从肠道有益菌群可激活AhR/ILC3s信号通路探讨解毒化浊法改善2型糖尿病胰岛素抵抗的理论机制

AhR/ILC3s通路与2型糖尿病胰岛素抵抗密切相关,调节肠道菌群可激活AhR/ILC3s通路从而改善胰岛素抵抗。浊毒与2型糖尿病胰岛素抵抗密切相关,解毒化浊法可改善胰岛素抵抗,且其机制与调节肠道菌群,抑制代谢性炎症有关,但是否通过AhR/ILC3s通路起作用尚未可知。笔者通过对胰岛素抵抗、代谢性炎症、AhR/ILC3s信号通路、浊毒理论等相关古今文献进行研究,对解毒化浊法与AhR/ILC3s改善胰岛素抵抗的理论机制相关性进行探讨。研究表明,肠道菌群—代谢性炎症—胰岛素抵抗是2型糖尿病发生发展的重要调节轴。肠道有益菌群可激活AhR/ILC3s信号通路,抑制代谢性炎症,是改善2型糖尿病胰岛素抵抗的关键环节。解毒化浊法可通过调节肠道菌群,激活AhR/ILC3s信号通路,抑制炎症反应,从而改善胰岛素抵抗,这可能是解毒化浊法改善2型糖尿病胰岛素抵抗的重要信号通路,也可能是解毒化浊法改善胰岛素抵抗的重要机制。

高脂饲喂小鼠结肠ILC3s变化对肠屏障应激能力的影响

目的探讨高脂饲喂小鼠结肠三型固有淋巴细胞(ILC3s)的变化对肠黏膜屏障应激能力影响的潜在机制。方法将24只SPF级雄性C57BL/6J小鼠适应性饲养1周后,随机分为空白对照组(N-CON组)、重症急性胰腺炎(SAP)对照组(N-SAP组)、空白高脂组(H-CON组)、SAP高脂组(H-SAP组),每组6只。N-CON、N-SAP给予普通饮食,H-CON、H-SAP给予高脂饮食,持续21周;N-SAP组、H-SAP组采用腹腔注射20%左旋精氨酸(L-Arg)作为应激刺激制备小鼠SAP模型,N-CON组、H-CON组予以腹腔注射等体积等渗盐水。造模48 h后,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、血清淀粉酶(AMS)、脂多糖(LPS)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平;HE染色观察胰腺、肺、结肠组织病理学形态;流式细胞术分析结肠ILC3s占淋巴细胞比例和IL-22+ILC3s占结肠ILC3s比例;免疫荧光法检测结肠荆豆凝集素(UEA-1)、白细胞介素-22受体A1(IL-22RA1)表达情况;Western blot检测岩藻糖基转移酶2(Fut2)、IL-22RA1蛋白的表达水平。结果与N-CON组相比,H-CON组小鼠体重、TG、TC以及血清AMS、LPS、IL-6、TNF-α水平显著升高(P<0.05),结肠ILC3s占淋巴细胞比例显著下降(P<0.05),IL-22+ILC3s占结肠ILC3s比例升高(P>0.05),Fut2、IL-22RA1蛋白表达下降(P>0.05),UEA-1、IL-22RA1平均荧光强度略有下降(P>0.05);给予20%Arg应激刺激后,与N-CON组相比,N-SAP组血清AMS、LPS、IL-6、TNF-α水平显著升高(P<0.05),结肠ILC3s占淋巴细胞比例显著下降(P<0.05),IL-22+ILC3s占结肠ILC3s比例变化显著升高(P<0.05),Fut2、IL-22RA1蛋白表达升高(P>0.05),UEA-1平均荧光强度显著下降(P<0.05),IL-22RA1平均荧光强度升高(P>0.05);与N-SAP组相比,H-SAP组结肠ILC3s占淋巴细胞比例降低(P>0.05),IL-22+ILC3s占结肠ILC3s比例升高(P>0.05),UEA-1平均荧光强度下降(P>0.05),IL-22RA1平均荧光强度显著升高(P<0.05),Fut2、IL-22RA1蛋白表达增加(P>0.05)。结论高脂饲喂小鼠的肠黏膜屏障应激能力削弱,可能与结肠ILC3s调节岩藻糖基化过程有关。

蠲哮汤调节三型固有淋巴样细胞治疗肥胖哮喘小鼠机制

目的探讨蠲哮汤(Juanxiao decotion,JXD)调节三型固有淋巴样细胞(type 3 innate lymphoid cells,ILC3s)治疗肥胖型哮喘的可能作用机制。方法60只BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组(60%高脂饲料^(+)OVA)、JXD组(低、中、高剂量分别为8.5、17、34 g/kg)、地塞米松组(1 mg/kg),每组10只。除正常组,其余组高脂饲料喂养12周后,OVA致敏及雾化激发建立肥胖哮喘模型。首次雾化起,JXD低、中、高剂量组及地塞米松组给予相应药物灌胃,正常组和模型组给予等量生理盐水灌胃,持续7 d。苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察肺部病理改变,全自动生化仪检测血脂四项及肺泡灌洗液(alveolar lavage fluid,BALF)炎症细胞分类计数,酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测BALF和血清免疫球蛋白E(immunoglobulin E,IgE)水平,肺组织中白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-13(interleukin-13,IL-13)、C-C趋化因子受体17(CCL17)水平,流式细胞术分析肺和外周血中IL-17A^(+)ILC3、IL-22^(+)ILC3水平,Western blot检测肺组织中STAT3蛋白磷酸化水平。结果与正常组相比,模型组小鼠气道炎性细胞浸润,气道壁增厚,经地塞米松和JXD中、高剂量干预后小鼠肺部炎症情况得到改善,其中高剂量效果更明显。与正常组相比,模型组小鼠肺组织中IL-1β、IL-17A^(+)ILC3、IL-13、CCL17水平显著升高(P<0.05),IL-22^(+)ILC3比例和P-STAT3蛋白表达水平明显降低(P<0.01,P<0.05);与模型组相比,经JXD中、高剂量干预后肺组织中IL-1β、IL-17A^(+)ILC3、IL-13、CCL17水平显著下降,IL-22^(+)ILC3比例和P-STAT3表达明显增加(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。结论JXD能改善肥胖哮喘小鼠机体炎症环境,减轻肺部炎症和过敏反应,其机制可能与调节ILC3分泌细胞因子功能有关。