IQ结构域三磷酸鸟苷酶激活蛋白1的表达对甲状腺癌细胞增殖和侵袭的影响

目的观察IQ结构域三磷酸鸟苷（GTP）酶激活蛋白1（IQGAP1）在甲状腺癌细胞增殖和侵袭中的作用。方法通过Westernblot对IQGAP1在甲状腺癌细胞中的表达进行分析，然后敲低IQGAP1表达后检测17β-雌二醇（E2）条件下雌激素受体仅（ERa）的转录活性，以及细胞增殖和细胞迁徙。结果甲状腺癌细胞内IQGAP1表达明显上调，为正常细胞的5．0倍（P〈0．05）。敲低IQGAP1表达后甲状腺癌细胞增殖能力明显降低，24h增殖率为79．27％，48h为57．49％，72h为55．14％（P〈0．05），细胞迁徙率明显减低（细胞浸润数从115个降至45个），E2条件下ERa的转录活性显著下调（1．45降至0．28，P〈0．05）。敲低ERa可阻断IQGAP1过表达引起的磷酸化细胞外信号调节激酶1／2（p-ERK1／2）和细胞周期蛋白D1（CyclinD1）蛋白表达上调（相对值分别从1．95降至0．40，1．75降至0．35，P〈0．05）。结论IQGAP1可与ERa相互作用，调节甲状腺癌进展过程中ERa的转录活性，影响甲状腺癌细胞的增殖和侵袭。

微小RNA-124调控靶基因IQ结构域三磷酸鸟苷合酶-激活蛋白1的表达抑制甲状腺乳头状癌细胞生长、侵袭、转移的研究

目的检测微小RNA（miRNA，miR）-124在甲状腺乳头状癌（PTC）组织中的表达，探讨miR-124在PTC发生发展、侵袭转移中的相关功能机制，验证IQ结构域三磷酸鸟苷合酶-激活蛋白1（IQGAP1）为miR-124的靶基因。方法收集手术切除并经病理检查确诊的不同病理学背景的甲状腺组织。检测miR-124在上述组织中的表达。选取3个PTC细胞株及正常甲状腺细胞株检测miR-124的表达差异。将人类miR-124模拟物（Has—miR-124 mimics）转染入K1细胞，检测转染后miR-124的表达。同时检测下游靶基因IQGPAl的表达；噻唑蓝（MTr）法、划痕实验、Transwell法、流式细胞学检测细胞生物学活性变化。运用生物信息学预测IQGAPl为miR-124的可能的下游靶基因并用双荧光素酶报告基因系统验证。结果有转移PTC淋巴结转移灶中miR-124的相对表达量为1．120±0．104，低于转移PTC原发灶、无转移PTC、正常甲状腺组织中miR-124的表达量（P〈0．05）。PTC细胞株中miR-124的表达也较正常甲状腺细胞株明显降低（P〈0．05）。miR-124 mimics转染K1后检测证实miR-124被成功增强。K1细胞中miR-124表达增强后24～72h后活细胞数目明显少于对照组（P〈0．05）。迁徙能力为对照组的50％，侵袭能力为对照组的40％（P〈0．05）。细胞增殖指数降低，凋亡增加（P〈0．05）。用生物信息学方法预测IQGAPl为miR-124的可能靶基因。证实miR．124增强后IQGAP]的表达量有不同程度地降低。证实了IQGAPl为miR-124的下游靶基因。结论miR-124在PTC及PTC细胞株中低表达。miR-124表达增强后，K1细胞的迁徙侵袭、增殖能力降低，凋亡增加。生物信息学预测，IQGAP1为miR-124的靶基因。miR-124表达增强后，K1细胞中的IQGAP1表达降低。

