多囊卵巢综合征患者子宫内膜INSR基因mRNA表达及意义

目的对多囊卵巢综合征患者子宫内膜INSR基因mRNA表达及意义予以探讨。方法随机选取我院2013年1—12月间收治的多囊卵巢综合征患者36例,将其均分为两组,一组为无胰岛素抵抗组(IR),一组为有胰岛素抵抗组(NIR),对两组患者的臀围、腰围、体重、身高、月经周期、年龄等基本资料进行统计,并计算患者的WHR(腰臀比)、BMI(体质指数),取患者的子宫内膜组织应用荧光定量RT-PCR对患者的INSR mRNA的表达进行检测,并实施统计学分析。结果两组患者的臀围、腰围、体重、WHR、BMI具有明显差异,IR组明显高于NIR组,IR组的INSR mRNA表达值为:0.113±0.161,NIR组的INSR mRNA表达值为:0.158±0.190,两组患者比较,差异不具备统计学意义。结论多囊卵巢综合征患者的子宫内膜中具有INSR mRNA表达,这是胰岛素作用的靶器官,其中IR具有降低多囊卵巢综合征患者子宫内膜的INSR mRNA表达的趋势。

奶牛妊娠中后期胎盘mRNA差异表达基因分析

奶牛的繁殖问题是制约我国奶业快速发展的瓶颈。为了研究奶牛妊娠中后期胎盘差异基因表达情况,探索mRNA在奶牛妊娠过程中的调控作用,本研究以奶牛妊娠中后期胎盘、非妊娠对照组子宫为对象,使用RNA-seq测序技术进行转录组分析。结果发现,与非妊娠对照组相比,妊娠中期和后期胎盘分别有4333和4354个基因的表达出现显著变化,其中上调的基因分别有2328和2519个,下调的基因分别有2005和1835个;778个差异基因只存在于妊娠中期,757个差异基因只存在于妊娠后期。GO分析结果显示,妊娠中后期差异表达的基因主要在定位、生物粘附、细胞连接、生殖等过程。KEGG分析结果显示,妊娠中后期差异表达的基因在ECM-受体相互作用、细胞粘附分子、细胞周期、粘着斑、PI3KAkt信号通路、癌症的途径以及蛋白质的消化吸收等通路。与非妊娠奶牛相比,妊娠中后期胎盘基因存在明显的差异表达,其中PLET1、CSH1、SULT1E1、PRP1、LPAR2、CSF1R、PDCD1等基因表达明显上调,推测其可能参与奶牛的妊娠调控,在一定程度上影响着妊娠的发生。本研究结果为深入挖掘奶牛妊娠中后期的分子调控机制提供了理论基础。

