荞麦花叶黄酮对2型糖尿病大鼠肝损伤及IRS-2、PI3K、NF-κB表达的影响

目的观察荞麦花叶黄酮(FBFL)对2型糖尿病大鼠肝损伤和IRS-2、PI3K及NF-κB表达的影响,并探讨其可能机制。方法用高脂饲料和链脲佐菌素建立大鼠2型糖尿病模型,以FBFL为干预因素,动态观察随机血糖(PBG)、空腹血糖(FBG)、空腹血胰岛素(FINS)、血ALT、AST,光镜和电镜观察肝脏病理改变,免疫组化和Western blot检测肝IRS-2和PI3K蛋白表达。ELISA法检测肝组织NF-κB含量。结果与正常组比较,模型组大鼠血中PBG、FBG、FINS、HOMA-IR(胰岛素抵抗指数)、ALT、AST均明显升高(P<0.05,P<0.01),肝病理损伤明显,同时IRS-2、PI3K蛋白表达减少,NF-κB含量增加;FBFL治疗组能明显改善上述指标的变化,增加胰岛素敏感性,使肝组织损伤减轻和上调IRS-2、PI3K蛋白表达及减少NF-κB含量,且FBFL高剂量作用更明显。结论 FBFL对糖尿病肝损伤有抑制作用,其机制可能是通过降低血糖、改善胰岛素抵抗,上调IRS-2、PI3K蛋白表达及下调NF-κB蛋白表达等多途径实现的。

辛开苦降方对初发2型糖尿病KKay小鼠肝脏IRS-2/PI3K通路的影响

目的研究辛开苦降方对KKay 2型糖尿病(T2DM)小鼠肝脏胰岛素受体底物-2/磷脂酰肌醇3-激酶通路(IRS-2/PI3K)的影响。方法将小鼠随机分为辛开组、苦降组、辛开苦降组、罗格列酮组、模型组。对照组选10周龄雄性C57BL/6J小鼠10只。对照组及模型组给予0.5%羧甲基纤维素钠溶液(CMC)。灌胃给药四周后测血浆葡萄糖(FBG),及胰岛素浓度(FINS),免疫蛋白质印迹法(Western blotting)测定肝组织IRS-2、P-IRS-2(磷酸化胰岛素受体底物-2)、PI3K、PPI3K(磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶)、IRS-3、IRS-4蛋白表达水平,RT-PCR法测定肝组织PI3K、IRS-2、IRS-3、InsR(胰岛素受体)的mRNA表达水平。结果与模型组比较,苦降组、马来酸罗格列酮组血糖明显降低(P<0.05)。与模型组比较,各给药组小鼠胰岛素浓度均降低,IAI均升高(P<0.05)。辛开苦降组、辛开组、苦降组可增强T2DM KKay小鼠IRS-2及其磷酸化形式的蛋白表达(P<0.05),抑制负性调节因子IRS-3、4蛋白表达(P<0.05)。辛开苦降组可以增强PI3K、P-PI3K蛋白表达量及PI3-K mRNA表达(P<0.05)。各给药组间相比,各指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论辛开苦降方及其拆方可改善胰岛素抵抗,可能是通过恢复肝脏细胞内正调控和负调控IRS蛋白的平衡实现的。

