小麦ISSR分析初探

以小麦基因组DNA为模板 ,对ISSR反应程序中的一些重要参数进行摸索和优化试验 ,建立了一套小麦ISSR分析的最优化反应体系及反应程序。即 2 5 μL反应体系中 ,含有 2 0mmol/LMg2 + 、15 0 μmol/LdNTP、2 0 0nmol/L引物、6 0ng模板DNA、2 0UTaqDNA聚合酶。反应程序为第 1个循环基因组DNA经 94℃预变性3min ;4 0个循环为 94℃变性 30s,4 8℃退火 6 0s,72℃延伸 90s ;最后 1个循环完成后 ,在 72℃下延伸 7min。