子宫内膜癌组织中IGF2BP1mRNA,PEG10mRNA表达及与增殖基因表达的相关性和预后研究

目的研究子宫内膜癌(endometrial carcinoma,EC)组织中胰岛素样生长因子2 mRNA结合蛋白1(insulinlike growth factor 2 mRNA binding protein 1,IGF2BP1)mRNA,父系表达遗传印记基因10(patrilineal expression of genetic imprinting gene 10,PEG10)mRNA表达及与增殖基因表达的相关性及预后。方法选取2017年1月~2019年1月湖北理工学院附属妇幼保健院诊治的100例EC患者。实时荧光定量PCR检测EC癌组织和癌旁组织中IGF2BP1 mRNA,PEG10 mRNA及增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)mRNA,细胞周期素D1(cyclin D1)mRNA,细胞周期蛋白依赖激酶4(cyclin dependent kinase 4,CDK4)mRNA表达。免疫组织化学检测IGF2BP1,PEG10蛋白表达。相关性采用Pearson相关分析。Kaplan-Meier曲线分析不同IGF2BP1,PEG10表达组EC患者的预后差异。COX回归分析EC患者的预后影响因素。结果EC癌组织中IGF2BP1 mRNA(1.84±0.33),PEG10 mRNA(2.12±0.40),PCNA mRNA(3.14±0.42),cyclinD1 mRNA(2.81±0.36),CDK4 mRNA(2.37±0.34)高于癌旁组织(0.78±0.21,0.91±0.25,0.74±0.13,0.67±0.21,0.59±0.18),差异具有统计学意义(t=25.652~54.588,均P<0.05)。癌组织中IGF2BP1(70.00%),PEG10(72.00%)蛋白阳性率高于癌旁组织(100%,9.00%),差异具有统计学意义(χ^(2)=75.000,82.363,均P<0.05)。EC中IGF2BP1 mRNA,PEG10 mRNA表达与PCNA mRNA,cyclinD1 mRNA,CDK4 mRNA表达呈正相关(r=0.562~0.625,均P<0.05)。EC中IGF2BP1 mRNA与PEG10 mRNA表达呈显著正相关(r=0.663,P<0.05)。FIGO分期Ⅲ期、并发淋巴结转移EC癌组织中IGF2BP1(86.49%,87.50%),PEG10(89.19%,90.63%)阳性率高于FIGO分期Ⅰ~Ⅱ期(60.32%,61.90%)、无淋巴结转移(61.77%,63.24%),差异具有统计学意义(χ^(2)=6.863~8.608,均P<0.05)。IGF2BP1阳性组患者三年总体生存率70.00%(49/70)低于阴性组的90.00%(27/30);PEG10阳性组患者三年总体生存率为69.44%(50/72),低于阴性组的92.86%(26/28),差异具有统计学意义(Log-rankχ^(2)=4.133,5.491,P=0.042,0.019)。FIGO分期Ⅲ期(OR=1.449,95%CI:1.148~1.830)、并发淋巴结转移(OR=1.442,95%CI:1.124~1.850),IGF2BP1阳性(OR=1.637,95%CI:1.239~2.163)及PEG10阳性(OR=1.576,95%CI:1.136~1.187)是影响EC患者生存预后的独立危险因素(均P<0.05)。结论EC中IGF2BP1,PEG10表达升高,两者与增殖基因表达呈正相关,是EC预后评估的肿瘤标志物。

PRELID3B基因mRNA在不同品种乌骨鸡肌肉组织中的表达规律研究

PRELID3B基因(PRELIP Domain Containing 3B)是调控乌骨鸡黑色素沉积的重要候选基因。为探讨PRELID3BmRNA在不同品种乌骨鸡肌肉发育中的表达情况,以丝羽乌骨鸡和余干乌骨鸡为材料,采用实时荧光定量PCR技术,检测出雏后不同发育时期胸肌和腿肌中PRELID3BmRNA的表达情况,并将基因表达量与肌肉色度L值进行相关性分析。结果发现,2个品种胸肌和腿肌的肌肉色度L值都随日龄的增长呈逐渐下降的趋势;2周龄后,2个品种的胸肌和腿肌L值出现差异(P<0.05)。丝羽乌骨鸡胸肌和腿肌PRELID3B mRNA表达变化趋势基本一致,都是前高后低;余干乌骨鸡胸肌和腿肌PRELID3BmRNA表达变化趋势不一致,其中胸肌在10周龄之后呈升高的趋势。14周龄之后,2个品种的胸肌和腿肌PRELID3BmRNA表达都出现差异(P<0.05)。品种间比较,14周龄之后胸肌PRELID3BmRNA表达在品种间出现差异(P<0.05);腿肌则是在2周龄、6周龄和14周龄时品种间出现差异(P<0.05)。肌肉色度L值与基因表达的相关性结果显示,2个品种的腿肌色度L值都与基因表达量呈负相关(P<0.05)。结果提示PRELID3B基因mRNA表达在不同品种乌骨鸡腿肌中的变化规律基本一致,基因表达量与腿肌色度变化具有相关性,PRELID3B基因可能在调控乌骨鸡腿肌黑色素沉积方面具有重要作用。