不同运动时间对2型糖尿病大鼠骨骼肌IRS-2蛋白含量及磷酸化的影响

目的:探讨不同运动时间对2型糖尿病大鼠骨骼肌细胞胰岛素受体底物-2(IRS-2)蛋白含量及磷酸化的影响。方法:采用高脂饲料喂养和腹腔内注射STZ制备糖尿病大鼠模型。将符合标准的50只糖尿病大鼠随机分为糖尿病对照组和糖尿病运动组(20min组、40min组、60min组和80min组),并继续高脂饲料喂养。另取10只正常SD大鼠为正常对照组。各糖尿病运动组以20m/min的强度进行8周不同时间的跑台运动。采用Western blot免疫印迹法检测各组大鼠骨骼肌IRS-2蛋白含量及磷酸化程度。结果:与糖尿病对照组相比,20min组、40min组、60min组和80min组大鼠股四头肌IRS-2蛋白含量分别升高11.7%、12.4%、12.2%和11.9%(P<0.01);与20min组及80min组相比,40min组IRS-2蛋白含量分别升高10.9%和10.7%(P<0.05)。与糖尿病对照组相比,20min组、40mmin组、60min组和80min组大鼠股四头肌IRS-2磷酸化分别升高11.2%、12.7%、12.2%和11%(P<0.05和P<0.01);与20min和80min组比,40min组和60min组IRS-2磷酸化水平分别升高11.3%、11.5%(P<0.01)和10.9%、11.1%(P<0.05)。但各组仍未恢复到正常对照组水平。结论:不同运动时间对2型糖尿病大鼠骨骼肌IRS-2蛋白含量和磷酸化产生不同的影响,以40min效果最好。

解毒通络调肝散对实验性糖尿病大鼠肝脏IRS-2表达的影响

目的观察解毒通络调肝散对糖尿病胰岛素抵抗模型大鼠肝脏IRS-2的影响。方法采用高脂饮食加链脲佐菌素诱导糖尿病胰岛素抵抗大鼠模型。将造模成功的大鼠随机分为模型组、二甲双胍组、吡咯列酮组和解毒通络调肝组。给药8周后进行各指标检测。结果解毒通络调肝散能升高糖尿病胰岛素抵抗大鼠胰岛素敏感性指数,增加实验性糖尿病(DM)大鼠肝脏组织IRS-2的表达。结论解毒通络调肝散对大鼠IR有显著的改善作用,其机制可能与增加实验性糖尿病(DM)大鼠肝组织中IRS-2表达有关。

运动强度诱导2型糖尿病大鼠肌IRS-2介导活动的研究

为了观察不同运动强度对SD大鼠骨骼肌细胞胰岛素受体底物-2(IRS-2)蛋白含量及磷酸化的影响,先建立2型糖尿病大鼠模型,建模后将SD大鼠分为6组:对照组及糖尿病对照组(n=10)和糖尿病运动组(15 m/min组(n=9),20 m/min组(n=10),25m/min组(n=10),30m/min组(n=9)).运动组跑台连续运动6周,每天50min.用Western blot(免疫印迹法)检测鼠肌细胞IRS-2蛋白含量及磷酸化程度.实验结果发现,与糖尿病对照组相比,15、20、25、30m/min组鼠肌IRS-2蛋白含量分别升高17%(P<0.05)、24.4%、23.4%和21.3%(P<0.01);15、20、25、30m/min组鼠肌IRS-2磷酸化分别升高34.7%、37.2%、40.2%和38.8%(P<0.01).实验结果提示,不同运动强度对IRS-2含量产生显著影响,而对IRS-2磷酸化程度不产生明显影响.

变性高效液相色谱检测IRS-2基因3′-非翻译区单核苷酸多态性

目的 :探讨变性高效液相色谱 (DHPLC)在胰岛素受体底物 2 (IRS 2 )基因 3′ 非翻译区单核苷酸多态性 (SNP)检测中的应用。方法 :采用聚合酶链式反应 (PCR) ,DHPLC ,单链构象多态性 (SSCP)和DNA序列分析对 30例正常对照和 30例 2型糖尿病患者IRS 2基因 3′ 非翻译区进行SNP和突变检测。结果 :PCR DHPLC检测出 4例PCR SSCP分析未能发现的 2型糖尿病患者IRS 2基因 3′ 非翻译区的SNP ,并得到测序验证。结论 :DHPLC是一种快速、自动化程度高、操作简单、检测片段长、准确率高的SNP检测技术。它为进一步研究IRS 2基因 3′ 非翻译区的变异与 2型糖尿病的关系奠定了基础。

