INS基因遗传多态性与2型糖尿病发病风险及血清IAA-Ab水平相关性研究

目的探讨INS基因启动子区单核苷酸多态性与2型糖尿病发病风险和血清IAA-Ab水平的相关性。方法利用Sequenom MassArray SNP分型检测技术,对该院497例2型糖尿病患者（病例组）和500例健康体检人员（对照组）INS的3个启动子区单核苷酸多态性位点（rs689、rs71464177和rs3842738）进行基因分型并分析两组间分布情况;检测糖尿病患者IAA-Ab水平。用χ2检验统计分析病例组和对照组,病例中IAA-Ab阳性组和阴性组的SNP位点基因型频率分布,采用非条件Logistic回归分析,校正性别、年龄影响,计算比数比（OR）和95%置信区间（CI）,评价多态性位点与2型糖尿病易感性和血清IAA-Ab水平的相关性。结果 rs689AA、TT、AT基因型在病例组的分布频率分别为58.75%、28.77%和12.47%,在对照组的分布频率分别为50.40%、35.60%和14.00%,两组间差异有统计学意义（χ2=3.923,P〈0.05）;且相对于AA基因型,TT基因型者患糖尿病的危险性减少,风险度OR值为0.35（95%CI：0.18-1.06）。AA、TT、AT各基因型在IAA-Ab阳性患者的分布频率与IAA-Ab阴性患者比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论中国人群INS基因rs689位点多态性与中国人群2型糖尿病发病风险相关,并且可能与IAA-Ab水平相关。

大鼠Ins1基因启动子区域DNA甲基化状态的研究

目的:研究大鼠Ins1(Insulin 1)基因启动子在各种组织中DNA甲基化的状态及在转化分化过程中甲基化的变化情况,为从表观遗传学方面研究Ins1基因表达调控的机制奠定基础。方法:通过RT-PCR检测大鼠胰岛、大鼠胰岛素瘤细胞(INS-1)及大鼠肝干细胞(WB)中Ins1基因的表达情况。采用重亚硫酸盐测序法分析这三种细胞位于转录起始位点上游400 bp的Ins1基因启动子区域DNA甲基化的状态,并用焦磷酸测序法分析大鼠肺、脾、皮肤、小肠、脂肪和肝脏组织的甲基化状态及WB细胞转入PDX1慢病毒后甲基化的变化情况。结果:大鼠胰岛和INS-1细胞中Ins1基因高表达,启动子区域的甲基化程度非常低,而在大鼠肺、脾、皮肤、小肠、脂肪、肝脏组织和WB细胞中Ins1基因不表达,启动子区域的甲基化程度很高,当WB细胞转入PDX1慢病毒后可使Ins1基因启动子区域的甲基化程度降低。结论:Ins1基因的表达受甲基化调控,PDX1单个转录因子虽可降低Ins1基因甲基化程度但并不能使其完全去甲基化并表达Ins1基因。

NF-κB1基因启动子-94ins/del ATTG的基因多态性与动脉粥样硬化性脑梗死的关系

目的探讨核因子κB1(NF-κB1)基因启动子-94ins/del ATTG基因多态性与动脉粥样硬化性脑梗死(ACI)的关系。方法采用PCR限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)法检测191例ACI患者(其中中国东北地区ACI患者101例,湖北省ACI患者90例)和171名健康对照(其中东北地区90名,湖北省81名)的NF-κB 1基因启动子-94ins/del ATTG基因型,分析该基因多态性与ACI的关系。结果 ACI组患者的NF-κB1-94ins/del ATTG 2种基因型频率(WW和DD型)和2种等位基因频率(W和D型)与健康对照者间比较有统计学差异(P<0.01);东北地区健康对照组与东北ACI组DD基因型频率和等位基因频率(W和D型)存在统计学差异(P<0.05),湖北地区健康对照组与ACI组WW、DD基因型频率和等位基因频率(W和D型)存在统计学差异(P<0.05),两地区健康对照组之间比较以及ACI组间比较均无统计学差异(P>0.05)。结论 NF-κB1基因启动子-94ins/del ATTG基因多态性与ACI发病有一定相关性,但其相关性不存在地区差异。