大鼠孕期暴露DBP对子代睾丸mRNA差异表达的影响

目的探讨大鼠孕期暴露DBP对子代睾丸mRNA差异表达的影响。方法选取清洁级SD成年鼠,雌雄比例12交配,确定怀孕后行DBP染毒,试验组灌胃剂量为500 mg/kg,同时设置对照组,每组8只;试验组老鼠染毒至哺乳期结束,饲养子代雄鼠60 d,解剖取睾丸组织,采用二代高通量测序技术对睾丸样本进行基因差异表达分析及筛选,对差异表达基因进行GO富集分析和KEGG富集分析。结果差异表达的基因共有1421个,其中,上调基因722个,下调基因699个。筛选出的差异表达基因GO功能富集分析显示,生物过程(Biological Process BP)中,差异表达基因与老化、细胞增殖、炎症反应等密切相关;细胞成分(Cellular Component CC)中,差异表达基因主要富集在内质网膜、细胞膜等部分;分子功能(Molecular Function MF)中,差异表达基因主要与钙离子结合、趋化因子活性等密切相关。KEGG富集结果显示,孕期暴露DBP对子代雄鼠的影响集中分布在TNF信号传导途径、类固醇生成、细胞黏附分子(CAMs)、醛固酮合成和分泌等通路。结论大鼠孕期DBP暴露可致雄性子代睾丸mRNA差异表达,影响生殖系统的通路主要有TNF信号传导途径、类固醇生成、细胞黏附分子(CAMs)、醛固酮合成和分泌等。

基于mRNA-seq数据筛选Mn2+调控小鼠巨噬细胞的差异表达基因

目的对Mn^(2+)调控的小鼠巨噬细胞mRNA进行测序和生物信息学分析,筛选出差异表达的基因并分析其生物学功能,探究Mn^(2+)对小鼠巨噬细胞的调控作用。方法采用MnCl2和NaCl分别处理小鼠腹腔巨噬细胞24 h,利用m RNA-seq方法筛选出Mn^(2+)调控巨噬细胞的差异表达基因,对差异表达基因进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,并采用qPCR对关键的差异表达基因进行验证。结果通过整合数据库信息和分析获得1637个差异表达基因,包括表达上调的基因912个、表达下调的基因725个,GO富集分析表明这些差异表达基因具有免疫吞噬、细胞增殖和分化、转录因子调控等生物活性,KEGG通路主要富集在PI3K-Akt、NF-κB等信号通路。其中与免疫相关且差异最显著的10个基因为免疫球蛋白G Fc段受体Ⅰ(Fcgr1)、含不育α基序结构域蛋白11(Samd11)、活性调节的细胞骨架相关蛋白(Arc)、G蛋白偶联受体35(Gpr35)、富含脯氨酸的小蛋白2H(Sprr2h)、Wnt家族成员4(Wnt4)、整合膜蛋白2A(Itm^(2)a)、无调性bHLH转录因子8(Atoh8)、泛素结合酶E2C(Ube2c)及富含脯氨酸的小蛋白2B(Sprr2b),qPCR验证结果与mRNA测序分析趋势一致。结论通过mRNA-seq数据筛选Mn^(2+)调控小鼠巨噬细胞的差异表达基因及GO和KEGG富集分析结果表明Mn^(2+)对巨噬细胞具有免疫调节作用。

利用mRNA差别显示技术分析枸杞体细胞胚发生早期基因的差别表达

本研究选用枸杞体细胞胚发生体系中的继代愈伤组织（对照）、胚性愈伤组织和早期胚体为实验材料，提取细胞总ＲＮＡ，在１２种锚定真核生物ｍＲＮＡ３′末端的ＯｌｉｇｏｄＴ１２ＶＮ中，随机选用ＯｌｉｇｏｄＴ１２ＧＡ为引物合成了以上三种材料的ｃＤＮＡ第一链，以此ｃＤＮＡ为模板，用随机引物进行ＰＣＲ扩增，选择差别表达的片段。我们选用了ＯＰＡ、ＯＰＨ、ＯＰＫ和ＯＰＢ四组的６０个随机引物对所得的ｃＤＮＡ进行了ＰＣＲ扩增，得到了三个在体细胞胚发生早期组织中基因特异表达的片段。结果表明，在体细胞胚发生早期有胚胎发生特异性基因的表达，而且这种特异表达的基因在继代愈伤组织中没有表达。

