A549细胞中过表达p16^(INK4A)引起细胞衰老样表型的研究

目的 研究p16 INK4A对A5 4 9肺小细胞腺癌细胞系表型的影响。方法 用pcDNA3 p16质粒转染 p16基因缺失的A5 4 9肺小细胞腺癌细胞系并通过Northernblot和Westernblot鉴定 p16基因的异位表达 ,通过流式细胞仪分析转染后细胞周期变化 ,利用Westernblot和SA β gal染色检测Rb蛋白磷酸化状态的改变和细胞表型变化。结果 证实了在A5 4 9中 p16 INK4A能稳定表达。p16 INK4A的表达能使细胞产生明显的G1期阻滞并伴随着Rb蛋白磷酸化状态的改变 ,Rb蛋白主要以低磷酸化形式存在。发生生长阻滞的转染细胞表现出一系列细胞衰老样表型 ,如细胞体积变大 ,细胞形态呈明显的扁平状态 ,并且存在衰老相关半乳糖苷酶阳性染色。结论 在A5 4 9细胞中表达 p16 INK4A能使细胞发生衰老样表型并提示 p16