结直肠癌中原癌基因DEK与IMP3/Ezrin通路的相关性

前期研究表明:IMP3/Ezrin基因是上皮细胞-间质细胞转换(EMT)中的主要构成基因,DEK可以影响结直肠癌细胞的迁移、粘附和侵犯等生物学行为。为了进一步研究DEK与IMP3/Ezrin在结直肠癌中的相关性,首先分析检测了255例结直肠癌和120例癌旁组织蜡块中DEK与IMP3/Ezrin的蛋白水平表达及15例结直肠癌及其癌旁新鲜组织中DEK与IMP3/Ezrin的mRNA水平表达,继而检测结直肠癌细胞中DEK基因敲除前后DEK/IMP3/Ezrin蛋白和mRNA水平变化。结果显示:DEK、IMP3/Ezrin蛋白在255例结直肠癌组织与120例癌旁良性组织中的阳性表达率有明显差异,而15例结直肠癌及癌旁新鲜组织中三种基因mRNA水平以及结直肠癌细胞系中三种基因的蛋白水平也呈现相近的趋势。利用RNAi将DEK进行敲除结果显示:DEK敲除后4种结直肠癌细胞系中的IMP3 mRNA均明显下调,而Ezrin mRNA均明显上调。由此推测,DEK可能通过调节IMP3/Ezrin信号通路相关蛋白促进结直肠癌的演进。

IMP3基因沉默介导Notch信号通路对结直肠癌上皮间质转化及血管生成的影响

目的:探究胰岛素样生长因子ⅡmRNA结合蛋白3(IMP3)基因沉默介导Notch信号通路对结直肠癌上皮间质转化(EMT)及血管生成的调控机制。方法:收集我院73例结直肠癌患者肿瘤切除术后癌组织及癌旁组织。免疫组化检测结直肠癌组织及癌旁组织中IMP3蛋白表达。将人结肠癌细胞系SW620细胞进行IMP3沉默或Notch通路抑制处理,设置阴性对照。Western blot检测处理后的细胞中Notch1、Hes1、Vimentin、E-cadherin、N-cadherin、VEGF、TNF-α和TGF-β蛋白表达。MTT比色法检测各组细胞活力。Transwell实验测定各组细胞侵袭能力。结果:免疫组化实验发现IMP3在癌组织中高表达。细胞实验表明IMP3沉默可下调Notch通路相关蛋白Notch1及Hes1表达。与阴性对照组相比,沉默IMP3或抑制Notch通路后,SW620细胞活力、转移能力、EMT管生成明显受到抑制(P<0.05)。细胞经沉默IMP3联合抑制Notch通路处理,对上述指标的抑制效果较单独处理(沉默IMP3或抑制Notch通路)更加显著(P<0.05)。结论:IMP3基因沉默能够抑制Notch通路活化进而抑制结直肠癌EMT及血管生成。

姜黄素对机械牵张引发的Ⅱ型肺泡上皮细胞ezrin/Akt通路及炎性因子的影响

目的探讨姜黄素对机械牵张引发的Ⅱ型肺泡上皮细胞(AT-Ⅱ细胞)ezrin/Akt通路及炎性因子的影响及其作用机制。方法原代培养大鼠AT-Ⅱ细胞,采用Western blot及ELISA方法检测AT-Ⅱ细胞在20%机械牵张力刺激4、8、16、24、48 h时p-ezrin、ezrin、p-Akt和Akt蛋白表达及炎性因子TNF-α、IL-1β及IL-6分泌的动态变化;并且进一步分析不同浓度姜黄素(10、20、30μmol/L)对ezrin/Akt通路蛋白及炎性因子水平的影响。结果机械牵张干预后,AT-Ⅱ细胞p-ezrin、p-Akt蛋白表达水平明显增高,且在4~16 h范围内表达水平持续增高,而ezrin、Akt蛋白表达无明显变化;AT-Ⅱ细胞TNF-α、IL-1β及IL-6分泌量在机械牵张刺激8 h内无明显变化,之后随刺激时间延长明显升高。在机械牵张刺激下,不同剂量姜黄素能够不同程度抑制p-ezrin、p-Akt蛋白表达及减少TNF-α、IL-1β及IL-6分泌。结论姜黄素对机械所致肺损伤有保护作用,其作用可能与抑制ezrin/Akt信号传导、调节炎性因子释放有关。

Ezrin和CD44V6在大肠腺癌中的研究进展

大肠癌是常见的恶性肿瘤之一,其发生、发展机制较为复杂,涉及到许多癌基因、抑癌基因和信号通路的改变。在临床工作中,对大肠癌侵袭能力的评估和转移的预测,成为确定治疗方案的一个重要条件,影响患者的生存期。但是,目前尚缺乏对大肠癌预后评估的有效手段,

