品质的影响

为了挖掘IL8RB基因的单核苷酸多态性(SNP)位点,以长顺绿壳蛋鸡、黔画乌鸡和威宁鸡为材料,采用PCR产物直接测序法对IL8RB基因进行SNP筛查,对突变前后序列进行生物信息学分析.结果表明:在3个鸡群体IL8RB基因中共检测到2个错义突变位点,g.22589443 C>T突变共产生3种基因型,为中度多态,引起亮氨酸变成丝氨酸;g.22589512 C>T突变共产生2种基因型,为低度多态,引起苏氨酸变成甲硫氨酸.卡方(χ^2)检测结果表明:g.22589443 C>T位点在长顺绿壳蛋鸡群体的基因型分布极显著偏离了Hardy-Weinberg平衡(P<0.01),在黔画乌鸡和威宁鸡群体基因型分布显著偏离了Hardy-Weinberg平衡(P<0.05);g.22589512 C>T突变位点在3个鸡群体基因型分布未偏离Hardy-Weinberg平衡(P>0.05).连锁不平衡分析结果显示:3个鸡群体IL8RB基因2个SNP位点间不存在强连锁不平衡;2个SNP位点联合共产生3种单倍型和4种双倍型,单倍型H1和双倍型H1H1出现的频率最高,单倍型H3和双倍型H2H2出现的频率最低.生物信息学分析表明:3种单倍型自由能为:TC>CC>CT,稳定性为:CT>CC>TC;2个SNP位点引起氨基酸变化但未引起蛋白质二级结构和三级结构变化.IL8RB基因变异与黔画乌鸡肉品质关联性分析发现,双倍型H1H1个体的肉色指标显著高于H1H3个体(P<0.05),其他各SNP位点及双倍型在各指标之间的差异未达到显著水平(P>0.05).所检测到的这2个SNP位点或许可作为改善鸡肉品质遗传标记,为今后深入研究提供数据参考和理论支持.

联合检测hs-CRP、BNP及IL8在慢性阻塞性肺疾病并肺心病中的诊断价值

目的:观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重期(AECOPD)并肺心病患者hs-CRP、B型脑钠肽(BNP)和白细胞介素8(IL8)的水平变化,探讨其在诊治AECOPD并肺心病中的诊断价值。方法:采用免疫化学发光微粒子酶法和酶联免疫双抗体夹心法(ELISA)检测70名AECOPD并肺心病患者和5O例健康对照组血清血浆BNP和血清hs-CRP、IL8的水平,分析患者轻、中、重、极重组血浆BNP、血清hs-CRP和IL-8的直线相关性。结果:①AECOPD组hs-CRP、BNP和IL8的水平显著高于对照组(P<0.01);②AECOPD轻、中、重、极重组患者hs-CRP、BNP、IL8水平随AECOPD程度加重而增加,各组间差异均有统计学意义(P<0.05);③AECOPD各组hs-CRP、BNP和IL8呈正相关(P<0.05)。结论:血清hs-CRP、血浆BNP和IL8的水平可作为AECOPD合并肺心患者病情严重程度和疗效判断的早期指标。

中国荷斯坦牛IL8基因SNP-233(G>A)不同基因型的表达差异研究

[目的]本研究旨在研究中国荷斯坦牛IL8基因-233(G>A)位点不同基因的表达差异水平,为探讨该位点在抗奶牛乳房炎作用提供理论依据。[方法]本试验运用SYBR Green实时荧光定量PCR技术进行定量测定。[结果]GG基因型个体mRNA的表达量显示高于GA和AA基因型个体的表达量。[结论]IL8基因-233(G>A)位点对中国荷斯坦牛乳房炎抗性有一定影响,可用于中国荷斯坦牛的抗乳房炎的分子标记辅助选择。

IL8基因3'UTR SNPs与中国荷斯坦牛泌乳性状的关联分析

为明确白细胞介素8基因(IL8)在浙江省内不同牛种群体间的遗传变异情况,应用PCR-SSCP技术检测了中国荷斯坦牛、温岭高峰牛和温州水牛IL8基因3'UTR的多态性。PCR-SSCP和测序结果表明,中国荷斯坦牛和温岭高峰牛在IL8基因3'非翻译区存在3个完全连锁的SNP(g.2831A/G,g.2904 T/C,g.3030 G/A)构成的单倍域,温州水牛在这些位点均表现为突变纯合型。利用一般线性模型分析IL8基因3'UTR的3个SNPs对中国荷斯坦牛305 d校正产奶量、乳脂量、乳蛋白率及体细胞评分的影响,发现这些SNPs可显著影响中国荷斯坦牛305 d校正产奶量(P<0.01)和乳脂率(P<0.05)。

