肝细胞癌中ILF3蛋白过表达及其临床病理学意义

目的探讨ILF3蛋白表达与肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)临床病理特征及预后的关系。方法利用UALCAN和GEPIA生物信息数据库分析ILF3 mRNA在HCC和正常肝组织中的差异表达,分析其与HCC患者生存期的关系;应用免疫荧光染色检测ILF3蛋白在Huh-7 HCC细胞中的表达定位。采用免疫组化SP法检测ILF3蛋白在80例HCC和80例癌旁非瘤组织中的差异表达;应用χ^(2)检验分析ILF3蛋白表达与HCC临床病理特征的关系。应用Kaplan-Meier生存分析ILF3蛋白表达与HCC患者生存期的关系,采用Cox回归模型分析ILF3蛋白表达在HCC预后评估中的价值。结果数据库分析结果显示,ILF3 mRNA在HCC组织中的表达明显高于正常肝组织,且ILF3 mRNA高表达与HCC患者较短的生存期相关。免疫荧光检测显示,ILF3蛋白主要定位于细胞核。免疫组化检测显示,ILF3蛋白在HCC组织中的细胞核表达率和高表达率分别为81.3%(65/80)和60.0%(48/80),明显高于癌旁非瘤组织(41.3%,25.0%,P<0.01)。ILF3蛋白高表达与HCC肿瘤最大径(χ^(2)=5.291,P=0.024)、病理分级(χ^(2)=6.888,P=0.011)及临床分期(χ^(2)=5.160,P=0.031)明显相关。ILF3蛋白高表达HCC患者的总生存期短于ILF3蛋白低表达患者,且ILF3蛋白表达是HCC患者预后不良的独立风险因素(HR:2.148,95%CI=1.031~4.475,P=0.041)。结论ILF3蛋白表达与HCC发生、发展及预后密切相关,可作为HCC预后评估的潜在标志物。

Lnc ILF3-AS1通过miR-212-3p/MAPK1分子轴调控子宫内膜癌细胞恶性生物学行为的作用机制

目的探讨ILF3-AS1对子宫内膜癌细胞恶性生物学行为的作用机制。方法qRT-PCR检测ILF3-AS1在子宫内膜癌组织和细胞系中的表达水平;Western blot检测MAPK1蛋白表达水平;Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞术、CCK-8以及Transwell分别检测AN3CA细胞的凋亡、增殖、侵袭及迁移情况;双荧光素酶报告基因检验miR-212-3p与ILF3-AS1或MAPK1的靶向关系。结果ILF3-AS1在子宫内膜癌组织和癌细胞中高表达(均P<0.01),且在AN3CA细胞中的表达水平最高(P<0.001)。敲降ILF3-AS1或过表达miR-212-3p均显著抑制AN3CA细胞增殖(P<0.05)、侵袭(P<0.01)和迁移(P<0.001),并促进细胞凋亡(P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验结合qRT-PCR和Western blot检测结果表明,ILF3-AS1与miR-212-3p、miR-212-3p与MAPK1之间存靶向负调控作用。过表达MAKP1显著促进AN3CA细胞增殖(P<0.05)、侵袭和迁移(P<0.05或P<0.01),并抑制细胞凋亡(P<0.01)。进一步实验表明,同时过表达miR-212-3p和MAPK1和敲降ILF3-AS1+过表达MAPK1均显著逆转了过表达MAPK1对AN3CA细胞增殖、侵袭和迁移的抑制(P<0.05)以及对细胞凋亡的促进作用(P<0.01)。结论ILF3-AS1下调MAPK1,促进miR-212-3p的表达,进而促进子宫内膜癌AN3CA细胞增殖、侵袭和迁移,并抑制细胞凋亡。

斑马鱼ILF2基因的电子克隆分析

利用电子克隆方法,成功获得了ILF2基因在斑马鱼中的同源基因,为进一步研究斑马鱼ILF2基因功能奠定了基础.斑马鱼ILF2基因cDNA全长为1560bp,含有一个编码387个氨基酸的完整开放阅读框架.比较斑马鱼ILF2基因和人ILF2基因,显示两者编码氨基酸序列相似性为87%,核苷酸序列有72%相同.

