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金属β-内酰胺酶(IMP-1)的表达,纯化和鉴定 被引量:2
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作者 丁世家 邱宗荫 +1 位作者 山口佳宏 后滕正文 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2005年第4期519-521,529,共4页
目的:建立金属β-内酰胺酶IMP-1的表达,纯化和鉴定方法,并探讨实验条件对分离纯化的影响。方法:pET9a/d-IMP-1质粒转化至E.coli Competent BL21(DE3)Cell并在LB培养基中表达后,通过SP Sepharose离子交换柱,得到粗提物,浓缩后用Sephadex ... 目的:建立金属β-内酰胺酶IMP-1的表达,纯化和鉴定方法,并探讨实验条件对分离纯化的影响。方法:pET9a/d-IMP-1质粒转化至E.coli Competent BL21(DE3)Cell并在LB培养基中表达后,通过SP Sepharose离子交换柱,得到粗提物,浓缩后用Sephadex G-75凝胶柱进一步纯化,得到IMP-1的精提物,对纯化产物用SDS-PAGE和MALDI-TOF-MS进行鉴定,同时用Nitrocefin作底物,测定纯化的金属β-内酰胺酶IMP-1的活性。结果:纯化的IMP-1具有较高的活性,能水解大多数抗生素。其米氏常数Km=9.28μmol/L;用MALDI-TOF-MS法测得的分子量为Mr=25111.9。结论:本文建立了金属β-内酰胺酶IMP-1的表达、纯化、鉴定方法,该法可用于其它的金属β-内酰胺酶的表达和纯化。 展开更多
关键词 金属Β-内酰胺酶 imp-1 基因表达 酶纯化 鉴定方法 克拉维酸
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临床分离产IMP-1型金属酶非发酵菌的耐药机制研究
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作者 程曦 贾文祥 +8 位作者 杜宝中 曾蔚 康梅 张再蓉 谢轶 杨维青 范红 陶传敏 张磊 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第4期876-879,共4页
从临床收集耐亚胺培南的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌共50株,进行头孢他啶和2-巯基乙醇的表型协同试验(CAZ+ME),然后进行金属酶IMP-1基因的PCR检测。选取IMP-1阳性株测序,用PCR方法检测有无一类整合子基因(IntI1)。表型的检测发现有28株... 从临床收集耐亚胺培南的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌共50株,进行头孢他啶和2-巯基乙醇的表型协同试验(CAZ+ME),然后进行金属酶IMP-1基因的PCR检测。选取IMP-1阳性株测序,用PCR方法检测有无一类整合子基因(IntI1)。表型的检测发现有28株为协同阳性,其中铜绿假单胞菌27株,鲍曼不动杆菌1株。PCR和测序检测出其中一株铜绿假单胞菌含有IMP-1基因,同时也含有IntI1基因。首次在中国西部地区发现产IMP-1型金属酶、同时也含有一类整合子的铜绿假单胞菌,对于临床上研究细菌的耐药性传播具有重要意义。 展开更多
关键词 imp-1 整合子 非发酵菌
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产 IMP-1型碳青霉烯酶非脱羧勒克菌的分离与鉴定
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作者 齐杰 刘贵建 +3 位作者 潘健 马玉芝 张婷菊 刘志远 《现代检验医学杂志》 CAS 2015年第2期52-54,57,共4页
目的:分析碳青霉烯耐药非脱羧勒克菌(L.adecarboxylata)的耐药基因型。方法Vitek II Compact 鉴定细菌及药敏试验,PCR 扩增碳青霉烯酶基因。结果该株非脱羧勒克菌产 IMP-1型碳青霉烯酶。结论非脱羧勒克菌临床分离株较少见,此为首... 目的:分析碳青霉烯耐药非脱羧勒克菌(L.adecarboxylata)的耐药基因型。方法Vitek II Compact 鉴定细菌及药敏试验,PCR 扩增碳青霉烯酶基因。结果该株非脱羧勒克菌产 IMP-1型碳青霉烯酶。结论非脱羧勒克菌临床分离株较少见,此为首次自非脱羧勒克菌检出 IMP-1型金属酶。 展开更多
关键词 非脱羧勒克菌 碳青霉烯类 imp-1 金属酶
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重症监护病房患者铜绿假单胞菌IMP-1耐药基因检测及其耐药性分析 被引量:1
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作者 束振华 黄震 《现代医药卫生》 2011年第11期1620-1621,共2页
目的:探讨重症监护病房(intensive care unit,ICU)患者铜绿假单胞菌IMP-1耐药基因检测及耐药性,为临床合理使用抗生素提供依据。方法:采用聚合酶链反应(PCR)检测耐药基因IMP-1,ATB Expression自动鉴定病原菌及药敏分析。结果:2007~200... 目的:探讨重症监护病房(intensive care unit,ICU)患者铜绿假单胞菌IMP-1耐药基因检测及耐药性,为临床合理使用抗生素提供依据。方法:采用聚合酶链反应(PCR)检测耐药基因IMP-1,ATB Expression自动鉴定病原菌及药敏分析。结果:2007~2009年共分离出106株铜绿假单胞菌,对头孢他啶、亚胺培南、哌拉西林、氨曲南、头孢哌酮、头孢吡肟、左氧氟沙星的耐药率分别为50.9%、39.6%、79.2%、56.6%、57.5%、41.5%、25.5%。每年耐亚胺培南株的检出率依序分别为16.0%、28.3%、39.6%。耐亚胺培南株绝大部分检出IMP耐药基因。结论:ICU患者金属酶表型阳性菌株检出的基因型主要为IMP-1,产酶菌株耐药性强,随时进行细菌耐药性监测,正确使用有效的抗生素是控制感染和延缓细菌耐药的关键。 展开更多
关键词 重症监护病房 铜绿假单胞菌 imp-1基因 耐药性
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延续的音符13款CD/MP3随身听热力比拼
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《新潮电子》 2003年第10期101-103,共3页
关键词 MP3随身听 CD随身听 音质效果 SL-J900 SL-CT800 D-CJ01 D-NE1 imp-350 IRIVER imp-550 压缩编码
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十二款CD随身听 大型横向评测爱上UFO
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作者 李扬 月亮斯坦 《数码》 2003年第10期58-67,共10页
与其他产品采用大面积金属外壳不同,D-NE1采用了少见的混合型设计。尽管整个面板大部分是拉丝工艺的铝合金,但边缘部分采用了透明塑料外壳。