电针刺激对心脏手术病人心肌热休克蛋白mRNA基因表达的影响

观察电针刺激对心脏手术病人心肌细胞热休克蛋白mRNA基因表达的影响。 2 8例ASD病人 ,随机分为针麻组 (组Ⅰ ,n =6 ) ,针刺加全麻组 (组Ⅱ ,n =10 ) ,和全麻组 (组Ⅲ ,n =9) ,于转流前 10min ,停转流 ,停转流 30min ,停转流 1h测定CK MB。结果 :① 3组病人停转流和转流后1hCK MB均较转流前明显增加 ,但组Ⅲ的升幅明显高于组Ⅰ和组Ⅱ ;②针刺组HSP70 mRNA表达高于对照组 (P <0 0 5)。因此针刺有增加缺血心肌细胞HSP70

胃癌癌前病变中医证候与凋亡相关癌基因mRNA表达的关系

【目的】 探讨胃癌癌前病变(PLGC)中医证候与bcl-2癌基因和p53抑癌基因mRNA表达的关系。【方法】经胃镜及病理证实为PLGC病例共40例,其中中度异型增生24例,重度异型增生9例,不完全性结肠化生7例;兼气滞证10例,兼胃热证12例,兼血瘀证18例。采用原位分子杂交的方法检测胃粘膜活检标本bcl-2癌基因和p53抑癌基因mRNA表达。【结果】本组PLGC中,bcl-2癌基因和p53抑癌基因在转录水平均有过度表达,并随病变的进展而表达逐渐增高。在不同的兼证中,bcl-2癌基因和p53抑癌基因mRNA的表达强度依次为兼气滞证<兼胃热证<兼血瘀证。【结论】bcl-2癌基因和p53抑癌基因在PLGC中有异常表达,其表达与不同兼证有关且可能有一定的证候特异性。

绵羊LPIN1基因的克隆和mRNA表达研究

本研究旨在克隆绵羊的LPIN1基因,分析其mRNA在2个不同脂尾型绵羊品种的7种脂肪组织中的发育性表达规律,以揭示该基因在绵羊脂肪代谢中的作用。利用RT-PCR技术克隆LPIN1基因,生物信息学方法分析Lipin1蛋白的理化性质和结构域;利用Real-time PCR技术检测广灵大尾羊和小尾寒羊2、4、6、8、10和12月龄共96个个体(每品种公、母各半)在大网膜、小网膜、肠系膜、腹膜后、皮下、肾周和尾部脂肪中的mRNA表达。结果表明,LPIN1基因CDS区长2 688bp,编码985个氨基酸。Lipin1是1种不稳定的亲水性蛋白,含有10个潜在的糖基化位点和88个磷酸化位点,但无跨膜域和信号肽。在其氨基酸序列的氨基端和羧基端各含有一段高度保守的序列,分别为Lipin-N和LNS2(Lipin/Ned1/Smp2)超家族特征序列。LPIN1mRNA在所研究的脂肪组织中都表达,其中肾周脂肪中表达最高,肠系膜脂肪中表达最低。品种、组织和月龄及其二阶互作对该基因的表达均有显著影响。LPIN1基因直接参与并间接调节脂肪代谢,对绵羊肉质性状的遗传改良具有重要意义。

不同毛色山羊皮肤组织Agouti基因mRNA及其编码ASIP差异表达研究

旨在探讨Agouti基因调控山羊毛色机制,采用SYBR Green real-time PCR和蛋白免疫印迹方法分别检测了不同毛色山羊皮肤组织中Agouti基因mRNA及其所编码ASIP蛋白的差异表达。结果表明,Agouti基因mRNA在白色、黑色、棕色山羊皮肤组织中的表达量依次为白色>黑色>棕色;mRNA表达量在棕色和白色、棕色和黑色山羊皮肤之间均存在显著差异(P<0.05),在白色和黑色山羊皮肤之间差异不显著(P>0.05)。ASIP在白色、黑色、棕色山羊皮肤组织中的表达量:白色>棕色>黑色;ASIP表达量在白色和黑色山羊皮肤组织之间存在显著差异(P<0.05),但在白色和棕色、棕色和黑色山羊皮肤组织之间差异均不显著(P>0.05)。研究结果提示,Agouti基因在不同毛色山羊皮肤组织中可能存在不同调控机制。