ILF3-AS1干扰通过促进miR-204/IL-6R影响宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)白介素增强因子3反义1(ILF3-AS1)对宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响和可能机制。方法实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测宫颈癌组织、癌旁组织中ILF3-AS1和miR-204的表达水平。将ILF3-AS1小干扰RNA、miR-204模拟物分别转染SiHa细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和集落形成实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞周期分布,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭,蛋白质印记(Western blot)检测白介素6受体(IL-6R)表达。双荧光素酶报告实验验证ILF3-AS1与miR-204、miR-204与IL-6R的调控关系。结果与癌旁组织比较,宫颈癌组织中ILF3-AS1表达显著升高,miR-204表达显著降低(P<0.05)。干扰ILF3-AS1表达后SiHa细胞存活率、克隆形成数、迁移和侵袭细胞数、S期细胞比例、IL-6R蛋白表达显著降低,G0-G1期细胞比例、miR-204表达显著升高(P<0.05)。过表达miR-204后SiHa细胞存活率、克隆形成数、迁移和侵袭细胞数、S期细胞比例、IL-6R蛋白表达显著降低,G0-G1期细胞比例显著升高(P<0.05)。抑制miR-204表达可逆转干扰ILF3-AS1对SiHa细胞增殖、周期分布、迁移和侵袭的影响(P<0.05)。结论干扰ILF3-AS1可能通过上调miR-204/IL-6R途径来抑制宫颈癌细胞SiHa的增殖、迁移和侵袭。

长非编码RNA ILF3-AS1通过调控miR-130a-3p/PTEN轴抑制宫颈癌细胞的增殖

ILF3反义RNA 1(ILF3 antisense RNA 1,ILF3-AS1)是一条定位于染色体19p13.2的lncRNA,它是白介素增强子结合因子3(interleukin enhancer binding factor 3,ILF3)的反义RNA。ILF3-AS1在多种肿瘤发生发展中发挥关键作用,但其在宫颈癌中的作用尚无研究探讨。本文利用TCGA及GTEx数据库进行生物信息学分析提示,ILF3-AS1在宫颈癌组织中低表达(P<0.001)并与良好预后相关(P=0.045)。qRT-PCR结果显示,ILF3-AS1在宫颈癌组织及SiHa、HeLa、CaSki宫颈癌细胞系中表达较对照组均呈下降趋势。过表达ILF3-AS1可明显抑制宫颈癌细胞增殖活力及促进宫颈癌细胞凋亡。Star Base v3.0数据库分析提示,ILF3-AS1可靶向吸附miR-130a-3p;而miR-130a-3p可靶向结合PTEN。qRT-PCR检测显示,miR-130a-3p在宫颈癌中的表达量明显高于正常宫颈组织(P<0.01)。荧光素酶报告基因结果显示,ILF3-AS1可以与miR-130a-3p特异性结合(P<0.01)。HeLa细胞过表达ILF3-AS1后,miR-130a-3p表达量明显下调(P<0.01);在过表达ILF3-AS1细胞中,同时转染miR-130a-3p mimics,能部分逆转LF3-AS1对于细胞增殖的抑制作用(P<0.001)。HeLa细胞在过表达ILF3-AS1后,磷酸酶及张力蛋白同源物基因(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten,PTEN)mRNA(P<0.001)及蛋白质(P<0.001)表达量显著升高;当同时转染miR-130a-3p mimics,PTEN的mRNA(P<0.001)及蛋白质(P<0.001)的表达升高被明显抑制。综上,ILF3-AS1可以作为miR-130a-3p的吸附海绵靶向调控PTEN表达,从而抑制宫颈癌细胞的增殖。

