Iodogen法^(125)I标记单克隆抗体10D9

采用Iodogen法,选择最佳标记条件进行125I标记单克隆抗体10D9。标记产物用SephadexG-50分离纯化,三氯醋酸(TCA)法测定标记率和放化纯,并对标记物的免疫活性及稳定性进行分析。结果显示,125I标记10D9的最佳条件为Iodogen用量10μg、10D9用量20μg、加入Na125I22.2MBq、室温反应8min,125I-10D9的标记率为(84.10±3.18)%,放化纯为(98.49±1.14)%,比活度为933.51MBq/mg;125I-10D9与Daudi细胞的特异性结合率为(23.21±1.14)%;标记物加到含1%BSA的PBS中放置3W后放化纯度仍>90%。结果表明:Iodogen法125I标记10D9标记率和放化纯高,方法简便,标记物的稳定性好且能较好地保持其免疫活性。

Iodogen法^(125)I标记重组人粒细胞集落刺激因子的研究

采用Iodogen(四氯二苯基苷脲 )法进行12 5 I标记重组人粒细胞集落刺激因子 (rhG CSF) ,标记物用SephadexG 2 5柱凝胶过滤法分离、纯化 ,用薄层层析法和三氯醋酸法鉴定标记物的放射化学纯度、游离碘率及碘标记率和标记物的稳定性。结果标记物的放化纯度为 97.8% ,碘标记率为 78.4% ,比活度为 86.3 4TBq/mmol。用Iodogen法12 5 I标记rhG CSF ,方法简便、标记率高。

^(125)I标记SOD氯胺T法和Iodogen法的条件研究

一、前言超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,简称SOD)具有清除过氧自由基的功能,因而可减轻生物的辐射损伤。此外,SOD还有抗氧化、抗炎症和抗衰老的作用,已在临床上得到应用,因而近年来对它的研究受到了普遍重视。

纤维蛋白原Iodogen法^(125)I标记的研究

本文探讨了纤维蛋白原 (FG)的Iodogen法12 5I标记技术。先用不同量的Iodogen作用于一定量的12 5I和FG ,根据产物标记率和活性率 ,选择Iodogen单次用量为FG的 1% ;用此量再进行多步重复标记 ,得出最佳重复次数为 5次 ,得产物标记率 95.2 % ,活性率 87.4 %。提示12

Iodogen法标记磁共振单克隆抗体靶向对比剂的实验研究

目的 探讨Iodogen法13 1I标记磁共振单克隆抗体靶向对比剂McAb PMP的方法。方法 采用Iodogen法13 1I标记McAb PMP ,并测定标记率、放化纯度、比活度和免疫活性 ,进行动物免疫显像 ;结果 标记率为 89 7% ,放化纯度为 3 16mCi/ml。经RM90 5活度计测定的比活度为 89 6μCi/ μg。在注射13 1I McAb PMP后 ,在结肠癌裸鼠动物模型显像时 ,2 4h出现特异性聚集 ,48h和 168h仍然保持聚集。结论 13 1I McAb PMP在Iodogen碘化标记后能较好地保持其免疫活性 ,特异性聚集在肿瘤部位 ,提示McAb

^（125）IIodogen法标记抗HCG多克隆抗体

１２５ＩＩｏｄｏｇｅｎ法标记抗ＨＣＧ多克隆抗体刘标常国钧刘嘉菌＊刘功节＊（南京医科大学第一附属医院核医学科，＊妇产科，南京２１００２９）关键词抗ＨＣＧ多克隆抗体；标记率；１２５Ｉ；Ｉｏｄｏｇｅｎ；放射免疫显像放射免疫显像（ＲＩＩ）对肿瘤的阳性定位诊断...