沉默含IQ结构域的三磷酸鸟苷激酶活化蛋白1可提高食管鳞状细胞癌细胞对顺铂的敏感性

研究发现具有IQ结构域的GTP激酶活化蛋白1（IQGAP1）过表达与食管鳞状细胞癌的侵袭转移密切相关。

宫颈癌组织中RACK1、IQGAP1表达及与患者临床病理特征和β-连环蛋白相关性

目的:分析宫颈癌组织中激活的白激酶C受体1(RACK1)、IQ序列三磷酸鸟苷酶激活蛋白(IQGAPl)表达及与临床病理特征和β-连环蛋白(β-catenin)的相关性。方法:收集2018年1月-2020年12月本院行宫颈癌手术治疗的患者106例临床资料,采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)和免疫组化技术检测RACK1、IQGAP1、β-catenin mRNA和蛋白表达,分析宫颈癌组织中RACK1、IQGAP1表达及与临床病理特征和β-catenin的相关性。结果:宫颈癌组织中RACK1 mRNA的相对表达量(0.27±0.11)低于癌旁组织(0.75±0.19),IQGAP1 mRNA(0.65±0.18)、β-catenin mRNA(0.61±0.21)高于癌旁组织(0.22±0.13、0.32±0.17),RACK1蛋白阳性率(18.9%)低于癌旁组织(63.2%),IQGAP1(76.4%)、β-catenin(68.9%)蛋白阳性率高于癌旁组织(28.3%、31.1%)(均P<0.05)。RACK1在高分化、TNM分期为I期、无淋巴结转移的宫颈癌组织中阳性率高于中低分化、TNM分期为II-III期、有淋巴结转移患者的组织,IQGAP1在中低分化、TNM分期为II-III期的宫颈癌组织中阳性率高于高分化、TNM分期为I期组织(均P<0.05)。宫颈癌中RACK1表达与β-catenin呈负相关(r=-0.405,P<0.05),IQGAP1表达与β-catenin呈显著正相关(r=0.346,P<0.05)。结论:宫颈癌组织RACK1低表达,IQGAP1高表达;RACK1蛋白表达异常可能与患者宫颈癌分化程度、TNM分期、淋巴结转移及β-catenin表达有关,IQGAP1蛋白表达异常可能与分化程度、TNM分期及β-catenin表达有关。

电针对局灶性脑缺血再灌注大鼠皮质Slit-Robo三磷酸鸟苷酶激活蛋白-1和细胞分裂周期蛋白42表达的影响

目的:观察电针对大脑中动脉闭塞(MCAO)模型大鼠皮质Slit-Robo三磷酸鸟苷酶激活蛋白-1(Slit-Robo GTPase-activating protein-1,srGAP 1)和细胞分裂周期蛋白42(cell division-cycle 42,Cdc 42)表达的影响,探讨srGAP 1和Cdc 42在电针治疗MCAO后神经恢复中的作用。方法:雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、非经穴组和电针组,每组12只。利用改进的Longa法复制MCAO模型。电针组取"曲池""足三里"穴,非经穴组取手足阳明经与少阳经之间非经穴处,每日1次,每次30min,共14d。分别在术后1、3、7、14d时间点对各组大鼠进行神经功能评分(mNSS),并利用免疫荧光法检测缺血侧大脑皮质中srGAP 1和Cdc 42的荧光强度及分布,用免疫印迹(Western blot)法检测大鼠梗死区周围大脑皮质中srGAP1和Cdc 42蛋白表达。结果:神经功能评分显示,在术后7、14d时电针组较模型组、非经穴组同时间段的mNSS评分显著降低(P<0.01)。免疫荧光检测结果显示,srGAP 1和Cdc 42主要在细胞质表达;模型组srGAP 1高于正常组(P<0.01),而电针组显著低于模型组和非经穴组(P<0.01);模型组Cdc 42显著低于正常组(P<0.01),而电针组明显高于模型组和非经穴组(P<0.01)。Western blot检测结果显示,模型组srGAP 1蛋白表达量较正常组明显升高(P<0.01),电针组srGAP 1蛋白表达显著低于模型组及非经穴组(P<0.01);模型组Cdc 42蛋白表达量与正常组的差异无统计学意义(P>0.05),而电针组Cdc 42蛋白表达显著高于模型组和非经穴组(P<0.01)。结论:局灶性脑缺血再灌注后大鼠脑损区周围皮质srGAP 1明显增高,而Cdc 42明显减少,这可能与srGAP 1使Cdc 42失活有关;电针治疗后srGAP 1显著下调,而Cdc42上调,可能是电针促进脑梗死后神经功能恢复的机制之一。

