ITGB1在胃癌组织中的表达及其对免疫治疗疗效的影响

目的探索ITGB1在胃癌组织中的表达及其对免疫治疗疗效影响,为胃癌的预后判断及免疫治疗疗效预测提供新的标志物。方法通过生物信息学方法对癌症基因图谱(TCGA)数据库中胃癌患者的转录组数据、临床病理特征和生存信息进行分析,评估ITGB1在胃癌中的表达及其与临床病理特征的相关性,并进一步分析ITGB1表达与免疫浸润、免疫检查点相关基因、免疫亚型及免疫治疗响应的关系。结果ITGB1在胃癌组织中高表达,ITGB1高表达组T分期晚、存活率低,总体生存率明显降低。免疫浸润评分分析显示CD4+T细胞、CD8+T细胞、中性粒细胞、巨噬细胞和树突状细胞的在ITGB1高表达组评分升高,同时免疫检查点相关基因SIGLEC15、TIGIT、CD274、HAVCR2、CTLA4、PDCD1LG2在ITGB1高表达组表达水平升高,且ITGB1的表达与免疫检查点相关基因SIGLEC15、TIGIT、CD274、HAVCR2、CTLA4、LAG3、PDCD1LG2的表达呈正相关。TISIDB数据库分析显示ITGB1在胃癌不同免疫亚型中的表达存在差异,其中C6亚型(TGF-β主导型)中表达水平升高。TIDE算法提示ITGB1高表达组TIDE评分高于低表达组,对免疫检查点阻断治疗疗效差。结论ITGB1在胃癌组织中高表达,是胃癌患者预后差的危险因素,可作为判断胃癌预后及预测免疫治疗疗效的潜在标志物。

ITGB2促进胶质瘤细胞增殖并受E2F2调控

目的探讨整合素亚单位β2(ITGB2)在胶质瘤中的表达、功能及其调控机制。方法收集2018年6月至2019年6月手术切除的25例胶质瘤组织样本以及其邻近的非肿瘤脑组织样本,采用实时定量PCR检测ITGB2 mRNA的表达。体外培养正常人小胶质细胞系(HMC3)和胶质瘤细胞系(A172、T98G、U138-MG),转染E2F2、ITGB2小干扰RNA调控细胞基因表达,CCK-8法和EdU染色法检测细胞增殖,利用流式细胞术检测细胞周期分布,双荧光素酶报告基因实验验证E2F2与ITGB2启动子区域的结合关系,利用免疫印迹法检测E2F2对ITGB2蛋白表达的影响。结果与瘤周非肿瘤脑组织相比,胶质瘤组织ITGB2 mRNA表达明显上调。敲低ITGB2表达抑制体外培养胶质瘤细胞的增殖,并诱导细胞发生周期阻滞。E2F2结合于ITGB2启动子区域,过表达E2F2促进ITGB2蛋白表达,敲低E2F2抑制ITGB2蛋白表达。过表达E2F2逆转敲低ITGB2对胶质瘤细胞生长的抑制作用。结论ITGB2在胶质瘤细胞中高表达,且促进胶质瘤细胞增殖,其高表达受E2F2调控。

NCG对山羊性腺轴组织中ITGB8、IGFBP3基因相对表达量的影响

为了探究妊娠早期饲喂N-氨甲酰谷氨酸(N-Carbamylglutamate,NCG)提高山羊产羔数的繁殖机制,试验采用实时荧光定量PCR方法检测了ITGB8、IGFBP3基因在空白组和NCG组(0.15%NCG)卵巢、子宫、输卵管、垂体、下丘脑等性腺轴组织中的相对表达量。结果表明:ITGB8和IGFBP3基因在贵州白山羊5个组织中均有不同程度表达。相同组别不同组织比较,ITGB8基因在空白组的相对表达量为下丘脑>垂体>输卵管>子宫>卵巢,在NCG组的相对表达量为垂体>子宫>下丘脑>输卵管>卵巢;IGFBP3基因在空白组和NCG组中的表达趋势均为子宫>卵巢>输卵管>下丘脑>垂体。相同组织不同组间比较,ITGB8基因在NCG组垂体、卵巢、输卵管、子宫组织中的相对表达量极显著低于空白组(P<0.01),在下丘脑中两组间差异不显著(P>0.05);IGFBP3基因在NCG组垂体、卵巢、输卵管、子宫组织中的相对表达量均极显著低于空白组(P<0.01),在下丘脑中两组间差异不显著(P>0.05)。说明给山羊饲喂NCG能提高ITGB8基因和降低IGFBP3基因的相对表达量,NCG可能通过调控ITGB8和IGFBP3基因的表达影响山羊繁殖性能。