Aa、Bm、Sp对牙周膜细胞产生IL8、TNF_α的影响

目的：观察不同种细菌（放线共生放线菌、产黑色素类杆菌、化脓性链球菌） 刺激人牙周膜细胞合成ＩＬ８ 、ＴＮＦα的能力。方法：体外培养人牙周膜细胞，分别用上述三种细菌刺激细胞，通过ＥＬＩＳＡ 法检测细胞上清液中ＩＬ８ 、ＴＮＦα的水平。结果：人牙周膜细胞在这三种细菌刺激下均能合成少量ＩＬ８ 、ＴＮＦα，三组间无显著差异。结论：牙周膜细胞在细菌刺激下通过合成细胞因子参与免疫反应。

‘黔画乌鸡’IL8RB基因外显子2变异对胸肌常规肌肉品质的影响

【目的】探研肉鸡IL8RB基因变异对肉质性状的遗传效应.【方法】采用PCR产物直接测序和结合序列比对软件筛查鉴定IL8RB基因外显子2遗传变异,分析其与‘黔画乌鸡’肉质性状的相关性.【结果】在‘黔画乌鸡’IL8RB基因外显子2中发现4个中度多态的同义突变位点g.22589317 C>T、g.22589423 C>T、g.22589485 C>T和g.22589476 T>C,4个SNP位点均产生3种基因型,基因型分布均未偏离Hardy-Weinberg平衡;g.22589317 C>T位点对嫩度的影响达到显著水平(P<0.05),基因型TT个体的嫩度值显著高于基因型CC个体(P<0.05);g.22589423 C>T和g.22589476 T>C位点均对粗脂肪含量的影响达到显著水平(P<0.05),g.22589423 C>T位点的基因型TT个体显著高于基因型CT个体(P<0.05),g.22589476 T>C位点的基因型CC个体显著高于基因型CT和TT个体(P<0.05).【结论】综合各基因型各指标之间的差异,揭示g.22589317C>T位点的CC基因型、g.22589423 C>T位点的TT基因型和g.22589476 T>C位点的CC基因型是改善肉质的有利基因型,可能作为提高肉鸡肌肉品质的分子遗传标记.

运用多座位外显方差法分析中国荷斯坦牛CXCR1和IL8基因与乳房炎易感性的关系

旨在运用多座位外显方差分析法(MPVA)分析中国荷斯坦牛CXCR1和IL8两个基因多个突变位点多态性与乳房炎易感性的交互作用。本研究以南方某大型奶牛场634头(其中102头患乳房炎)中国荷斯坦牛为试验材料,采用PCR-SSCP和直接测序法分析CXCR1-5′端和编码区及IL8 2789/2862内含子3、外显子4和5,2个基因共7个SNPs位点的遗传多态性,并用MPVA法分析CXCR1和IL8基因各位点突变及其基因型组合对奶牛乳房炎易感性的影响。结果,MPVA分析发现CXCR1-1830、CXCR1-1768和IL8 2789/2862三位点交互作用对奶牛乳房炎易感性的影响达到显著水平。CXCR1-1830、CXCR1-1768和IL8 2789/2862三位点交互模型作为奶牛乳房炎易感性相关的基因联合选择模型最佳,MPVA可用于奶牛乳房炎易感性多基因分析模型。

奶牛乳腺细胞IL8基因在三种菌落刺激下的表达变化研究

[目的]研究IL8基因在不同菌落刺激下在奶牛乳腺细胞中的表达变化。[方法]本试验运用SYBR Green实时荧光定量PCR技术进行定量测定。[结果]IL8基因的mRNA水平在E.coli,Streptoc.刺激下表达差异达显示水平,而在S.aureus刺激下无明显变化。[结论]IL8基因在细胞水平上对E.coli,Streptoc.刺激较敏感,为以后进一步研究IL8基因的表达机理奠定基础。

冠心病患者血清IL8与外周血白细胞总数检测

目的:探讨冠心病病情及冠状动脉病变程度与血清白细胞介素(IL)8水平和外周血白细胞(WBC)总数的关系。方法:将收治的150例老年冠心病患者分为4组:急性心肌梗死(AM I)患者组50例、不稳定性心绞痛患者(UAP)组50例、稳定性心绞痛患者(SAP)组50例和对照组50例。用酶联免疫吸附试验检测各组血清IL8的水平,然后来比较4组的差异。同时对冠心病患者的外周血WBC总数变化及其与血清IL8水平进行直线相关分析。结果:AM I组、UAP组及SAP组的血清IL8水平均高于对照组;AM I组、UAP组IL8水平明显高于SAP组;AM I组和UAP组结果相似;冠心病患者血清IL8与外周血WBC总数变化呈正相关。结论:血清IL8水平与冠状动脉病变程度密切相关。