Ezrin蛋白信号转导通路及其对肿瘤侵袭转移的最新进展

肿瘤转移是一个多阶段、多途径、涉及多基因及其信号通路变化的一系列复杂过程。了解肿瘤转移相关基因的信号传导通路以及对肿瘤转移的作用机制,为寻找抑制肿瘤转移的关键靶点具有重要的意义。Ezrin高表达与肿瘤转移密切相关,它可通过改变肿瘤细胞极性及细胞运动、调节肿瘤细胞间黏附及细胞与细胞外基质黏附、参与肿瘤细胞内信号转导而影响恶性肿瘤转移。Ezrin过度表达可以破坏正常细胞内信号传递网络的平衡,其中主要涉及的为细胞信号转导相关分子(Rho)及受体酪氨酸蛋白激酶等信号传导途径。Ezrin借助于细胞内错综复杂的信号转导网络调控细胞的形态构成、黏附、吞噬、运动、血管形成等一系列的生物学过程,最终实现肿瘤细胞的侵袭和转移。本文就Ezrin蛋白的信号转导通路及其对肿瘤转移作用的研究进展做一综述。

Ezrin蛋白在肿瘤坏死因子致大鼠肺微血管内皮细胞炎性损伤中表达及Rac 1信号通路的影响

目的：探讨肿瘤坏死因子-α（TNF-α）诱导大鼠肺微血管内皮细胞（PMVEC）中Ezrin蛋白及其磷酸化（p-Ezrin）表达的变化，以及小G蛋白家族成员Rac 1对其的影响。方法将体外培养的SD大鼠PMVEC分别进行TNF-α刺激时效实验和Rac 1通路干预实验。①时效实验：以10μg/L TNF-α分别刺激PMVEC 0、0.25、0.5、1、3、6、12、24 h后，采用蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测Ezrin及p-Ezrin的表达。②Rac 1通路干预实验：以200μmol/L Rac 1特异性抑制剂NSC 23766与PMVEC预孵育0.5 h再加入10μg/L TNF-α继续孵育，3 h后检测p-Ezrin表达，同时设空白对照组（1%胎牛血清）及TNF-α或NSC 23766单独刺激组。结果①PMVEC中仅低量表达Ezrin，且TNF-α刺激对Ezrin无明显影响。TNF-α刺激PMVEC 0 h时p-Ezrin蛋白表达〔即p-Ezrin/Ezrin（灰度值）〕为0.21±0.03，刺激0.25 h时p-Ezrin蛋白表达即开始升高（0.53±0.19），3 h达高峰（1.68±0.30），然后逐渐下降，24 h时仍高于基础水平（0.87±0.18），组间比较差异有统计学意义（F＝62.200，P＝0.000），说明TNF-α可呈时间依赖性增加Ezrin磷酸化。②与空白对照组比较，TNF-α和NSC 23766单独刺激组均能诱导p-Ezrin表达增加（TNF-α组：0.92±0.12比0.68±0.16， t＝-2.864，P＝0.020；NSC 23766组：1.33±0.24比0.68±0.16，t＝-5.429，P＝0.000）；NSC 23766与TNF-α共同孵育可使p-Ezrin表达较TNF-α单独刺激组进一步增加（2.14±0.18比0.92±0.12，t＝-14.670，P＝0.000），各组间差异有统计学意义（F＝73.810，P＝0.000）。结论 Ezrin磷酸化表达增加参与了TNF-α诱导的PMVEC损伤，抑制Rac 1信号通路可通过上调Ezrin磷酸化表达参与TNF-α对PMVEC的致伤效应。

Ezrin蛋白的生物学作用及其与肿瘤转移的关系

Ezrin蛋白是ERM蛋白家族中的一员,最早被发现。人体几乎所有的组织细胞中都有Ezrin蛋白的存在。Ezrin蛋白分子通过磷酸化等方式来激活,暴露其分子上的功能位点,形成具有功能分子结构。亚细胞定位在胞浆中,细胞膜与骨架蛋白之间,通过链接细胞内骨架蛋白与膜蛋白来实现其多项复杂而又重要的功能。近年来发现Ezrin蛋白存在多种功能,包括参与细胞形态学、参与免疫突触的形成,与黏附分子作用进而来调节细胞与细胞或细胞与基质间的黏附、调节细胞运动性等。最重要的是它在多种肿瘤中高表达并促进肿瘤细胞的增殖及转移等活动,参与肿瘤的发生与发展。干扰肿瘤细胞内的Ezrin蛋白表达或抑制其磷酸化后,可以明显抑制肿瘤的转移。所以,Ezrin可能成为将来抑制肿瘤转移研究的潜在靶点。