鹅Perilipin基因部分片段的克隆、不同品种及填饲对组织mRNA表达水平的影响

本研究旨在克隆鹅围脂滴蛋白(Perilipin)基因,并探讨填饲对其在四川白鹅和朗德鹅肝脏中表达的影响,为从脂滴角度研究鹅肥肝分子机理提供依据。试验选取12只朗德鹅和12只四川白鹅为研究对象,通过RT-PCR方法扩增鹅Perilipin基因部分序列,采用实时定量技术研究了该基因在皮脂、腹脂、肝脏等10个组织中的表达情况,最后检测填饲后两品种鹅肝脏总脂质含量、甘油三酯(TG)水平、肝质量以及Perilipin基因表达变化。结果表明:获得的鹅Perilipin基因序列与原鸡的同源性最高,与哺乳动物的同源性也达到70%以上;从组织表达上看,该基因主要表达于腹脂和皮脂,而在其他组织几乎不表达;填饲引起鹅肝脏Perilipin mRNA表达丰度的极显著增加(P<0.01),且与肝质量、肝内TG和总脂质呈显著正相关;此外,填饲导致其在朗德鹅肝脏中的表达丰度显著高于四川白鹅(P<0.05)。结果提示:填饲会引起Perilipin mRNA在鹅肝脏中表达丰度的极显著增加(P<0.01),且其增加幅度存在着品种间差异(P<0.05)。

乳酸锌对猪空肠上皮细胞IPEC-J2增殖及相关调控基因mRNA表达的影响

旨在探讨乳酸锌对猪空肠上皮细胞增殖及相关调控基因ZnT2、DMT1、IREG-1、MT1和ZIP4mRNA表达的影响。用乳酸锌的锌浓度分别为50、100、150、200mg.L-1的培养基培养IPEC-J2细胞,采用比色法测定分析细胞增殖变化;用实时荧光定量RT-PCR方法检测ZnT2、DMT1、IREG-1、MT1及ZIP4mRNA表达,以TBPmRNA的表达水平作为内参对照。在细胞培养前36h,乳酸锌对IPEC-J2细胞基本没有影响,随锌浓度递增细胞增殖幅度升高;乳酸锌处理IPEC-J2细胞后,ZnT2、DMT1、IREG-1及MT1mRNA表达随锌浓度增高而升高,ZIP4mRNA表达则随锌浓度增高而降低。添加乳酸锌可以促进IPEC-J2细胞增殖,上调ZnT2、DMT1、IREG-1、MT1mRNA表达,下调ZIP4mRNA表达。

黑鲷♀×真鲷♂反交子代与黑鲷的CaM基因克隆与mRNA表达分析

为分析黑鲷♀×真鲷♂(Acanthopagrus schlegelii♀×Pagrosomus major♂)反交子代在生长、发育等经济性状优于黑鲷亲本(A.schlegelii)的分子遗传差异,本研究克隆了反交子代(PA)与黑鲷(As)的Ca M基因,运用生物信息学方法对基因PACa M与As Ca M的序列进行了详细分析;同时通过荧光定量分析了PACa M与As Ca M在仔鱼及2龄成鱼不同组织的表达特征。研究结果表明,PACa M基因c DNA全长1180 bp,As Ca M基因c DNA全长1241 bp,均具有一个450 bp的开放阅读框,编码149个氨基酸,分子量约16.84 k D,等电点为4.09;序列比对、结构比较等分析表明,PACa M和As Ca M属Ca M基因家族,具有4个EF-hand钙结合功能域。定量分析表明Ca M在两种鱼的仔鱼及成鱼的脑与性腺中有较高表达;PACa M和As Ca M在仔鱼及成鱼的鳃、肌肉及性腺中的表达存在显著差异(P<0.05),在脑、肝及肾中的表达没有明显差异(P>0.05);PACa M在仔鱼中表达量最高,As Ca M在成鱼性腺中表达最高,均显示了Ca M基因在生长与繁殖中的重要作用。研究结果为鲷科属间杂交获得的子代与亲本性状差异的功能基因表达提供一些基础资料。