关键词 CD随身听 D-NE1 机身设计 金属外壳 功能特点 音质效果 D-NE9 D-EJ2000 D-EJ985 imp-400 imp-550 SL-CT700 SL-CT500
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抉择!不再让耳朵左右为难
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作者 USST 《数码》 2003年第11期104-108,共5页
抉择!真是一件痛苦的事情。目前市场上的随身听产品众多,面对这么多的品牌和型号,到底买哪一款产品最适合自已是一件让人头痛、左右为难的事情,尤其是目前不同品牌的产品,功能和定位都非常类似,这样一来就更加让消费者在选购时感... 抉择!真是一件痛苦的事情。目前市场上的随身听产品众多,面对这么多的品牌和型号,到底买哪一款产品最适合自已是一件让人头痛、左右为难的事情,尤其是目前不同品牌的产品,功能和定位都非常类似,这样一来就更加让消费者在选购时感到彷徨。目前市场上随身听产品主要分为CD、MD和MP3三大类。CD音质好,但不俺携;便但在音源方面单一而且录制麻烦,MP3功能强大,但音质普遍不理想,如何从这三大类产品中的同档次机型里选择最适合自已的产品,就成了一件让人为难的事情了。 展开更多
关键词 CD随身听 SONY-D-NE1 功能 IRIVER imp-550 技术参数 性能比较
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韩流CD势头看涨(北京、广州、上海)
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《数码》 2003年第10期110-110,共1页
关键词 CD随身听 价格 IRIVER imp-550 索尼DNE1 松下CT800
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Virtual screening and high-throughput testing of L1 metallo-β-lactamase inhibitor
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作者 Chennan Liu Qian Wang +9 位作者 Jiangxue Han Sihan Liu Chunling Xiao Yan Guan Xinghua Li Ying Wang Xiao Wang Jianzhou Meng Maoluo Gan Yishuang Liu 《Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences》 CAS CSCD 2021年第10期806-812,共7页
As a zinc-dependent enzyme, metal-β-lactamase L1 contributes to the development of β-lactam antibiotic resistance. The metal-β-lactamase inhibitor can restore the efficacy of β-lactam antibiotics, and its developm... As a zinc-dependent enzyme, metal-β-lactamase L1 contributes to the development of β-lactam antibiotic resistance. The metal-β-lactamase inhibitor can restore the efficacy of β-lactam antibiotics, and its development has attracted much attention. In the present study, we used four widely-used virtual screening programs to screen 7035 small molecules to identify potential L1 inhibitors, and a high-throughput experimental model of L1 inhibitors was established. In this high-throughput testing model, the inhibition rate of 163 compounds on L1 exceeded 40%. The results of virtual screening of 7035 small molecules using the following four programs showed that among the top 1.35% of the compounds, their hit rates were ranked as Schr?dinger’s(5.26%), DS(1.05%), and Sybyl-x 2.0(1.05%), and Smina(2.11%). 展开更多
关键词 L1 metallo-beta-lactamase inhibitor Virtual screening High-throughput screening
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Let-7a对人乳腺癌细胞生长的抑制作用及机制 被引量:5
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作者 吴凯 吴爱国 +2 位作者 马雷 杨华峰 邵国利 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期506-510,共5页
目的探讨let-7a对人乳腺癌MCF-7细胞株的抑制作用及机制。方法分别用lipofectami-neTM2000介导的let-7a转染MCF-7细胞株(实验组)和siRNA转染细胞株(阴性对照组),并设空白对照组(脂质体转染组)。使用荧光显微镜观察细胞转染效率;CCK-8法... 目的探讨let-7a对人乳腺癌MCF-7细胞株的抑制作用及机制。方法分别用lipofectami-neTM2000介导的let-7a转染MCF-7细胞株(实验组)和siRNA转染细胞株(阴性对照组),并设空白对照组(脂质体转染组)。使用荧光显微镜观察细胞转染效率;CCK-8法检测细胞增殖抑制率;半定量RT-PCR法检测IMP-1 mRNA的表达;Western blot法测定转染48 h后IMP-1蛋白的表达水平。结果实验组和阴性对照组的细胞转染效率无明显差别;let-7a组细胞增殖抑制率明显高于阴性对照组及空白对照组(均为P<0.05),且具有时间和浓度依赖性;let-7a组的IMP-1 mRNA表达水平明显低于空白对照组和阴性对照组(F=220.384,P=0.000);在MCF-7细胞中存在IMP-1蛋白表达,let-7a转染组特异性条带明显弱于两个对照组。结论 let-7a对人乳腺癌MCF-7细胞增殖有抑制作用,其机制可能与抑制IMP-1的基因表达有关。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 imp-1基因 let-7a 微小RNA 细胞转染
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