乳酸阈强度运动对糖尿病大鼠骨骼肌IRS-2蛋白含量及磷酸化的影响

观察乳酸阈强度运动对糖尿病大鼠骨骼肌胰岛素受体底物-2(IRS-2)蛋白含量及磷酸化的影响.在制备糖尿病大鼠模型后将SD大鼠分为3组:正常对照组(n=10),糖尿病对照组(n=10)和糖尿病运动组(20m/min组(n=10)).运动组每天运动50min,共6周.用Westernblot免疫印迹法检测骨骼肌细胞IRS-2蛋白磷酸化程度.结果显示:与糖尿病对照组相比,糖尿病运动组IRS-2蛋白含量升高24.4%(P<0.01)、磷酸化提高37.2%(P<0.01).本实验提示,乳酸阈强度运动对IRS-2蛋白含量和磷酸化程度产生明显影响.

Ⅱ型糖尿病大鼠运动后骨骼肌IRS-2、GLUT4含量及IRS-2磷酸化变化的时间特征

为了解运动后大鼠肌细胞IRS-2、GLUT4蛋白含量及IRS-2磷酸化的动态变化及时间特征。制备II型糖尿病大鼠模型。将SD大鼠分为正常对照组、糖尿病对照组和糖尿病运动组。用Western blot免疫印迹法检测运动后IRS-2、GLUT4蛋白含量及IRS-2磷酸化程度。结果得出:与糖尿病对照组相比,运动后1 h、3 h组、6 h、12 h、24 h和48 h股四头肌IRS-2蛋白含量分别升高6.8%、23.7%(P<0.01)、20.7%(P<0.01)、10%、5.4%和2.7%;GLUT4蛋白含量分别显著升高17.3%、32.7%、42.3%、46.2%、51.9%和45%(P<0.01);IRS-2磷酸化分别升高49%、51.4%、45.1%、43.1%、21.6%(P<0.01)和9.8%(P<0.05)。结论:一次性中等强度的运动对IRS-2、GLUT4含量和IRS-2磷酸化产生显著的影响,其中GLUT4含量和IRS-2磷酸化升高的效应可持续到运动结束的48 h。

大黄素介导IRS-2/PI3K/Akt通路干预大鼠非酒精性脂肪性肝炎的实验研究

目的探讨大黄素通过介导IRS-2/PI3 K/Akt通路对非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的影响。方法随机选取25只雄性大鼠给予高脂饲料喂养12周制备NASH模型,12周后取5只大鼠进行检测,确定NASH模型制备成功,剩余20只大鼠数字表法随机分为模型组(10只)和大黄素组(10只),另取同龄10只雄性未造模大鼠作为正常对照组。大黄素组大鼠给予20 mg/kg的大黄素灌胃,正常对照组和模型组给予等量生理盐水,连续给予8周。对大鼠肝脏进行称重,计算肝指数;检测空腹血糖和空腹胰岛素,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR),检测血生化指标。对肝组织进行HE染色,检测肝组织中IRS-2、p-IRS-2、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt蛋白相对表达量。结果模型组大鼠肝指数、空腹血糖、空腹胰岛素、HOMA-IR、ALT、AST、TG、TC和LDL-C水平较正常对照组增高,HDL-C水平较正常对照组降低(P<0.01);大黄素组大鼠肝指数、空腹血糖、空腹胰岛素、HOMA-IR、ALT、AST、TG、TC和LDL-C水平较模型组降低,HDL-C水平较模型组增高(P<0.05)病理检测发现,模型组出现大量脂肪变性,存在炎性细胞浸润和细胞气球样变性,大黄素组病灶明显较模型组减轻。模型组大鼠IRS-2、p-IRS-2、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt蛋白相对表达量较正常对照组降低(P<0.05),大黄素组大鼠IRS-2、p-IRS-2、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt蛋白相对表达量较模型组增高(P<0.05)。结论大黄素可以提高IRS-2/PI3K/Akt通路的活性,改善高脂诱导的NASH大鼠肝脏脂肪沉积及胰岛素抵抗。