ILF3蛋白家族生理及功能调节

ILF3蛋白家族是双链RNA结合蛋白中的一员，由位于人类19号染色体上ilf3基因编码，含有2个最主要的蛋白异构体，主要参与细胞周期调控和DNA损伤修复，参与脊椎动物RNA转录、RNA剪切、RNA编辑、RNA输出、亚细胞RNA定位等多水平方面的代谢，涉及细胞发育，细胞周期和病毒感染等多重细胞功能，调节血管内皮生长因子mRNA的稳定翻译。

ILF3蛋白对雌激素受体beta的调控研究

雌激素在体内的生理作用通过雌激素受体(Estrogen Receptor)ERβ和ERα的介导来实现调控。ERβ在乳腺癌、前列腺癌、结肠癌和卵巢癌的发生、发展过程中具有调控作用。ILF3是RNA结合蛋白中的一员,参与细胞周期调控。凝胶阻滞实验(EMSA)证明了ILF3蛋白能结合ERβmRNA 3'UTR。雌激素受体可介导雌激素实现其功能,ILF3蛋白可能通过与ERβ结合参与雌激素信号通路的调控。为探讨他们的关系以及调控机制,构建ILF3过表达的慢病毒载体,通过Western blot检测ERβ蛋白的表达情况。在蛋白水平上,ERβ蛋白的表达量随着ILF3蛋白量的升高而升高,ILF3对ERβ起正向调控。MTT实验检测ILF3基因表达对MCF-7细胞活力有影响。

双链RNA结合蛋白ILF3在神经系统疾病中的研究进展

白介素增强结合因子3(ILF3)通过双链RNA结合序(dsRBM)及其他结构域与RNA进行结合,参与了RNA转录、翻译、编辑和运输等相关过程,基是重要的RNA调控蛋白。在神经系统相关领域的研究中发现,ILF3与胚胎神经系统的发生、正常结构和功能的维持存在密切联系,同时与众多神经系统疾病如退行性病变、缺血缺氧损伤、病毒感染、肿瘤或精神障碍等也具有相关性。该文着重回顾了ILF3蛋白在神经领域中的研究进展,希望对相关神经系统疾病的干预研究提供思路。

重复超低频经颅磁刺激对首发抑郁症患者的早期疗效及认知功能影响的初步分析

目的初步分析超低频经颅磁刺激对首发抑郁症患者的早期疗效及执行功能的影响。方法选择符合《美国精神障碍诊断统计手册第四版(DSM-IV)》抑郁发作诊断标准,随机将46例首发抑郁症患者分为研究组和对照组,两组均服用帕罗西汀20mg/d,研究组联合2周重复超低频经颅磁刺激真性刺激,频率<0.2Hz、刺激强度400GS;对照组联合2周假刺激治疗(无效刺激)。采用威斯康星卡片分类测验(WCST)和言语流畅性测验评估治疗前后的认知功能。结果治疗2周后,研究组和对照组有效率分别为82%和52%。治疗两周后两组HAMD总分明显下降,但研究组的HAMD总分低于对照组,研究组WCST测验中正确应答数较基线时增加(P<0.05),且好于对照组(P<0.05),错误应答数和持续错误数较基线时减少(P<0.05),完成分类数与基线及对照组相比差异无统计学意义;研究组治疗两周后VFT正确数与基线及对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),但重复数和错误数与基线及对照组相比差异均无统计学意义。结论重复超低频经颅磁刺激可改善首发抑郁症患者的抑郁症状,且认知功能无损害,安全可靠。