Iodogen法碘化标记大鼠PRL

目前在碘化标记蛋白质及多肽的方法中,Iodogen 法是一种较好的方法.此法优于其它标记方法的最大特点是能够更好地保持被标记蛋白质的免疫活性。但目前国内尚无报道用 Iodogen 法标记 PRL,本文报道了Ionggen 法对大鼠 PRL 的标记结果。

Iodogen法制备[^(125)I]-心得静

采用Iodogen法制备[^(125)]-心得静,结果提示此标记法具有操作简便、标记率高(91.50±4.52％)等特点,优于目前采用的氯胺T法。制备的[^(125)I]-心得静与大白鼠肺组织膜蛋白的结合具有饱和性、特异性和可逆性,符合配基与受体结合的规律。

Iodogen法碘标记McAb技术探讨

我们用Iodogen法标记McAb,体会到要想获得满意的标记效果,应控制好投料、pH、掌握反应时间及贮存时间几个环节。 材料和方法 一、材料: (一)Iodogen:化学名称为1,3,4,6—四氯,3α6α-二苯甘脲,分子量430,美国piere化学公司产品。用二氯甲烷(Sigma公司)溶解,分别配成50μl含3μg,5μg,10μg,25μg,50μg及100μg的浓度,取50μl涂布于2ml玻璃小瓶底部,用氮气轻轻吹干,当即盖上胶盖、封口,-20℃冻存备用。 (二)McAb BAC5:取液氮中冻存的杂交瘤细胞BAC5,复苏后培养至对数生长期,注射3.5×10~5个细胞/0.5ml至6～8周龄的BALB/c经产母鼠腹腔,10～14天后收集腹水。纯化腹水得纯度为93％的抗低分化鼻咽癌单抗BAC5,属IgG2a亚类,亲和力常数(Ka)值为8×10~9L·M^(-1),分子量149KD。 (二)无载体Na^(125)J,中国北京原子能中、研究院提。

Iodogen法^(125)I标记CD28单克隆抗体2F5的方法

目前放射性核素125碘（125I）标记技术已广泛应用于分子生物学、免疫学等基础医学研究及相关临床领域,但关于单抗2F5的放射性核素标记国内外尚未见报道,本文利用Iodogen法标记单抗2F5,对标记产物的生物学活性及体外稳定性进行探索,为不同放射性碘（123I、125I、131I）标记单抗2F5以及建立放射免疫显像和靶向治疗方法提供实验依据.

Iodogen法用于蛋白质的^（125）I标记──介绍一种高标记方法

本文报道了一种应用Ｉｅｄｏｇｅｎ法进行蛋白质的１２５Ｉ标记方法，该方法具有操作方便、１２５Ｉ利用率高、分离蛋白快速等优点。利用固相免疫放射分析法，对该法标记的１２５Ｉ－驴抗兔ＩｇＧ抗体活性进行分析，其抗体结合力和效价均明显高于氯胺Ｔ法标记的抗体，上述结果提示，Ｉｏｄｏｇｅｎ法更适合于蛋白质的１２５Ｉ标记。

^(131)ⅠIodogen标记法实验中放射安全性的研究

目的评价^(131)ⅠIodogen标记法实验中操作者的安全性。方法运用Iodogen法对Herceptin进行^(131)Ⅰ标记,记录实验操作时间。测量实验条件下,离放射源不同距离处的剂量率及操作者各要害器官的辐射剂量。结果实验全过程用时135 mn。药物在Iodogen管中的反应时间为15min,在Sephadex柱中淋洗的总时间为96min,各管淋洗液放射性计数的测量时间为24min。在放射性最大的时间段内,距离Sephadex柱0 cm、5 cm、36 cm、238 cm的剂量率分别为140、85、40、0.52μSv/h。经防护后实验者眼晶体、颈部、躯干所受当量剂量分别为12.99、0.68、0.6μSv/h。双手操作范围内当量剂量范围为140～129μSv/h。结论在实验过程中,采取严格防护措施,^(131)Ⅰ对实验者的辐射剂量在规定范围内,该实验过程安全。