益肾通络方对多囊卵巢综合征大鼠IRS-2蛋白表达及IL-18、IL-10水平的影响

目的:观察益肾通络方对多囊卵巢综合征(PCOS)模型大鼠黄素化颗粒细胞IRS-2蛋白表达及IL-18、IL-10水平的影响。方法:将30只雌性SPF大鼠随机分为3组,即正常组、PCOS模型组、中药组,每组10只,建立PCOS大鼠模型。模型组及正常组灌服生理盐水,中药组灌服益肾通络方,造模后3组大鼠均取出卵巢,进行心脏采血,通过免疫印迹法检测大鼠卵巢黄素化颗粒细胞IRS-2的蛋白表达,酶联免疫吸附试验法检测大鼠血清IL-18、IL-10水平的变化。结果:PCOS组的IRS-2蛋白表达增强,与正常组比较差异有统计学意义(P<0.01);中药组的IRS-2蛋白表达较PCOS组下降,差异有统计学意义(P<0.05)。PCOS组的IL-18水平升高,与正常组比较差异有统计学意义(P<0.01);中药组IL-18水平显著下降,与PCOS组比较差异有统计学意义(P<0.01)。PCOS组的IL-10水平降低,与正常组比较有统计学意义(P<0.05);中药组的IL-10水平上升,与PCOS组比较有统计学意义(P<0.05)。结论:益肾通络方可以调节PCOS大鼠黄素化颗粒细胞IRS-2蛋白表达。PCOS大鼠黄素化颗粒细胞IRS-2参与PCOS的发病,但是产生这种变化的原因尚不清楚。同时亦证明了益肾通络方对PCOS的发病可能起到双向调节作用。

IRS-2通过PI3K/AKT通路调控肝细胞焦亡的实验研究

目的探讨胰岛素受体底物(IRS-2)在过氧化氢(H2O2)诱导肝细胞焦亡中的作用及分子机制。方法H2O2刺激HepG2与L02细胞系。构建IRS-2 siRNA,在HepG2与L02细胞系中抑制IRS-2基因表达,Western印迹法检测细胞IRS-2与焦亡相关蛋白表达水平。CCK-8法检测细胞活性,流式细胞仪检测线粒体膜电位变化,电镜下观测细胞形态、线粒体与焦亡小体,Mito-Track Green观测线粒体形态与数量。IRS-2 siRNA单独或联合PI3K/AKT通路激动剂刺激HepG2与L02细胞系,检测PI3K/AKT通路蛋白与焦亡相关蛋白表达水平。结果与对照组相比,H2O2可降低肝细胞活率,降低IRS-2蛋白表达,提高细胞焦亡相关蛋白表达。下调细胞内IRS-2表达可导致肝细胞线粒体功能障碍,肝细胞形态发生破坏,焦亡小体数量增多,上调细胞焦亡相关蛋白表达水平,P-PI3K/PI3K与P-AKT/AKT比值下调。激活PI3K/AKT通路可逆转IRS-2下调导致的肝细胞焦亡相关蛋白表达。结论H2O2刺激肝细胞能降低IRS-2蛋白表达,诱导细胞焦亡。抑制IRS-2表达可能通过减少PI3K/AKT通路激活导致线粒体功能障碍,诱导肝细胞焦亡。