绵羊RARG基因在发情不同阶段卵巢中的mRNA表达

【目的】分离鉴定绵羊视黄酸受体-γ(Retinoic acid receptor gamma,RARG)基因,分析该基因的分子特征,研究其在发情周期不同阶段卵巢中的表达差异。【方法】选取年龄和体况相近、健康的甘肃高山细毛羊周岁母羊8只,通过同期发情处理,根据卵巢生理状态,将其分为两组:黄体期组和卵泡期组,各4只,屠宰后,采集卵巢组织,以周岁母羊卵巢组织RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增绵羊RARG基因并克隆到pMD18-T载体中进行测序验证。利用ORF Finder和DNAStar等生物信息学软件分析绵羊RARG基因的理化性质、同源性和预测结构域和功能。利用Q-PCR技术,检测绵羊RARG基因在母羊发情周期不同阶段卵巢组织中的相对表达量,用SPSS19.0软件进行差异显著性分析,探讨RARG基因对绵羊发情周期的调控机制。【结果】获得了绵羊RARG基因包含完整编码区序列在内的1 588 bp的绵羊RARG基因序列,并提交至NCBI,GenBank登录号为KF019682。该序列含有1个1 377 bp的完整开放阅读框(Open reading frame,ORF),编码458个氨基酸,其蛋白分子质量为50 955.8 D,理论等电点为7.45。绵羊RARG基因与牛、普通狨、家犬、仓鼠、家猫、人、小鼠、虎鲸、狒、家鼠、野猪、海牛、海豚和蟾蜍等14个物种的同源性分析,结果显示RARG基因在上述物种间高度保守,且与牛的亲缘关系较近,序列同源性最高。GO功能分析结果显示,绵羊RARG基因作为结构蛋白参与转录调控的几率最高,分别为0.272和0.223。在绵羊RARG基因编码的氨基酸序列上发现了2个功能结构域,分别是核激素受体c4锌指结构域(c4 zinc finger in nuclear hormone receptors,ZnF_C4)和激素受体配体结构域(ligand binding domain of hormone receptors,HOLI)。Q-PCR结果显示,绵羊RARG mRNA在甘肃高山细毛羊卵泡期卵巢中的相对表达量显著高于黄体期(P<0.05)。【结论】绵羊RARG基因在物种间高度保守,含有ZnF_C4和HOLI等2个与转录调控相关的功能结构域,推测该基因可能作为一种重要的转录因子参与母羊发情周期调控。

中华稻蝗几丁质合成酶1基因的mRNA表达及功能

【目的】研究中华稻蝗(Oxya chinensis(Thunberg))几丁质合成酶1(CHS1)基因的表达特性及其在生长发育过程中的作用,从而为实现基于RNAi的蝗虫有效控制提供理论依据。【方法】根据已知中华稻蝗几丁质合成酶1基因(OcCHS1)保守区域部分cDNA序列(GenBank登录号:HM214491)设计特异性表达引物,运用RT-PCR和qPCR研究时空表达特性;采用RNA干扰技术研究其生物学功能。【结果】OcCHS1在中华稻蝗各龄期都有表达,其体表为高表达,其次是气管,其它组织部位表达量低。RNA干扰试验发现,4龄第4天若虫注射OcCHS1的双链RNA(dsRNA)后,与对照组相比,OcCHS1 mRNA表达量被沉默了70.8%,稻蝗出现蜕皮时间延迟、不能完成蜕皮或腹部皱缩死亡等现象,注射dsOcCHS1组死亡率为85.2%,与对照组(7.4%)相比差异显著。【结论】几丁质合成酶1对中华稻蝗的生长发育具有重要作用,其主要参与体表和气管几丁质的合成。采用RNA干扰技术使该基因沉默后可导致中华稻蝗死亡。