IODOGEN法制备^(131)I-Herceptin操作者辐射安全性研究

目的评价IODOGEN法标记131I-Herceptin整个制备过程(从预实验到实验结束)操作者辐射防护的安全性。方法应用IODOGEN法标记131I-Herceptin,在131I-Herceptin制备过程中,操作者采取辐射防护措施,在辐射防护屏障内操作者人体重要器官相应体表部位放置热释光剂量计,测量制备过程人体不同部位接受辐射剂量。读取热释光剂量计的相应数据,对操作者人体各部位采取辐射防护后所接受辐射量进一步计算评估,评价制备过程,操作者的辐射安全性。结果人体各部位所受辐射的当量剂量为:眼部1.01mSv、颈部1.00mSv、心脏1.02mSv、上臂1.02mSv、前臂1.10mSv、手部1.35mSv、腰部1.00mSv。按照人体质量比例换算,操作者人体接受有效剂量小于0.62mSv;眼部当量剂量为1.01mSv,皮肤当量剂量最大为1.19mSv/cm2。结论热释光剂量仪测量证实,131 I-Herceptin制备过程操作者人体及各重要器官所接受辐射量小于《电离辐射防护与辐射源安全基本标准》规定的职业人员年有效剂量,该过程操作者是安全的。

^(125)I标记重组人血小板生成素大鼠静脉注射后药动学参数

本文目的是建立125I标记重组人血小板生成素(125I-rhTPO)的分析方法并研究大鼠单剂量静脉注射125I-rhTPO后的药动学特性。以Iodogen法制备I-rhTPO,HPLC法及SDS-PAGE法鉴定并测定放化纯度。125大鼠按2μg·kg-1剂量经尾静脉给药,于不同时相取血测放射性计数,并计算相应的血药浓度及药动学参数。制备的I-rhTPO符合药动学研究要求,标记前后化合物所在电泳位置一致,放化纯度>98%,4℃100h后125放化纯度仍大于95%。尾静脉注射2μg·kg-1,在大鼠体内可以二室模型拟合血药浓度的动态变化,T1/2(α)为(1.32±0.35)h,T1/2(为(24.55±1.07)h,AUC0β)→t为(134.26±22.99)ng·h·mL-1。Iodogen法制备125I-rhTPO,经SDS-PAGE检验,标记后的I-rhTPO与rhTPO的纯度、分子量相当,且I-rhTPO在体外稳定性较好。尾125125静脉注射2μg·kg-1,在大鼠体内可以二室模型拟合,半衰期约为25h。

^(125)I-WH16制备及与HepG2人肝癌细胞结合特性研究

目的 研究高比活度亲肝癌肽1 2 5I WH16的制备及其与HepG2人肝癌细胞的体外结合特性。方法 采用Iodogen法碘标记WH16 ,用高效液相色谱法分离纯化并鉴定标记产物。①将1 2 5I WH16与HepG2细胞进行体外细胞量 (或保温时间 ) 计数实验 ,以得到较佳的体外结合条件 ;②比较HepG2与正常肝细胞 (L0 2 )的1 2 5I WH16平均结合计数 ,以检验其特异性 ;③1 2 5I WH16与HepG2细胞进行体外饱和结合实验 ,研究其亲和特性。结果 ①1 2 5I标记率 5 0 % ,1 2 5I WH16比活度 8 2 1× 10 1 5Bq mol,放化纯 95 % ,放射性浓度 6 6 4× 10 9Bq/L ,- 2 0℃保存 2 4h后放化纯仍为 95 %。②1 2 5I WH16与HepG2细胞结合具有细胞依赖性 ,较佳保温时间为 3h;相同条件下 ,1 2 5I WH16与HepG2细胞、L0 2细胞之间平均特异性结合计数有明显差异 ;1 2 5I WH16与HepG2细胞结合具有可饱和性 ,Scatchard作图提示HepG2细胞仅含一种WH16受体 ,Kd 为 (1 4 2± 0 2 8)nmol L ,Bmax为 (12 15± 0 6 3)pmol L ;Hill系数为1 0 3,接近于 1。结论 WH16的放射性标记物在肝癌显像及生物靶向治疗中可能有潜在的应用前景。