辛开苦降方对初发2型糖尿病KKay小鼠肝脏胰岛素抵抗及IRS-2/PI3K通路的影响（英文）

目的:研究辛开苦降方中药对KKay 2型糖尿病(T2DM)小鼠肝脏胰岛素抵抗及胰岛素受体底物-2/磷脂酰肌醇3-激酶通路(IRS-2/PI3K)的影响,探讨其改善肝胰岛素抵抗(IR)的分子机制。方法:将T2DM KKay小鼠按血糖轻重程度分层随机分为4组,即模型组,辛开苦降组、辛开苦降大剂量组、罗格列酮组。正常组选10周龄雄性C57BL/6J小鼠10只。正常组及模型组给予0.5%羧甲基纤维素钠溶液(CMC)灌胃。各组连续灌胃给药4周后取材,采用葡萄糖氧化酶法测血浆葡萄糖(FPG),放射免疫分析法测血浆胰岛素浓度(FINS),免疫蛋白质印迹法测定肝组织IRS-2、磷酸化胰岛素受体底物-2(p-IRS-2)、PI3K、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)、胰岛素受体底物-3(IRS-3)、胰岛素受体底物-4(IRS-4)蛋白表达水平,实时荧光定量PCR法测定肝组织PI3K、IRS-2、IRS-3、胰岛素受体(Ins R)的m RNA表达水平。结果:与正常组相比,模型组胰岛素敏感指数明显降低(P<0.01),FPG、FINS均明显升高(P<0.01)。辛开苦降组及其大剂量组两组FINS、胰岛素敏感指数均高于模型组(P<0.01,P<0.05)。免疫蛋白质印迹结果显示:与正常组相比,模型组小鼠肝脏IRS-2、p-IRS-2、PI3K、p-PI3K蛋白表达均明显减少(P<0.01),IRS-3、IRS-4蛋白表达与正常组比较明显增多(P<0.01)。辛开苦降组和辛开苦降大剂量组与模型组相比,小鼠肝脏IRS-2、p-IRS-2、PI3K、p-PI3K蛋白表达均明显增多(P<0.01,P<0.05),IRS-3、IRS-4蛋白表达明显减少(P<0.05),辛开苦降组和辛开苦降大剂量组两组之间无明显统计学差异。实时荧光定量PCR结果显示:与正常组相比,模型组小鼠肝组织PI3-K、IRS-2、IRS-3及Ins R m RNA表达均降低(P<0.01)。与模型组相比,辛开苦降组PI3K m RNA表达升高(P<0.05)。结论:辛开苦降方可改善KKay T2DM小鼠的IR,增加胰岛素的敏感性,调节KKay小鼠肝脏IRS-2、p-IRS-2、PI3K、p-PI3K、IRS-3、IRS-4蛋白和PI3K m RNA表达水平,提示调整肝脏的IRS2/PI3K通路相关的蛋白表达可能是辛开苦降方改善KKay T2DM小鼠的IR作用靶点,且单纯加大剂量并对相关蛋白及基因表达影响不大。

小檗碱对2型糖尿病大鼠IRS-1/-2、p85基因表达的影响

目的:探讨小檗碱降血糖和治疗2型糖尿病的可能作用机制。方法:对链脲佐菌素注射加高脂饮食诱导的2型糖尿病模型大鼠,给予小檗碱治疗8周。氧化酶法测定血糖,RT-PCR法测定大鼠肝脏、骨骼肌和脂肪组织IRS-1/-2、p85mRNA的表达及Western blot法测定上述3个组织中IRS-1/-2、p85蛋白的表达。结果:治疗8周时,小檗碱治疗组大鼠的空腹血糖显著下降,各组织IRS-1/-2、p85基因表达均有不同程度的提高。结论:小檗碱治疗2型糖尿病可能与其提高外周组织IRS-1/-2、p85基因表达从而改善胰岛素的信号传导有关。