LncRNA ITGB1在垂体瘤中的表达及对细胞生物学行为的影响

目的检测长链非编码RNA(LncRNA)ITGB1在垂体瘤中的表达并探讨其对垂体瘤细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移行为的影响.方法选取2018年9月-2021年4月在本院接受手术治疗的48例垂体瘤患者及死于意外的48例组织捐献者,分别收集垂体瘤及正常垂体前叶组织.取人垂体瘤RC-4BC细胞,分别构建ITGB1敲低(转染LncRNA ITGB1 siRNA)和过表达株(转染pcD-NA3.1 LncRNA ITGB1),qPCR法检测RC-4BC细胞中LncRNA ITGB1表达,Western Blot法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Caspase-3)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达.结果垂体瘤组织中LncRNA ITGB1表达水平较正常垂体前叶组织升高;Ln-cRNA ITGB1在不同肿瘤大小、侵袭性患者垂体瘤组织中表达差异具有统计学意义;与siRNA NC组相比,LncRNA ITGB1 siRNA组RC-4BC细胞增殖率、侵袭数、划痕愈合率及细胞中LncRNA IT-GB1水平、PCNA、MMP-9蛋白水平降低,RC-4BC细胞凋亡率及细胞中Caspase-3蛋白水平升高;与pcDNA3.1 NC组相比,pcDNA3.1 LncRNA ITGB1组RC-4BC细胞增殖率、侵袭数、划痕愈合率及细胞中LncRNA ITGB1水平、PCNA、MMP-9蛋白水平升高,RC-4BC细胞凋亡率及细胞中Caspase-3蛋白水平降低.结论LncRNA ITGB1在垂体瘤中表达上调,与垂体瘤患者肿瘤大小、侵袭性有关,可促进垂体瘤RC-4BC细胞的增殖、侵袭、迁移过程,并抑制细胞凋亡.

miR-29通过ITGB1抑制胃癌侵袭、转移的分子机制

目的观察miR-29对胃癌细胞体外侵袭力的影响,探讨miR-29通过ITGB1调节胃癌侵袭和转移的具体机制。方法通过基因芯片筛选胃癌与癌旁组织中差异性表达的miRNA;采用生物信息学预测ITGB1调控相关miRNA,通过比对上述2个结果,筛选出miR-29;进一步以miR-29慢病毒及miR-29mimics过表达miR-29后,用Western blot检测胃癌细胞中ITGB1的表达变化;采用双荧光素酶实验分析miR-29与ITGB1的作用机制;采用Transwell侵袭实验及划痕实验检测miR-29慢病毒感染后细胞体外侵袭能力的变化;qRT-PCR检测60例胃癌患者癌组织和癌旁组织中miR-29的表达差异,并分析miR-29的表达与肝癌患者临床病理之间的关系。结果基因芯片及生物信息学预测发现miR-29在胃癌组织里高表达,同时又可能调控ITGB1;双荧光素酶实验证实miR-29可以结合在ITGB13'UTR,miR-29慢病毒及miR-29mimics过表达miR-29都能在蛋白水平下调ITGB1;qRT-PCR结果显示miR-29家族3条miRNA在胃癌组织中的相对含量均低于癌旁组织[miR-29a:癌旁(32.01±10.38),癌(14.16±6.25);miR-29b:癌旁(26.95±5.05),癌(9.82±1.86);miR-29c:癌旁(53.56±8.05),癌(16.79±1.97),P<0.01];进一步统计学分析表明,miR-29a与淋巴结转移有关(P<0.05),miR-29b在具有远处转移的病例组织中C/P比值较无远处转移的病例组织明显降低(P<0.05)。结论miR-29可以在转录后水平调控ITGB1的表达,从而抑制胃癌细胞的侵袭和转移。