茶树β-葡萄糖苷酶基因mRNA的表达

采用原位杂交技术对茶树β葡萄糖苷酶基因mRNA的表达进行了研究。结果表明,β葡萄糖苷酶基因mRNA主要在茶树叶片栅栏组织、叶主脉的薄壁组织表达;不同品种之间的表达位置基本相似,但表达信号却有差异,以龙井43号最强,福鼎大白茶、槠叶齐次之,而大叶乌龙、迎霜最弱。结果还显示,不同季节的表达信号以春梢最强,秋梢次之,夏梢最弱。

茶树咖啡碱合成酶基因mRNA表达的研究

采用原位杂交技术对茶树咖啡碱合成酶基因mRNA的表达进行了研究。结果表明,茶树叶片的表达主要在栅栏组织,该组织的细胞质、细胞核上均有表达,而液泡却没有;叶主脉表达分布在薄壁组织、韧皮部,但韧皮部表达稍弱;幼茎表达分布在韧皮部;不同品种之间的表达位置基本相似、表达信号却有差异。结果还显示,春梢第一片叶比秋梢第一片叶表达信号强;加工技术上绿茶摊青过程0.5 h、1 h、2 h有明显表达信号,而红茶萎凋6 h、8 h、10 h及乌龙茶摇青过程6 h、8 h、10 h的叶子则看不到。

消痰散结方对胃癌组织中癌基因ras及cerbB_2在mRNA水平表达的影响

目的:探讨消痰散结方对胃癌组织中ras及cerbB_2癌基因在mRNA水平表达的影响。方法:用40只BALB/c无胸腺裸鼠,建立人胃腺癌SGC—7901原位移植模型,建模次日随机分为对照组、化疗组、中药组、中药加化疗组,分别给予生理盐(?)5—氟脲嘧啶(5-Fu)、消痰散结方及5-Fu加消痰散结方,共给药3周,12周左右拉颈处死。应用RT-PCR法检测各组胃癌组织中ras及cerbB_2表达情况。结果:各组移植瘤组织ras/β-肌动蛋白(β-actin)值及cerbB_2/β-actin值与对照组相比,均有显著性差异(P<0.01),且中药组作用优于化疗组,有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。结论:消痰散结方对SGC-7901胃癌组织中ras及cerbB_2癌基因在mRNA水平表达有明显下调作用,这可能是消痰散结方抑瘤抗转移作用机理的一个重要环节。

碘对大鼠甲状腺细胞凋亡及bax、bcl-2基因mRNA表达的影响

目的探讨碘对甲状腺细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响。方法Wistar大鼠分为6组,即低碘组(LI)、正常碘组(NI)、5倍碘组(5HI)、10倍碘组(10HI)、50倍碘组(50HI)、100倍碘组(100HI),用含不同碘的自来水喂养,6个月后取甲状腺。末端标记法(TUNEL)进行原位细胞凋亡检测,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法对甲状腺细胞凋亡相关基因bax、bcl-2进行半定量测定。结果原位细胞凋亡检测结果表明,LI组细胞凋亡明显,而NI组与其他组均未见凋亡细胞。baxmRNA表达水平以bax/β-actin光密度比表示,LI组为1.096±0.089,NI组为0.647±0.062,5HI组为0.638±0.191,10HI组为0.676±0.081,50HI组为0.644±0.092,100HI组为0.751±0.152;同样方法表示,bcl-2mRNA表达水平分别为0.273±0.185、0.172±0.115、0.236±0.107、0.235±0.071、0.267±0.065、0.313±0.062。结果表明,在LI组大鼠甲状腺bax、bcl-2mRNA表达水平均明显增加(P<0.05);在其他组,bcl-2mRNA表达水平随给碘量增加而增加,而bax无明显变化。但bax/bcl-2比值随摄入碘量增加而呈降低趋势。结论碘缺乏易诱发大鼠甲状腺细胞凋亡;而碘过量不易引起细胞凋亡,甲状腺细胞对碘过量有一定耐受能力。bcl-2家族参与甲状腺细胞凋亡过程。