中药复方益糖康对IR-HepG2细胞葡萄糖消耗量及IRS-2/PI3K/AKT信号通路的影响

目的观察益糖康含药血清对IR-HepG2细胞葡萄糖消耗的影响,并探讨其可能的作用机制。方法采用高胰岛素刺激建立稳定可靠的IR-HepG2细胞模型;益糖康高、中、低血清、空白血清、二甲双胍血清分别干预IR-HepG2细胞,葡萄糖过氧化物酶法测定IR-HepG2细胞葡萄糖消耗量;MTT法检测细胞活性;Annexin V—FITC/PI法测定益糖康含药血清对IR-HepG2细胞凋亡的影响;RT-PCR法检测IR-HepG2细胞IRS-2、PI3K、AKT基因的表达;Western Blot法检测IR-HepG2细胞IRS-2蛋白及AKT磷酸化蛋白的表达。结果1×10^(-6) mol/L胰岛素作用24h可建立稳定IR-HepG2细胞模型;当益糖康含药血清浓度15%,作用时间48h时,葡萄糖消耗量到达最大;与模型组相比较,益糖康含药血清能够降低凋亡率,抑制细胞凋亡;提高IRS-2、PI3K、AKT基因的表达(P<0.01),提高IRS-2、p-AKT蛋白的表达(P<0.01)。结论15%益糖康含药血清、作用48h使IR-HepG2葡萄糖消耗量达到最大,抑制IR-HepG2凋亡,其作用机制可能与上调IRS-2/PI3K/AKT信号通路中关键分子的基因和蛋白表达有关。

慢性间歇低氧对大鼠肝细胞IRS-2、 FoxO1表达的影响

目的 观察慢性间歇低氧条件下,大鼠肝细胞形态学变化及胰岛素受体底物-2 （IRS-2）、叉头框蛋白O1（FoxO1）的蛋白表达,并探讨IRS-2、FoxO1与胰岛素抵抗的相关性.方法 取24只6周龄健康雄性Sprauge-Dawley大鼠,采用随机数字表法分为正常对照组（NC组）、慢性间歇低氧4周组（CIH4组）、慢性间歇低氧8周组（CIH8组）,每组8只.CIH4组和CIH8组暴露于间歇低氧舱内：最低氧浓度6％ ～ 8％,持续时间8 h/d.NC组无间歇低氧暴露正常饲养,CIH4组、CIH8组和NC组分别于第4周、第8周及第8周禁食12 h后测定空腹血糖、空腹胰岛素水平,并采用稳态模型评估-胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）和胰岛素敏感性指数（ISI）评价胰岛素抵抗,对肝组织行HE染色观察形态学变化,采用免疫组织化学方法测定肝细胞IRS-2、FoxO1蛋白表达,以平均灰度值表示其蛋白表达量,二者成反比关系.结果 与NC组相比,CIH4组、CIH8组空腹血糖、胰岛素、HOMA-IR升高,ISI降低,且CIH8组更为显著,差异有统计学意义（F=50.23 ～90.26,P均＜0.05）.与NC组相比,CIH4组与CIH8组IRS-2蛋白表达降低,FoxO1蛋白表达增高且在核内重新分布,CIH8组更为显著,差异有统计学意义（F=69.46,618.94,P均＜0.05）.Pearson相关分析显示：HMOA-IR与IRS-2平均灰度值呈正相关（r=0.857,P＜0.05）,与FoxO1平均灰度值呈负相关（r=-0.926,P＜0.05）,ISI与IRS-2平均灰度值呈负相关（r=-0.823,P＜0.05）,与FoxO1平均灰度值呈正相关（r=0.848,P＜0.05）.结论 慢性间歇低氧条件下,大鼠肝细胞受损并发生胰岛素抵抗,同时IRS-2和FoxO1蛋白表达异常,且随暴露时间延长肝细胞损伤程度及胰岛素抵抗程度均逐渐加重.

