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布鲁菌种属鉴定多重PCR方法的建立及初步应用
被引量:
13
1
作者
丁家波
张存帅
+5 位作者
彭小兵
蒋颖
程君生
张尔利
蒋玉文
毛开荣
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第5期594-597,共4页
用BCSP31作为布鲁菌属特异性基因,以IS711基因拷贝数差异作为布鲁菌种间特异性标志,建立了布鲁菌种属特异性的多重PCR鉴定方法。用建立的多重PCR方法对11株(牛种A19,A544,A387;羊种M111,M28,M16;犬种RM6/66;绵羊种63/290;猪种S2,rS2,S13...
用BCSP31作为布鲁菌属特异性基因,以IS711基因拷贝数差异作为布鲁菌种间特异性标志,建立了布鲁菌种属特异性的多重PCR鉴定方法。用建立的多重PCR方法对11株(牛种A19,A544,A387;羊种M111,M28,M16;犬种RM6/66;绵羊种63/290;猪种S2,rS2,S1330)不同种来源的布鲁菌菌体和基因组进行鉴定,结果牛种菌能扩增大小分别为494,223,178bp3条带,羊种菌能扩增出大小分别为733,223,178bp3条带,犬种菌能扩增出大小分别为223,178bp2条带,绵羊种菌能扩增出大小分别为976,223,178bp3条带,猪种菌能扩增出大小分别为285,223,178bp3条带,均与预期一致;而作为对照的大肠杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌、流产沙门菌和都柏林沙门菌,均未扩增出任何条带。结果表明,本研究所建立的方法具有良好的特异性,能够区分不同种源的布鲁菌,可用于布鲁菌种属的快速鉴定和流行病学调查。
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关键词
布鲁菌
BCSP31
基因
is711基因
多重PCR
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职称材料
多重PCR方法鉴别牛、羊、猪种布鲁氏菌株
被引量:
17
2
作者
彭小兵
程君生
+3 位作者
夏业才
毛开荣
蒋玉文
丁家波
《中国兽药杂志》
2010年第2期12-14,共3页
用eri作为布鲁氏菌属特异性基因,以IS711基因拷贝数差异作为布鲁氏菌种间特异性标志,建立了鉴别牛、羊、猪种布鲁氏菌株的多重PCR方法。结果:牛种布鲁氏菌2308株扩增出大小为494 bp和178 bp的两条带,羊种布鲁氏菌M28株扩增出大小为733 b...
用eri作为布鲁氏菌属特异性基因,以IS711基因拷贝数差异作为布鲁氏菌种间特异性标志,建立了鉴别牛、羊、猪种布鲁氏菌株的多重PCR方法。结果:牛种布鲁氏菌2308株扩增出大小为494 bp和178 bp的两条带,羊种布鲁氏菌M28株扩增出大小为733 bp和178 bp的两条带,猪种布鲁氏菌S1330株扩增出大小为285 bp和178 bp的两条带,均与预期吻合;而胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌、流产沙门菌、都柏林沙门菌、大肠杆菌均未扩增出任何条带。硫化氢和血清学试验结果也符合相应种布鲁氏菌的特点。结果表明,本研究的多重PCR方法可用于牛、羊、猪种布鲁氏菌株的快速鉴定。
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关键词
布鲁氏菌
eri
基因
is711基因
多重PCR
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职称材料
牛、羊布鲁菌多重PCR方法的建立与应用
被引量:
1
3
作者
杜涛峰
韩文瑜
+4 位作者
雷连成
孙长江
李扬
顾敬敏
许会会
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2010年第11期80-84,共5页
根据布鲁菌属特异性基因BCSP31和布鲁菌种间特异性标志IS711插入序列,设计合成了3对引物,以牛种布鲁菌544A、104M和羊种布鲁菌16M基因组DNA为模板,通过优化反应条件,建立了可同时检测布鲁菌属、牛种布鲁菌和羊种布鲁菌的多重PCR方法。...