^(131)I标记多肽K237的最佳条件及标记肽的体外生物活性

目的探索131I标记多肽K237,获得放射化学纯度高于95%的131I-K237的最佳条件,研究标记产物的体外稳定性及生物学活性。方法应用Iodogen法对K237进行131I标记,采用正交实验筛选最佳标记条件。用高效液相色谱仪(HPLC)联合薄层层析法(TLC)测定标记率及放射化学纯度,SephadexG25层析柱分离纯化131I-K237。将分离纯化的131I-K237(放射化学纯度大于95%)分别放置于室温及37℃水浴箱,于不同时间测定其放射化学纯度以观察其稳定性。应用cck-8法进行人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖抑制实验,分别计算K237及131I-K237对HUVEC的抑制率,判定131I-K237的生物活性。结果最佳标记条件中,K237100μg与Iodogen 50μg,在37℃条件下反应时间40 min,标记率可达70%以上。稳定性实验结果表明,131I-K237在体外放置24 h后,其放射化学纯度>90%。131I-K237和K237对HUVEC细胞增殖的抑制率差异无统计学意义(P>0.05),说明K237被131I标记后,其生物学活性未改变。结论 Iodogen法131I标记多肽K237简单高效,标记产物的生物活性得到保留,未受明显破坏。

高效简便的人低密度脂蛋白^(125)Ⅰ标记法

采用固相氧化剂Iodogen法对人血清低密度脂蛋白（LDL）进行125Ⅰ碘化标记，并用荧光扫描法观测氧化剂的脂质过氧化作用．结果：125Ⅰ-LDL的比放射性为5.8×10-4μCi／ngLDL，脂质标记率＜1％，游离125Ⅰ含量＜1，125Ⅰ－LDL浓度为0．3～0．6mg／ml；荧光扫描法证实无脂质过氧化发生，符合用于脂蛋白代谢研究的要求。本法与一氯化碘法比较，比放射性高，操作简单，无特殊技术要求，适于进行脂蛋白受体的研究。

131I标记适配子的优化研究及其稳定性的评价

目的探讨用氯氨T法和Iodogen法进行适配子的131I标记的可行性及标记产物在不同条件下的稳定性。方法用氯氨T法和Iodogen法分别对适配子进行131I的标记,用纸层析法测定2种方法不同反应时间的标记率,测定标记产物在不同条件下的稳定性。结果2种方法在反应时间为1 min时的标记率分别为(94.11±0.30)%和(94.01±0.07)%,比较差异无统计学意义(P>0.05);置于4℃与室温24 h后,标记产物在磷酸盐缓冲液(PBS)、无血清培养基、含10%血清培养基、纯血清中的放射性化学纯度分别为(97.46±0.77)%、(94.76±1.57)%、(85.18±2.27)%、(67.96±1.91)%与(95.78±1.98)%、(56.11±4.06)%、(23.96±3.76)%、(9.45±1.75)%,除PBS介质外,标记产物在4℃条件与室温条件下的放射性化学纯度均有差异(P均<0.001);2种温度条件下标记产物在无血清培养基与含10%血清培养基中的放射性化学纯度均有差异(P均<0.001)。结论氯氨T法和Iodogen法均可高效标记适配子,标记产物在低温及无血清条件中稳定性更好。

^(125)Ⅰ标记抗MIF单克隆抗体制备及其生物学活性的研究

目的:建立125Ⅰ标记抗巨噬细胞移动抑制因子(MIF)单克隆抗体(mAb)方法,探讨其在体内外生物学活性。方法:①利用Iodogen法,Na125Ⅰ标记Anti-mMIF mAb,用Sephadex G-25柱凝胶过滤层析法分离纯化,测定其标记率。纸层析法测定放射化学纯度和稳定性。②采用ELISA和改良MMI鉴定其免疫活性及生物学活性。③观察小鼠体内的生物学分布情况。结果:①标记的最佳条件为Iodogen 40~100μg、抗体20~50μg[Iodogen(m)∶抗体(m)=2∶1],加入Na125I15~30 MBq、室温反应10~15 min,标记率为(90.40±3.34)%,放射化学纯度为(97.60±1.14)%,比活度为12.2~26.0 MBq/μg;标记物4℃条件下放置3周后放射化学纯度仍为90.36%。②125Ⅰ-mMIF mAb能与抗原MIF特异性结合,较好地保持其免疫活性及生物学活性。③体内生物学分布,在肺、肝、脾、肾内具有较高的放射性计数。结论:Iodogen法获得高标记率和放射化学纯度的125Ⅰ-mMIF mAb,具有很好的体外稳定性,其在体内外保持较好的生物学活性。为进一步应用125I-mMIF mAb进行放射免疫显像和靶向治疗奠定了实验基础。