荧光共振能量转移技术检测ITGB4BP与P311间的相互作用

目的利用激光共聚焦显微镜中的荧光共振能量转移(FRET)技术来验证整合素4结合蛋白(ITGB4BP)和P311间的相互作用。方法分别构建能在哺乳动物细胞中表达ITGB4BP的绿色荧光融合蛋白ITGB4BP-EGFP和表达P311的红色荧光融合蛋白P311-DsRed的重组载体pITGB4BP-EGFP和pP311-DsRed,经酶切与测序鉴定正确后,共转染人胚肾293(HEK293)细胞48h后,采用受体漂白方法(P311-DsRed),检测ITGB4BP和P311间的能量转移率(E)和相互间的作用距离(R)。结果重组载体pITGB4BP-EGFP和pP311-DsRed经双酶切鉴定正确,转染293细胞后经激光共聚焦显微镜观察能分别表达融合蛋白ITGB4BP-EGFP和P311-DsRed,在细胞质和细胞核中存在着共定位,FRET检测结果显示其能量转移率为14%,两个分子间的作用距离为6.3nm。结论成功构建了ITGB4BP-EGFP和P311-DsRed融合蛋白真核表达重组载体,在哺乳动物细胞中进行了表达后,利用FRET技术证实了活体细胞内ITGB4BP和P311间存在着相互作用。

高表达ITGB1促进人乳腺上皮MCF10A细胞EMT及迁移

目的探讨ITGB1基因过表达对人乳腺上皮MCF10A细胞迁移和侵袭的影响。方法构建重组质粒p BABEpuro-myc-ITGB1,在人胚肾上皮细胞系293T细胞中包装反转录病毒,转染人乳腺上皮MCF10A细胞系,构建ITGB1基因过表达的稳定细胞系;实验设空白对照组(MCF10A)、阴性对照组(MCF10A-vector)和ITGB1基因过表达组(MCF10A-ITGB1);经嘌呤霉素筛选后,实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测ITGB1 mRNA及蛋白的表达;Transwell迁移和侵袭实验分别检测细胞株迁移和侵袭能力;蛋白质印迹法进一步检测上皮间质转换(EMT)相关蛋白E-cadherin、vimentin、fibronectin、N-cadherin以及ITGB1下游ILK、p-FAK和FAK蛋白的表达。结果成功构建ITGB1基因稳定过表达人乳腺上皮MCF10A细胞系;ITGB1基因过表达组(MCF10A-ITGB1)与空白对照组(MCF10A)和阴性对照组(MCF10A-vector)细胞相比,迁移能力(P<0.05)和侵袭能力(P<0.01)显著增强;EMT相关蛋白E-cadherin显著下调(P<0.05),vimentin、fibronectin、N-cadherin以及ITGB1下游ILK,p-FAK蛋白显著上调(P<0.05)。结论在人乳腺上皮MCF10A细胞中,过表达ITGB1基因诱导细胞EMT并促进其迁移和侵袭。

FSHβ和ITGB1基因多态性与母猪繁殖性状的关联性分析

为探讨FSHβ和ITGB1基因多态性与母猪繁殖性状的相关性,本研究采用PCR-RFLP技术对939头大白猪群体中进行FSHβ和ITGB1基因的多态性检测,并对不同胎次不同基因型的总产仔数、产活仔数、健仔数、木乃伊数、死胎数、窝重等繁殖性状进行关联性分析。结果显示:在试验大白猪群体中,FSHβ和ITGB1均具有中度多态性,FSHβ基因型频率为AB>BB>AA,优势基因为B等位基因。ITGB1基因型频率在大白猪中为CT>CC>TT,优势基因为C基因。FSHβ基因在头胎的死胎性状上AB基因型显著低于BB型0.15头/胎(P<0.05),而在窝重性状上AB基因型显著高于BB基因型0.69kg/胎(P<0.05),在其他胎次中各繁殖性状在不同基因型间差异不显著(P>0.05)。ITGB1基因在头胎的死胎性状中TT基因型显著低于CC型,在二胎的窝重性状上CC型显著高于CT和TT型,分别高出0.88和0.97 kg/胎(P<0.05);在三胎健仔数和窝重性状中CC型均显著高于CT型(P<0.05),由此可见CC基因型为ITGB1在繁殖性状中的优势基因型。合并基因型分析结果发现:头胎的大白猪FSHβ-ITGB1合并基因型中最优分子标记组合为AATT,经产二胎、三胎次大白猪繁殖性状FSHβ-ITGB1最优分子标记组合为BBCC。