根据布鲁菌属特异性基因BCSP31和布鲁菌种间特异性标志IS711插入序列,设计合成了3对引物,以牛种布鲁菌544A、104M和羊种布鲁菌16M基因组DNA为模板,通过优化反应条件,建立了可同时检测布鲁菌属、牛种布鲁菌和羊种布鲁菌的多重PCR方法。牛种布鲁菌可扩增出301和114bp 2条带,羊种布鲁菌可扩增出301和253bp 2条带,该方法对牛种布鲁菌544A和羊种布鲁菌16M混合DNA模板的最小检出量为100pg,对大肠杆菌O157∶H7、小肠结肠炎耶尔森菌等15种参照菌的核酸扩增结果均为阴性。应用该方法对吉林省某牛场的106份粪便进行检测,虎红平板凝集试验作对照,结果PCR检测9份为阳性,且全为牛种布鲁菌阳性,对应的虎红平板凝集试验也为阳性。结果表明,建立的多重PCR方法具有良好的敏感性和特异性,为布鲁菌病的鉴别诊断提供了一种分子检测工具。
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关键词
牛种布鲁菌
羊种布鲁菌
BCSP31
基因
is711基因
多重PCR
下载PDF
职称材料
题名
布鲁菌种属鉴定多重PCR方法的建立及初步应用
被引量:
13
1
作者
丁家波
张存帅
彭小兵
蒋颖
程君生
张尔利
蒋玉文
毛开荣
机构
中国兽医药品监察所
出处
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009年第5期594-597,共4页
基金
农业部"948"计划资助项目(2007-G57(2))
文摘
用BCSP31作为布鲁菌属特异性基因,以IS711基因拷贝数差异作为布鲁菌种间特异性标志,建立了布鲁菌种属特异性的多重PCR鉴定方法。用建立的多重PCR方法对11株(牛种A19,A544,A387;羊种M111,M28,M16;犬种RM6/66;绵羊种63/290;猪种S2,rS2,S1330)不同种来源的布鲁菌菌体和基因组进行鉴定,结果牛种菌能扩增大小分别为494,223,178bp3条带,羊种菌能扩增出大小分别为733,223,178bp3条带,犬种菌能扩增出大小分别为223,178bp2条带,绵羊种菌能扩增出大小分别为976,223,178bp3条带,猪种菌能扩增出大小分别为285,223,178bp3条带,均与预期一致;而作为对照的大肠杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌、流产沙门菌和都柏林沙门菌,均未扩增出任何条带。结果表明,本研究所建立的方法具有良好的特异性,能够区分不同种源的布鲁菌,可用于布鲁菌种属的快速鉴定和流行病学调查。
关键词
布鲁菌
BCSP31
基因
is711基因
多重PCR
Keywords
Brucella
BCSP31 gene
is711
gene
multi-PCR
分类号
R852.614 [医药卫生—航空、航天与航海医学]
S535 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
多重PCR方法鉴别牛、羊、猪种布鲁氏菌株
被引量:
17
2
作者
彭小兵
程君生
夏业才
毛开荣
蒋玉文
丁家波
机构
中国兽医药品监察所
出处
《中国兽药杂志》
2010年第2期12-14,共3页
基金
科技基础性工作专项(2008FY130100):重大动物疫病病原相关制品标准物质研究
文摘
用eri作为布鲁氏菌属特异性基因,以IS711基因拷贝数差异作为布鲁氏菌种间特异性标志,建立了鉴别牛、羊、猪种布鲁氏菌株的多重PCR方法。结果:牛种布鲁氏菌2308株扩增出大小为494 bp和178 bp的两条带,羊种布鲁氏菌M28株扩增出大小为733 bp和178 bp的两条带,猪种布鲁氏菌S1330株扩增出大小为285 bp和178 bp的两条带,均与预期吻合;而胸膜肺炎放线杆菌、多杀性巴氏杆菌、流产沙门菌、都柏林沙门菌、大肠杆菌均未扩增出任何条带。硫化氢和血清学试验结果也符合相应种布鲁氏菌的特点。结果表明,本研究的多重PCR方法可用于牛、羊、猪种布鲁氏菌株的快速鉴定。
关键词
布鲁氏菌
eri
基因
is711基因
多重PCR
Keywords
Brucella
eri gene
is711
gene
multi-PCR
分类号
R516.7 [医药卫生—内科学]
下载PDF
职称材料
题名
牛、羊布鲁菌多重PCR方法的建立与应用
被引量:
1
3
作者
杜涛峰
韩文瑜
雷连成
孙长江
李扬
顾敬敏
许会会
机构
吉林大学畜牧兽医学院预防兽医学系
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2010年第11期80-84,共5页
基金
吉林省省长基金(20070613)
国家支撑计划课题(2008BAD96B11)
文摘
根据布鲁菌属特异性基因BCSP31和布鲁菌种间特异性标志IS711插入序列,设计合成了3对引物,以牛种布鲁菌544A、104M和羊种布鲁菌16M基因组DNA为模板,通过优化反应条件,建立了可同时检测布鲁菌属、牛种布鲁菌和羊种布鲁菌的多重PCR方法。牛种布鲁菌可扩增出301和114bp 2条带,羊种布鲁菌可扩增出301和253bp 2条带,该方法对牛种布鲁菌544A和羊种布鲁菌16M混合DNA模板的最小检出量为100pg,对大肠杆菌O157∶H7、小肠结肠炎耶尔森菌等15种参照菌的核酸扩增结果均为阴性。应用该方法对吉林省某牛场的106份粪便进行检测,虎红平板凝集试验作对照,结果PCR检测9份为阳性,且全为牛种布鲁菌阳性,对应的虎红平板凝集试验也为阳性。结果表明,建立的多重PCR方法具有良好的敏感性和特异性,为布鲁菌病的鉴别诊断提供了一种分子检测工具。
关键词
牛种布鲁菌
羊种布鲁菌
BCSP31
基因
is711基因
多重PCR
Keywords
B.abortus
B.melitensis
BCSP31gene
is711
gene
multiplex PCR
分类号
S854 [农业科学—临床兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
布鲁菌种属鉴定多重PCR方法的建立及初步应用
丁家波
张存帅
彭小兵
蒋颖
程君生
张尔利
蒋玉文
毛开荣
《中国兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2009
13
下载PDF
职称材料
2
多重PCR方法鉴别牛、羊、猪种布鲁氏菌株
彭小兵
程君生
夏业才
毛开荣
蒋玉文
丁家波
《中国兽药杂志》
2010
17
下载PDF
职称材料
3
牛、羊布鲁菌多重PCR方法的建立与应用
杜涛峰
韩文瑜
雷连成
孙长江
李扬
顾敬敏
许会会
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2010
1
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职称材料
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