亲和沉降及质谱法分离和鉴定与EGFR 3'UTR结合的蛋白质

随着后基因组学研究的逐步深入,非编码RNA成为生物学研究的热点之一,其中对mRNA非翻译区的功能研究也逐渐广泛。mRNA非翻译区(UTR)的调控序列与一些蛋白质特异结合,对其自身mRNA命运进行调控。表皮生长因子受体(EGFR)是细胞信号转导的关键因子,其特异酪氨酸残基发生磷酸化,可招募诸如Shc、Grb2、磷脂酶Cγ和Src等信号蛋白,进而激活下游信号通路,研究证实EGFR与一些癌症的发生相关,因此探讨EGFR非翻译区对其mRNA的调控机制就显得尤为重要。运用亲和沉降及质谱,从HeLa细胞中分离到3种蛋白质与EGFR 3'UTR相结合:Ilf3、hnRNP A1和hnRNP A2/B1。这些蛋白质均为RNA结合蛋白并参与mRNA代谢。这为研究EGFR 3'UTR的调控机制提供了依据。

大剂量山莨菪碱对脑复苏效果的影响

目的 探讨大剂量山莨菪碱对心肺复苏后患者的神经功能状况及生活质量的影响及其机制。方法 采用临床神经功能综合评分 (NFCS)、神经功能缺损评分 (NFI)、Barthel指数 (MBI)对心肺复苏后患者的神经功能状况及生活质量进行评定 ,并观察大剂量山莨菪碱对它们的影响。结果 在心肺复苏后第 5天 ,NFCS评分大剂量山莨菪碱组明显较小剂量山莨菪碱组和常规治疗组高 (P <0 0 1) ,在复苏后第 12周和 2 4周 ,大剂量山莨菪碱组NFI评分明显较另两组低 (P <0 0 5 ) ,MBI评分明显较另两组高 (P <0 0 1)。结论 大剂量山莨菪碱可改善心肺复苏后脑复苏患者的神经功能状况 。

风柴储生物质独立微电网系统的优化规划设计

对某偏远原住民社区现有供电系统、负荷及自然资源情况进行了分析统计,提出一种包含风柴储生物质的独立微电网解决方案,以替换现有的柴油供电系统。根据各分布式电源的技术特性,提出一种改进型负荷跟随控制策略,以柴油发电机组和生物质发电系统分别跟随系统内不同时间尺度下的净负荷波动,储能系统主要起系统稳定控制作用,可显著提高可再生能源渗透率,减少柴油消耗量,并能优化储能系统的容量配置和运行工况。以系统20年寿命周期净现值费用与污染物排放最小为优化目标,采用改进型非劣排序遗传算法(NSGA-Ⅱ),开展了系统方案的综合优化设计,结果表明了优化设计方案的可行性。

LIF和IGF-1对牛胚胎干细胞分离的影响

比较了添加 L IF,IGF- 1和 L IF+IGF对牛胚胎干细胞 (ES)分离的影响。结果表明 :1添加10 ng/m L L IF能提高胚胎贴壁率 ,促进内细胞团 (ICM)和 ES细胞的增殖并抑制其分化 ;2添加 10 ng/m L IGF- 1既能提高胚胎贴壁率 ,又能使 ICM明显增殖的时间和传代后集落出现的时间提前 ;3添加 10 ng/m L L IF+10 ng/m L IGF- 1,可以同时发挥两种生长因子的作用效果 ,更有利于牛胚胎干细胞的分离。

