茵陈二陈汤对非酒精性脂肪性肝炎模型细胞IRS-1^ser307、PKB^ser473表达的影响

[目的]探讨茵陈二陈汤对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)模型细胞内IRS-1^(ser307)、PKB^(ser473)蛋白表达的影响;[方法]采用游离脂肪酸500umol/L(棕榈酸:油酸摩尔比例为1:2)刺激干预HepG2细胞,干预24h建立细胞模型,采用茵陈二陈汤含药血清干预模型细胞,干预治疗24h;选用罗格列酮、多烯磷脂酰胆碱含药血清作为治疗观察对照;Western Blot检测茵陈二陈汤对模型细胞内IRS-1^(ser307)、PKB^(ser473)蛋白表达及IRS-1^(ser307)/IRS-1、PKB^(ser473)/PKB的影响。与空白组相比,游离脂肪酸刺激24h后,模型细胞内IRS-1^(ser307)蛋白表达及IRS-1^(ser307)/IRS-1水平明显升高,PKB^(ser473)蛋白及PKB^(ser473)/PKB水平显著下降;与模型组相比,茵陈二陈汤干预24h后,模型细胞内IRS-1^(ser307)蛋白表达(P<0.01)及IRS-1^(ser307)/IRS-1水平(P<0.01)显著降低,PKB^(ser473)蛋白(P<0.05)及PKB^(ser473)/PKB水平(P<0.05)明显升高,且差异具有统计学意义。[结论](1)茵陈二陈汤可通过调节IRS-1^(ser307)、PKB^(ser473)蛋白表达,降低肝细胞IRS-1蛋白活化水平,促进PKB磷酸化,从而达到干预治疗作用;(2)茵陈二陈汤对IRS-1^(ser307)、PKB^(ser473)蛋白的影响作用与罗格列酮及多烯磷脂酰胆碱效果相近。

电针调节2型糖尿病大鼠血清TNF-α、IL-6、IL-1β及胰岛素抵抗的机制研究

目的:观察电针对2型糖尿病大鼠血清炎性因子TNF-α、IL-6、IL-1β、空腹血糖(FBG)、胰岛素抵抗水平及骨骼肌IRS-1 Ser^307、GLUT4蛋白表达的影响,从而探讨电针足三里、三阴交、脾俞及胃脘下俞穴治疗2型糖尿病的可能机制。方法:以7只雄性ZL大鼠作为空白组,14只雄性ZDF大鼠随机分为2型糖尿病模型组和电针组(每组各7只)。干预4周,每周末检测空腹血糖,4周后取血清,放免法检测TNF-α、IL-6、IL-1β及胰岛素,取骨骼肌进行Western Blot检测IRS-1 Ser^307、GLUT4蛋白表达,并计算胰岛素抵抗相关指标。结果:电针组、模型组与空白组相比,TNF-α、IL-6、IL-1β水平均显著升高(P<0.05);电针组与模型组相比,TNF-α、IL-6、IL-1β水平均明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);电针组、模型组与空白组相比,空腹血糖均显著升高(P<0.05);电针组与模型组相比,空腹血糖水平下降,但差异无统计学意义(P>0.05);电针组与空白组比较,骨骼肌IRS-1 Ser^307、GLUT4蛋白表达有所提高,但差异无统计学意义(P>0.05);电针组与模型组比较,骨骼肌IRS-1 Ser^307蛋白表达明显下降(P<0.05),而GLUT4蛋白表达明显提高(P<0.05);电针组、模型组与空白组相比,大鼠胰岛素抵抗指数水平明显提高(P<0.05);电针组与模型组相比,血清胰岛素抵抗指数水平差异有统计学意义(P<0.05)。结论:电针可调节2型糖尿病大鼠血清炎性因子、IRS-1 Ser^307、GLUT4蛋白表达,其可部分解释电针对IR以及2型糖尿病的作用机制及作用途径。

胰岛素受体底物蛋白1及其丝氨酸磷酸化活性在胰岛素抵抗发生中的作用

目的探讨胰岛素受体底物蛋白1(IRS1)及其丝氨酸磷酸化在胰岛素抵抗(IR)发生中的作用。方法 C57BL/6小鼠40只随机分为正常饮食组(NC组)和高脂饮食组(HF组),HC组喂养高脂饮食16周后建立IR模型。16周后处死,检测空腹血清胰岛素和口服糖耐量;RT-PCR检测小鼠骨骼肌TSC2和IRS1mRNA表达。Western blot和免疫荧光染色检测骨骼肌TSC2、IRS1、IRS1Ser307和IRS1Ser636/639蛋白表达。结果与NF组相比,HC组小鼠空腹血清胰岛素显著升高(P<0.01),糖耐量显著受损,骨骼肌细胞TSC2mRNA和蛋白均显著降低(P<0.05),HF组pIRS1Ser307和pIRS1Ser636/639蛋白表达显著增加(P<0.01)。结论高脂饮食可能通过抑制TSC2基因和蛋白表达,增强IRS1Ser307和IRS1Ser636/639的磷酸化水平,阻碍胰岛素信号传导,诱发IR。