A549细胞中过表达p16^(INK4A)引起细胞衰老样表型的研究

目的 研究p16 INK4A对A5 4 9肺小细胞腺癌细胞系表型的影响。方法 用pcDNA3 p16质粒转染 p16基因缺失的A5 4 9肺小细胞腺癌细胞系并通过Northernblot和Westernblot鉴定 p16基因的异位表达 ,通过流式细胞仪分析转染后细胞周期变化 ,利用Westernblot和SA β gal染色检测Rb蛋白磷酸化状态的改变和细胞表型变化。结果 证实了在A5 4 9中 p16 INK4A能稳定表达。p16 INK4A的表达能使细胞产生明显的G1期阻滞并伴随着Rb蛋白磷酸化状态的改变 ,Rb蛋白主要以低磷酸化形式存在。发生生长阻滞的转染细胞表现出一系列细胞衰老样表型 ,如细胞体积变大 ,细胞形态呈明显的扁平状态 ,并且存在衰老相关半乳糖苷酶阳性染色。结论 在A5 4 9细胞中表达 p16 INK4A能使细胞发生衰老样表型并提示 p16

p16INK4a免疫细胞化学染色在宫颈癌筛查中的作用

目的:探讨p16INK4a免疫细胞化学染色在宫颈癌筛查中的作用。方法:选择佛山市南海区第五人民医院2017年8月至2018年4月收治的宫颈癌患者160例。运用Pathsolver盈山全自动细胞/组织标记染色系统,以盈山保存液为基础的细胞涂片直接进行p16INK4a免疫细胞化学染色,同时进行传统的液基细胞巴氏染色,对p16INK4a免疫细胞化学染色和传统的液基细胞巴氏染色任一检测阳性或二者均阳性者进行阴道镜取活检检查。结果:传统的液基细胞巴氏染色检测阳性率为25.0%,p16INK4a免疫细胞化学染色检测阳性率为30.0%,差异具有统计学意义(P<0.05)。p16INK4a免疫细胞化学染色诊断宫颈癌的灵敏度、特异度高于传统的液基细胞巴氏染色检测,假阳性率、假阴性率低于传统的液基细胞巴氏染色检测,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:p16INK4a免疫细胞化学染色联合传统的液基细胞巴氏染色分型检测可以提高诊断宫颈癌的灵敏度和特异度,对宫颈癌的早发现、早治疗有重要临床意义。

中国东北地区成年人外周血自然杀伤细胞和自然杀伤T细胞绝对计数研究

目的研究中国东北地区成人NK、NKT和T淋巴细胞绝对计数。方法用流式细胞术单平台法检测130例健康成人外周血NK、NKT、CD3+T、CD3+CD4+T、CD3+CD8+T细胞绝对计数及百分数。结果建立了中国东北地区成人外周血NK、NKT、CD3+T、CD3+CD4+T、CD3+CD8+T细胞绝对计数及百分数等参考范围;男性NK细胞数量和NK%高于女性,其余各指标男女无明显差别。35岁以下成人CD8+T细胞数量高于60岁以上成人(P<0.05),CD8+T细胞数量与年龄呈负相关,r=-0.201,P<0.05。结论中国东北地区成年人NK细胞数量明显高于西方人群,且NK细胞数量和百分数与性别相关,而CD4+T细胞数量与国外参考范围相近。

慢性乙肝湿热蕴脾证患者CD细胞、NK细胞功能的研究

探讨CD细胞、NK细胞功能在慢性乙肝湿热蕴脾证病理变化中的作用。选择慢性乙型肝炎湿热蕴脾证患者60例,随机分为2组,分别在治疗前和治疗1个月后检测CD3、CD4、CD8、NK细胞水平,并观察治疗前后中医证候疗效。结果表明慢性乙肝湿热蕴脾证患者CD3、CD4明显低于正常值,CD8明显高于正常值,治疗后均得到明显好转,2组治疗前后比较CD3、CD4、CD8值差异有显著性(P<0.01),NK细胞与正常值相比差异无显著性(P>0.05)。提示CD细胞功能异常是慢性乙肝湿热蕴脾证病理变化的重要因素之一,而NK细胞似乎与慢性乙肝湿热蕴脾证的病理变化关系不大;中医辨证治疗能有效地调节慢性乙肝湿热蕴脾证患者的CD细胞功能。

衰老标志物在大肠腺瘤和大肠癌中的表达及意义

目的探讨衰老标志物衰老相关β半乳糖苷酶(SA-β-gal)及P16^(INK4A)在大肠腺瘤及大肠癌中的表达及其临床意义。方法应用SA-β-gal染色法和免疫组织法分别检测30例大肠腺瘤及腺瘤旁正常组织、48例大肠癌组织及癌旁组织中SA-β-gal及P16^(INK4A)的表达。分析和比较不同病理特征的大肠腺瘤及大肠癌中SA-β-gal和P16^(INK4A)的表达情况。结果大肠腺瘤组织中SA-β-gal和P16^(INK4a)的表达明显高于大肠癌组织及腺瘤旁正常组织,大肠癌组织中SA-β-gal和P16^(INK4a)的表达明显低于癌旁正常组织。SA-β-gal在绒毛管状腺瘤、>1 cm的腺瘤、进展期腺瘤中低表达,在低分化腺癌、有远处转移、Ⅳ期的大肠癌中低表达。P16^(INK4a)在无淋巴结转移、Ⅰ、Ⅱ期大肠癌中高表达。结论 SA-β-gal及P16^(INK4a)在不同大肠组织中的表达情况提示细胞衰老可能作为抑制途径参与到腺瘤发生癌变的过程中。推测SA-β-gal的检测可能作为预警高风险癌前病变的标志物,P16^(INK4a)可作为大肠癌预后良好的指标。