超低频经颅磁刺激在治疗以阴性症状表现为主的精神分裂症患者中的作用

目的探讨超低频经颅磁刺激(ILF-TMS)在治疗以阴性症状表现为主的精神分裂症患者中的作用。方法纳入2018年1—12月绍兴市第七人民医院精神科收治的符合国际疾病分类第10版(ICD-10)精神与行为障碍分类之精神分裂症诊断标准,并以阴性症状表现为主的206例随机分为观察组(n=104)和对照组(n=102),观察组予ILF-TMS联合口服宁神温胆汤治疗,对照组单独口服宁神温胆汤治疗,共观察8周。于干预前、干预后采用PANSS量表分值评定精神康复、以PANSS减分率判定临床疗效,PSP量表分值评定个人与社会功能康复,TESS量表评定不良反应。结果两组PANSS总分及各因子分在干预后分值均有降低,但观察组下降快于对照组;观察组临床疗效高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。经PSP测评,两组个人和社会功能康复在干预后均有上升,但观察组高于对照组,组间比较,差异有统计学意义(P<0.05)。通过TESS量表测评两组治疗8周内的不良反应,观察组出现头晕1例;对照组出现头晕3例,差异无统计学意义(P>0.05)。结论ILF-TMS能有效促进以阴性症状表现为主的精神分裂症患者治疗效果,且无重大不良反应出现,值得临床推广。

试图在一个句子里写尽全部历史——《我弥留之际》创作主旨解读

《我弥留之际》表达的是福克纳独特的人生观和历史观:生活平淡无奇,单调乏味,人生不过是一天一天又一天,大同小异,人类历史是一部充满苦难、悲壮、愚蠢和荒唐的悲喜剧,令人啼笑皆非。为此,作品必然采用寓言和象征的艺术手法。

超低频经颅磁刺激治疗以失眠为主的心理亚健康患者的效果观察

目的探讨ILF-TMS治疗以失眠为主的心理亚健康患者的效果和安全性。方法将2017年1月~2018年7月在本院心理障碍科门诊治疗的以失眠为主的心理亚健康患者87例随机分为观察组和对照组。两组在应用同剂量艾司唑仑的基础上,对照组给予ILF-TMS伪刺激,观察组给予ILF-TMS磁刺激治疗。并应用SHMSV1.0之心理亚健康量表观察心理康复效果,用PSQI量表评定睡眠康复效果,应用TESS量表评定安全性。结果干预末,观察组心理亚健康的正向情绪、心理症状、认知功能评分均较对照组高,差异有统计学意义(t=2.87、2.53、2.13,P<0.05);PSQI评分较对照组低,差异有统计学意义(t=5.91,P<0.05);观察组发生不良反应2例,对照组发生不良反应9例,差异有统计学意义(χ^2=4.92,P<0.05)。结论ILF-TMS联合艾司唑仑片治疗以失眠为主的心理亚健康患者的心理康复、睡眠康复效果比单纯应用艾司唑仑片好,且安全性高,值得临床推广应用。

LIF和IGF-1对牛胚胎干细胞分离的影响

本文研究比较了添加LIF、IGF - 1和LIF +IGF - 1对牛ES细胞分离的影响。结果表明 :①添加 1 0ng/mlLIF能提高胚胎贴壁率 ,促进ICM和ES细胞和增殖并抑制其分化 ;②添加 1 0ng/mlIGF - 1既能提高胚胎贴壁率 ,又能使ICM明显增殖的时间和传代后集落出现的时间提前 ;③添加 1 0ng/mlLIF + 1 0ng/mlIGF - 1 ,可以同时发挥两种生长因子的作用效果 ,更有利用牛胚胎干细胞的分离。因此 ,我们认为 ,在牛ES细胞的分离过程中 ,添加适量LIF和IGF -

基于地热井深实时液位-温度测量系统的研究

基于地热井深实时液位-温度系统的研究主要是对地下压力和地下水温度进行实时监测,其监测指标是监测地面沉降和地质板结的重要指标,且采取的手段多种多样,最普遍的为压力法和射频导纳监测法,测量范围为0~1 000 m。评估方法采用《测量不确定度评定与表示》（JJF 1059[1].1—2012）和国家计量检定规程《液位计检定规程》（JJG 971—2002）,严格按照国家规程测量。

指数场合下定时截尾竞争失效产品恒加试验的优化设计

本文对指数场合下定时截尾竞争失效产品恒加试验的优化设计进行了研究,并得到了优化设计的方案.推广了D.S.Bai,Y.R.Chun(1991)的结果.