长顺绿壳蛋鸡IL8RB基因多态性检测

为了提升家禽抗逆性,为生产安全优质禽产品提供参考依据,试验选择长顺绿壳蛋鸡对其IL8RB基因多态性进行检测并采用混合基因池进行PCR扩增,结合直接测序法对IL8RB基因进行单核苷酸多态性(SNP)筛查。结果表明:在长顺绿壳蛋鸡IL8RB基因启动子区g. 22 589 018～g.225 895 571区域检测到5个SNPs位点(g.22 589 318,T<C; g.22 589 424,T<C; g.22 589 468,C>G;g.22 589 477,T<C; g.22 589 486,T<C),基因型CC和等位基因C分别为优势基因型和优势等位基因,其多态信息含量(PIC)只有g.22 589 468一个突变位点呈低度多态,另外4个突变位点呈中度多态,且5个突变位点的等位基因数(Ne)均较为均匀。说明长顺绿壳蛋鸡在自然群体中的遗传多样性较为丰富,应在长顺绿壳蛋鸡的饲养管理、疾病防控、繁殖等方面加强保护,提升其抗逆性。

CMV和HCV肝炎婴儿血清IFN-α,IL-8,TNF-α和NO的水平变化

目的 了解巨细胞病毒肝炎 (CMV IgM抗体阳性 )和丙型肝炎 (HCV IgM抗体阳性 ) 1～ 6月的婴儿患者血清中某些炎性介质的异常变化。方法 应用ELISA法和硝酸还原酶法 ,分别检测了 5 6例CMV抗体和6 7例HCV抗体阳性婴儿肝炎综合征 (婴肝 )患儿及正常对照组 5 8例小儿的血清干扰素α (IFN α) ,白细胞介素 8(IL 8) ,肿瘤坏死因子 α (TNF α)和一氧化氮 (NO)的含量。结果 正常对照组 5 8例血清IFN α ,IL 8,TNF α ,NO含量分别为 2 2 6 .74± 73.82ng/L ,13.2 4± 5 .36ng/L ,2 17.14± 76 .30ng/L ,2 5 .98± 8.70 μmol/L。CMV抗体阳性婴肝组血清IFN α ,IL 8,TNF α和NO的含量分别为 5 82 .2 6± 131.72ng/L ,75 .2 8± 33.5 7ng/L ,42 9.46± 15 6 .32ng/L和5 9.87± 16 .42 μmol/L ,明显高于正常对照组 (P <0 .0 1) ;HCV抗体阳性婴肝组上述四项指标含量分别为5 5 8.32± 114.6 4ng/L ,71.34± 2 7.6 4ng/L ,374.35± 138.4ng/L和 6 2 .2 4± 2 1.38μmol/L ,其含量亦明显高于正常对照组 (P <0 .0 0 1)。CMV与HCV抗体阳性婴肝组比较 ,无明显差异 (P >0 .0 5 )。TNF α和NO在这两组婴肝中分别呈正相关 (r1=0 .6 2 ,r2 =0 .5 7,P<0 .0 1)。结论 CMV和HCV抗体阳性婴肝急性期患儿 ,血清TNF α,IL 8。

预处理滤纸条对回收IgG及IL－8的影响

预处理滤纸条对回收ＩｇＧ及ＩＬ－８的影响北京医科大学口腔医学院牙周科谢昊，曹采方，欧阳翔英，陈智滨龈沟液作为一个牙周炎局部病理过程的信使，已日益受到重视和研究。对龈沟液的收集一般有微吸管法、龈沟冲洗法和滤纸条法；后者的应用较为普及，但龈沟液中的各种成...

脑脊液中乳酸及白细胞介素-8检测在化脓性脑膜炎中的变化及临床意义

目的:通过检测化脓性脑膜炎(PM)患儿脑脊液中乳酸(LA)、白细胞介素-8(IL-8)的浓度变化,探讨其在化脓性脑膜炎的变化及临床意义。方法:采用COBAS INTEGRA 400PLUS全自动生化分析仪及双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)对60例化脓性脑膜炎患者、42例病毒性脑炎(VE)患者、54例对照组儿童急性期及恢复期脑脊液中乳酸(LA)和IL-8变化进行检测。观察LA、IL-8与中性粒细胞的相关性。结果:急性期PM组脑脊液中LA和IL-8分别为(4.71±2.43)mmol/L和(261.02±58.14)ng/L明显高于VE组(2.10±0.44)mmol/L和(94.86±41.27)ng/L,对照组(1.95±0.51)mmol/L和(84.65±19.7)ng/L,三组比较差异有统计学意义(P<0.01);恢复期PM组LA和IL-8分别为(3.23±2.11)mmol/L和(204.24±48.53)ng/L较急性期明显下降,差异有统计学意义(P<0.01)。脑脊液中LA和IL-8水平及中性粒细胞相关性分析显示:PM组LA及IL-8呈正相关(r=0.482,P<0.01),PM组IL-8与中性粒细胞呈正相关(r=0.397,P<0.01);VE组IL-8与中性粒细胞无相关性(r=0.299,P>0.05)。结论:乳酸、IL-8参与化脓性脑膜炎局部炎性应答,提示脑脊液中IL-8及LA的检测可作为化脓性脑膜炎诊断及病情变化判断的一项参考指标。