凋亡抑制蛋白ILP-2的研究现状及展望

ILP-2(inhibitor of apoptosis protein-like protein-2)是新发现的凋亡抑制蛋白IAPs(inhibitor of apoptosis pro-teins),其过度表达会抑制Bax或Apaf-1/caspase-9途径所致的凋亡,从而使细胞增殖与凋亡失衡,进而促进癌细胞生长。本文从ILP-2的分子生物学特性、抗细胞凋亡作用机制及促进癌细胞生长等方面进行了综述,可为深入研究ILP-2提供参考。

ILP-2和EpCAM基因在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨ILP-2和EpCAM基因在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义。方法本文选取就诊于我院和中山大学附属第三医院2014年6月至2016年5月的66例膀胱移行细胞癌患者,并选取同期的22例非肿瘤患者,检查病理组织标本,观察ILP-2和EpCAM基因在膀胱移行细胞癌与在正常的膀胱组织中表达情况以及ILP-2和EpCAM基因在膀胱移行细胞癌中的表达和病理特征关系。结果 LP-2基因的蛋白产物主要在细胞的细胞质中进行表达,且呈棕黄色细颗粒。LP-2基因在正常的膀胱组织中没有阳性表达;在细胞癌组织中的阳性总表达率(78.79%)显著高于正常的膀胱组织,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。EpCAM基因的蛋白产物主要在细胞膜及部分的细胞质中进行表达,且呈均匀的棕黄色细颗粒。EpCAM基因在正常的膀胱组织中没有阳性表达;在细胞癌组织中的阳性总表达率(69.70%)显著高于正常的膀胱组织,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。ILP-2和EpCAM基因表达在性别和肿瘤大小等方面的表达率比较差异不显著,无统计学的意义(P>0.05);在临床分期、肿瘤数量、病理分级、复发情况等方面的表达率比较差异均显著,具有统计学的意义(P<0.05)。结论 ILP-2和EpCAM基因在膀胱组织中表达和肿瘤细胞间的转移、侵袭有着密切的关系,ILP-2和EpCAM基因检测对在膀胱移行细胞癌诊断与预后中具有重要的判断参考价值。

ILP-2-ECM1(P85)促进乳腺癌细胞的生长

凋亡抑制蛋白-2(inhibitor of apoptosis protein-like protein-2,ILP-2)是新发现的凋亡抑制蛋白质,其抑制肿瘤细胞凋亡促进其生长的分子机制有待阐明,而细胞外基质蛋白1(extracellular matrix protein 1,ECM1)所介导的信号通路与肿瘤细胞的生长密切相关。本研究通过免疫共沉淀法,检测到乳腺癌MCF-7细胞中ILP-2与ECM1(P85)存在相互作用。分别用化学合成的ILP-2-siRNA及ECM1-siRNA干扰处理MCF-7细胞。以未转染的MCF-7细胞和转染阴性对照siRNA的细胞分别作为空白和阴性对照,利用蛋白质印迹法,检测ILP-2-siRNA干扰后ECM1、FAK、Akt蛋白的表达,以及ECM1-siRNA干扰后ILP-2蛋白的表达。其结果显示,与空白对照组相比,ILP-2-siRNA-5(0. 32±0. 095)及ECM1-siRNA-1 (0. 42±0. 024)干扰效率较高(均P<0. 001);ILP-2-siRNA-5组待测蛋白质的相对表达量均显著下调(ECM1,0. 19±0. 013,P<0. 001),FAK (0. 64±0. 069,P<0. 01),Akt (0. 35±0. 120,P<0. 01)),ECM1-siRNA-1组ILP-2 (0. 48±0. 060)蛋白表达也显著下调,表明ILP-2与ECM1-mTOR信号通路联系密切。分别在ILP-2-siRNA和ECM1-siRNA转染24、48和72 h时,使用CCK-8法检测乳腺癌细胞的增殖,并用TUNEL标记荧光法和吖啶橙/溴化乙啶双荧光染色法(AO/EB)检测其凋亡。结果显示,与空白对照组相比,ILP-2-siRNA-5组和ECM1-siRNA-1组的存活率均显著下降(P<0. 001),凋亡率均明显升高(P<0. 001)。利用共转染技术同时敲低ILP-2和ECM1表达,检测细胞的凋亡情况。结果显示,在干扰处理后24 h(0. 55±0. 122),48 h(0. 80±0. 107)和72h(0. 73±0. 091)的凋亡率显著均高于阴性对照组(P <0. 05)。但与只敲低ILP-2或ECM1相比,无显著性差异(P>0. 05)。表明ILP-2可能是通过与ECM1作用激活FAK-mTOR信号通路,影响MCF-7细胞的增殖和凋亡,对乳腺癌细胞MCF-7的生长发挥了积极的作用。