IQGAP1对甲醛致小鼠气道上皮损伤修复作用

目的探讨包含IQ序列的三磷酸鸟苷酶(GTP)激活蛋白1(IQGAP1)和细胞分裂周期42蛋白(Cdc42)在气道上皮细胞损伤修复不同阶段的作用。方法选用健康昆明种小鼠24只,5 mg/m3气态甲醛,染毒4 h/d,分别染毒3,7和60 d后处死,采用免疫组织化学染色、蛋白印迹(Western blot)检测和免疫荧光共聚焦成像方法,观察IQ-GAP1和Cdc42蛋白在染毒小鼠气道上皮细胞损伤修复过程中的表达和定位变化。结果IQGAP1在染毒3和7 d时表达明显增强(P<0.01),60 d时恢复至对照组水平;Cdc42蛋白在染毒3 d时表达明显减弱(P<0.01),7 d时表达有所恢复。对照组中IQGAP1主要定位于气道上皮细胞的胞膜处,而Cdc42蛋白弥散分布于气道上皮细胞(AECs)胞质中;3 d和7 d时共同定位于细胞极化前缘;60 d时其定位与对照组相似。结论Cdc42蛋白和IQGAP1在气道上皮细胞损伤修复过程中的表达及定位呈动态变化,提示其在这一过程中发挥着重要作用。

下调IQGAP1对胰腺癌细胞增殖、凋亡的影响及作用机制

目的分析下调IQ结构域三磷酸鸟苷酶激活蛋白(IQGAP)1对胰腺癌细胞增殖、凋亡的影响及作用机制。方法人胰腺癌HPAF-Ⅱ细胞分为对照组、过表达组、沉默组。对照组不做任何处理,过表达组为人胰腺癌细胞做IQGAP1过表达质粒转染,沉默组为人胰腺癌细胞做IQGAP1沉默质粒转染。鉴定IQGAP1转染效率,分析沉默IQGAP1基因对胰腺癌细胞的增殖抑制作用、凋亡及Wnt/β-连环蛋白(catenin)通路蛋白的影响,并分析其作用机制。结果过表达组IQGAP1基因表达量显著高于对照组,沉默组IQGAP1基因表达量显著低于对照组(P<0.05),说明IQGAP1基因转染成功。过表达组细胞增殖率显著高于对照组,沉默组细胞增殖率显著低于对照组、过表达组(P<0.05)。过表达组细胞凋亡率显著低于对照组,沉默组细胞凋亡率显著高于对照组、过表达组(P<0.05)。过表达组Wnt、β-catenin蛋白表达量显著低于对照组,细胞外信号调节激酶(ERK)、B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)、细胞外信号调节激酶的激酶(MEK)蛋白表达量显著高于对照组,沉默组Wnt、β-catenin蛋白表达量显著高于对照组,ERK、Bax、MEK蛋白表达量显著低于对照组(P<0.05);相比于过表达组,沉默组Wnt、β-catenin蛋白表达量显著较高,ERK、Bax、MEK蛋白表达量显著较低(P<0.05)。结论下调IQGAP1基因可以抑制胰腺癌细胞增殖,促进其凋亡,其机制可能与激活Wnt/β-catenin通路相关。

Caspase-1 IQGAP1 VEGF-C在宫颈癌中的表达及对患者预后的预测价值

目的探究半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)、IQ序列三磷酸鸟苷酶激活蛋白(IQGAP1)及血管内皮生长因子C(VEGF-C)在宫颈癌中的表达对患者预后的预测价值。方法选取2021年6月—2022年6月于丽水市人民医院进行宫颈癌治疗的患者180例,经手术提取宫颈癌组织作为实验组,同时搜集距离癌组织3 cm处的癌旁组织作为对照组。采用免疫组化法测定Caspase-1、IQGAP1及VEGF-C阳性表达情况,并分析其与临床特征和预后之间的关系。结果癌变组织Caspase-1、IQGAP1及VEGF-C阳性表达率(66.67%、72.22%及61.11%)与癌旁组织(39.44%、42.22%及36.11%)比较均升高,差异均有统计学意义(χ^(2)=26.778、33.090及22.517,均P<0.05)。宫颈癌癌变组织中Caspase-1、IQGAP1及VEGF-C表达与分化程度、临床分期、淋巴结转移相关(均P<0.05)。将宫颈癌患者年龄、体质量指数、瘤体直径及组织类型等因素进行控制后,Caspase-1、IQGAP1及VEGF-C仍与分化程度、临床分期、淋巴结转移显著相关(均P<0.05)。受试者特征曲线(ROC)分析Caspase-1、IQGAP1、VEGF-C及联合检测对宫颈癌预后的预测价值,其曲下面积分别为0.707、0.752、0.795及0.911。结论Caspase-1、IQGAP1及VEGF-C在宫颈癌癌变组织中均呈现上调状态,并且其表达高低变化与分化程度、临床分期、淋巴结转移和预后情况之间具有一定联系,可能共同参与该疾病的发生、发展,并对患者的预后情况产生影响。