核因子-κB1-94ins/delATTG基因多态性与中国青岛地区汉族人群急性进展性脑梗死相关性的研究

目的 探讨核因子-κB1（NF-κBl）-94ins/delATrG基因多态性与中国青岛地区汉族人群急性进展性脑梗死（APCI）的相关性. 方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析（PCR-RFLP）方法 检测100例急性脑梗死患者（ACI组）和99例APCI患者（APCI组）NF-κB1-94ins/如1ATTG基因多态性;采用细胞免疫组化法检测两组患者外周血单个核细胞（PBMC）胞核NF-κBp65表达率的变化. 结果 APCI组TT基因型和T等位基因频率均明显高于ACI组,比较差异有统计学意义（P〈0.05）;等位基因频率的相对风险分析发现T等位基因携带者发生APCI的风险是C等位基因的1.622倍;Logistic回归分析显示.TT基因型与APCI的发病独立相关（OR=2.14,95%CI：2.654～8.296,P〈0.05）.APCI组TT基因型个体PBMC胞核NF-κBp65表达率明显高于ACI组,比较差异有统计学意义（P〈0.05）;Logistic回归分析显示,TT基因型个体PBMC胞核NF-κBp65表达率与APCI的发病独立相关（OR=1.96,95%CI：2.267～7.691,P〈0.05）. 结论 NF-κB1-94ins/delA TTG基因多态性参与了APCI发生.T等位基因可能是中国青岛地区汉族人群APCI发病的遗传易感基因.携带T等位基因的个体可能通过上调NF-κB1的表达而增加APCI的发病风险.

胰岛素基因新变异所致永久性新生儿糖尿病患儿1例的临床及遗传学分析

目的分析1例永久性新生儿糖尿病(PNDM)患儿的临床及遗传学特征。方法选取2019年8月于西安市儿童医院就诊的1例PNDM患儿为研究对象。收集患儿的临床资料及实验室检查结果,应用靶向捕获高通量测序进行变异位点分析,针对筛选出的候选靶基因用Sanger测序进行家系验证。结果患儿系4个月26天女婴,以酮症酸中毒起病,空腹血糖24.4 mmol/L,尿糖阳性,血清C肽降低,糖化血红蛋白9.58%,糖尿病自身抗体阴性。基因检测发现患儿胰岛素INS基因存在c.314T>G(p.L105R)杂合变异。Sanger测序证实患儿父母均未携带上述变异,为新发变异。该变异尚未见文献及数据库报道,根据美国医学遗传学与基因组学学会指南,评级为疑似致病变异。结论INS基因c.314T>G(p.L105R)变异可能是该患儿的遗传学病因。对于临床疑似PNDM的患儿建议早期行基因检测。

新生儿糖尿病致病基因分析及其对疗效的影响

14例新生儿糖尿病（neonatal diabetes mellitus）入选，比较胰岛素（n=5）和格列本脲（n=9）的疗效。扩增6例患儿KCNJll、ABCC8、INS基因并测序。共发现2例存在ABCC8基因突变，1例KCNJIl基因突变，1例为INS基因突变，1例为6q24甲基化减低，1例突变基因不清。9例新生儿糖尿病格列本脲治疗者8例血糖控制良好（88．9％）。5例采用胰岛素治疗后均失访或死亡。提示新生儿糖尿病胰岛素治疗依从性差，格列本脲可有效降低血糖。

一例青少年的成人起病型糖尿病10型患儿的1NS基因变异分析

目的对1例青少年的成人起病型糖尿病10型(MODY10)患儿的INS基因进行分析,明确其致病原因。方法应用高通量测序技术对患儿的INS基因进行突变筛查,使用Sanger测序技术验证变异位点并筛査患儿父母的相应位点。结果基因变异分析提示患儿及其母亲INS基因第1外显子存在c.130G>A(p.Gly44Arg)杂合变异。蛋白质结构预测及ACMG指南评估,均提示该变异存在致病性。结论INS基因第1外显子c.130G>A(p.Gly44Arg)变异可能为患儿的致病原因。