IRS-2基因多态性与2型糖尿病的相关性

目的探讨IRS-2基因多态性与2型糖尿病的相关性。方法选取我院内分泌科2017年1月-2018年1月收治的100例2型糖尿病患者(病例组),同期选取100例体检健康的受试者(对照组)。检测两组IRS-2基因密码1057G/A多态性、生化指标,计算胰岛素抵抗指数、胰岛素B细胞功能指数。结果病例组RS-2基因aa型、ga型比低于对照组,差异无统计学意义(P>0.05),gg型基因比高于对照组(P<0.05)。两组aa型、g型等位基因频率差异无统计学意义(P>0.05)。aa、ga、gg型2型糖尿病患者空腹胰岛素、餐后2h胰岛素、血脂、血压、血糖及胰岛素抵抗指数、胰岛B细胞功能指数差异有统计学意义(P<0.05)0结论IRS-2基因多态性与2型糖尿病发病有关,gg型人群易感2型糖尿病。

2型糖尿病大鼠胰岛素受体底物-2基因表达变化及中药的干预作用

目的:观察2型糖尿病大鼠血糖、血清胰岛素浓度和胰岛素受体底物-2(insulin receptor substrate 2,IRS-2)基因表达的变化及复方黄连降糖片对其变化的影响。方法:以小剂量链脲佐菌素(28mg/kg)腹腔注射合并高脂饮食诱导2型糖尿病大鼠模型,给予不同剂量复方黄连降糖片治疗8周。处死后分别测定其血糖、血清胰岛素浓度,肝脏、骨骼肌和脂肪组织的IRS-2的mRNA及蛋白表达。结果:2型糖尿病大鼠的血糖、血清胰岛素升高,各组织IRS-2的mRNA及蛋白表达下降;复方黄连降糖片能降低模型大鼠的血糖和血清胰岛素,并能显著升高各组织IRS-2的mRNA及蛋白表达。结论:复方黄连降糖片治疗2型糖尿病可能与其提高外周组织IRS-2的基因表达从而改善胰岛素的信号传导有关。

中国汉族肥胖人群IRS2G1057D多态性筛查

目的筛查肥胖人群IRS2G1057D多态性并探讨其意义。方法选取辽宁汉族肥胖者225例,其中2型糖尿病(T2DM)组112例,健康对照组113例。用PCRRFLP方法检测IRS2G1057D多态性,结合T2DM发病机制相关的胰岛素分泌和胰岛素作用简易指标的变化探讨其意义。结果(1)IRS2G1057D变异频率在肥胖总研究人群中为28.7%,T2DM组和对照组分别为33.5%和23.9%(P=0.025)。(2)T2DM组DD基因型频率显著高于对照组,分别为13.4%和5.3%(P=0.041)。Logistic回归分析结果显示:GD和DD基因型的OR值分别为1.246和3.991。(3)在T2DM组,DD基因型的腰臀比(WHR)、HOMAIR及OGTT后2h的血糖、胰岛素和C肽均显著高于同组GG基因型,HOMAβ显著低于同组GG基因型。(4)在肥胖对照组,DD基因型的WHR、2h胰岛素、HOMAIR及HOMAβ也分别高于及低于同组GG基因型(均P<0.05)。(5)T2DM组GD、DD基因型的WHR较对照组均有升高趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论肥胖尤其是中心性肥胖的DD基因型携带者T2DM患病风险增大。

PKC在软脂酸诱导的肝细胞胰岛素抵抗信号转导中的作用

目的探讨蛋白激酶PKC在软脂酸(PA)诱导的肝细胞胰岛素抵抗中的作用。方法将DMEM培养基中含0.25mmol/L的软脂酸(PA组)与HepG2细胞共同培养24h,并设立正常对照组(Control组)。加入PKC抑制剂chelerythrine chloride(CC),胰岛素刺激后分光光度酶偶联速率法测定胞内糖异生限速酶磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)活性,Western blot测定胞内胰岛素受体底物2(IRS-2)蛋白水平。结果PA组与Control组相比,基础及胰岛素刺激的PEPCK活性升高(P<0.05);加入CC与否,Control组IRS-2蛋白水平存在明显差异(P<0.05),PA组中却无明显变化(P>0.05),而PEPCK活性在Control组、PA组均无明显改变(P>0.05)。结论细胞胰岛素抵抗时,糖异生的关键酶活性以及胰岛素信号通路的信号蛋白异常改变,胰岛素信号转导PKC通路可能存在传导障碍。