二氟尼柳调控ILP-2/Bcl-2/Bax信号通路促进乳腺癌细胞凋亡

该文旨在探讨二氟尼柳对乳腺癌细胞MCF-7、MDA-MB-231凋亡的影响及分子机制。采用CCK-8法检测不同浓度二氟尼柳对乳腺癌细胞增殖的影响;平板克隆形成实验检测二氟尼柳对乳腺癌细胞克隆形成的作用;细胞划痕实验检测细胞的迁移情况;吖啶橙/溴化乙锭双荧光染色法(AO-EB)分析细胞凋亡情况;采用Western blot(WB)法检测ILP-2、Bax、Bcl-2、Cleavedcaspase-3的蛋白表达水平。结果显示,与对照组相比,二氟尼柳显著抑制MCF-7、MDA-MB-231细胞增殖,且抑制率与药物浓度和时间呈正相关;平板克隆形成率降低;药物显著抑制细胞的迁移能力;细胞凋亡的数量增加,凋亡率呈药物浓度依赖性趋势;Cleaved-caspase-3、促凋亡蛋白Bax表达量上调,凋亡抑制蛋白ILP-2及抗凋亡蛋白Bcl-2表达显著下调,且呈药物浓度依赖性。结果表明,二氟尼柳下调ILP-2蛋白表达影响Bcl-2/Bax信号通路从而促进乳腺癌细胞凋亡。

ILP-2表达上调减轻双氧水诱导的人MCF-7细胞株凋亡

为探讨乳腺癌细胞生长中凋亡抑制蛋白样蛋白2(ILP-2)对活性氧(ROS)毒性的拮抗作用,该研究用不同浓度双氧水(H_2O_2)对人乳腺癌细胞MCF-7进行氧化应激造模, 2′,7′-二氯荧光黄双乙酸盐探针法(DCFH-DA)检测乳腺癌细胞中活性氧变化,蛋白质印记法检测siRNA干扰效率及干扰后乳腺癌细胞ILP-2的表达,噻唑蓝(MTT)法检测siRNA转染及双氧水处理后乳腺癌细胞的增殖活性,划痕试验分析siRNA转染及双氧水处理对乳腺癌细胞迁移的影响,吖啶橙/溴化乙锭双荧光染色法(AO-EB)检测si RNA转染及双氧水处理对乳腺癌细胞凋亡的影响。结果显示, 200μmol/L双氧水显著诱导MCF-7中活性氧的产生。蛋白质印迹法结果显示, siRNA-5干扰效率较高;双氧水+siRNA-5组ILP-2表达高于双氧水+siRNA阴性对照组。双氧水处理细胞24、48和72 h后, MTT结果显示,细胞存活率明显低于空白对照组,双氧水+siRNA-5组细胞存活率高于双氧水+siRNA阴性对照组;划痕实验结果显示,细胞迁移率低于空白对照组,双氧水+siRNA-5组迁移率高于双氧水+siRNA阴性对照组; AO-EB结果显示,与空白对照组相比,双氧水组细胞凋亡率显著升高,双氧水+siRNA-5组细胞凋亡率低于双氧水+siRNA阴性对照组。以上结果表明,凋亡抑制蛋白ILP-2拮抗活性氧对乳腺癌细胞MCF-7的细胞毒性,促进细胞增殖。

若干新的s-偶图的Ramsey数

一个分部顶点数分别为s和t的完全偶图可用Ks,t来表示.对于正整数s,以及两个偶图G和H,s-偶图Ramsey数BRs(G,H)是一个最小正整数t,使得每一个Ks,t的2-边着色都含有1色的图G或者含有2色的图H.文章提出了一个新的整数线性规划模型来计算两个图的s-偶图Ramsey数.实验结果表明,该模型比以前的模型更加高效.利用该模型,成功地确定了关于s-偶图Ramsey数的55个新的精确值.