Numb调控ITGB1促进胃癌细胞对多柔比星敏感性的机制研究

目的探究细胞命运决定子Numb调控胃癌细胞对多柔比星(ADR)敏感性的作用,并明确Numb介导胃癌细胞化疗敏感性的分子机制。方法将SGC-7901随机分为对照组、ADR组、pLVX-Numb组、pLVX-Numb+ADR组,经过对应的ADR处理与转染处理后,Hoechst 33258染色观察细胞凋亡形态,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot法测定细胞内耐药蛋白(P-gp)、多聚ADP核糖聚合酶(PARP)、裂解的半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶3(Cleaved-caspase3)、Cleaved-caspase9的蛋白表达水平。再使用Numb过表达及其对照慢病毒感染SGC-7901细胞,qRT-PCR和Western blot检测细胞内ITGB1表达变化,免疫共沉淀实验分析细胞内源性Numb与ITGB1结合情况。结果与ADR组比较,pLVX-Numb+ADR组细胞内浓缩、碎裂的蓝色凋亡体增多,细胞凋亡率升高,且细胞内P-gp和PARP蛋白相对表达量下调、Cleaved-caspase3和Cleaved-caspase9蛋白相对表达量上调(P<0.05)。此外,SGC-7901细胞中内源性Numb与ITGB1能够形成复合物,pLVX-Numb组细胞中ITGB1蛋白相对表达量显著低于对照组(P<0.05),且ITGB1蛋白泛素链明显强于对照组。结论Numb能够促进胃癌细胞对多柔比星的敏感性,该作用机制可能与其调控ITGB1蛋白表达相关。

ITGB5和MUC13基因在产肠毒素大肠杆菌抗性和易感大白仔猪间的差异表达分析

为分析仔猪腹泻抗性候选基因在大白仔猪抗性和易感个体间的差异表达情况及组织表达特异性,实验利用荧光定量PCR技术检测整合素β5(ITGB5)基因和黏蛋白13(MUC13)基因在仔猪小肠、脾脏、肺脏、胸腺、肝脏和淋巴6种组织中的表达水平以及在产肠毒素大肠杆菌(ETEC F4)抗性和易感仔猪个体间的差异表达情况。结果表明:大白仔猪ITGB5基因在6种组织中均有一定的表达,在抗性个体小肠组织中的表达量低于易感个体(P>0.05);MUC13基因在小肠中高度表达,在其他组织中表达量较低,且抗性个体的表达量显著高于易感个体(P<0.05)。由此可知,小肠组织中ITGB5基因的低表达和MUC13基因的高表达可能有助于降低致病性大肠杆菌黏附到小肠上皮细胞上,进而实现对致病性大肠杆菌的抗性。ITGB5基因和MUC13基因可能与仔猪腹泻抗性存在密切关系,都可以作为抗性候选基因用于标记辅助选择,应用于抗腹泻仔猪的选育。

口腔鳞癌细胞中ITGB6基因主要转录调控区域的定位分析

目的:鉴定ITGB6基因在口腔鳞癌细胞中的主要调控区域,为研究基因在口腔鳞癌细胞中的转录调控机制奠定基础。方法:构建含有ITGB6基因转录起始点上游5'端侧翼区不同长度DNA序列的重组pGL2荧光素酶报告基因质粒,转染口腔鳞癌细胞株TCA8113和SAS,利用双荧光素酶报告基因系统检测启动子转录活性,并通过生物信息学方法预测ITGB6基因中潜在的主要转录因子结合位点。结果:获得一系列不同长度ITGB6基因5'侧翼区序列的重组荧光素酶报告基因质粒;当ITGB6基因5'端侧翼片段截短到-187～-35和-35～+27之间时,启动子活性均显著下降;生物信息学分析显示,在-187～-35区域有2个Ets-1的潜在结合位点,而在-35～+27区域有1个IRF-4潜在结合位点。结论:在口腔鳞癌细胞中,ITGB6基因-187^-35和-35^+27区域是主要的转录因子结合区。

血栓通与阿司匹林对ITGB3基因多态性药物抵抗患者治疗作用的研究

目的探讨中药制剂血栓通及阿司匹林抗血小板治疗脑卒中以及ITGB3基因多态性对治疗效果的相关性。方法收集了192例脑梗死患者,随机分为4组(阿司匹林组、血栓通组、血栓通+阿司匹林组、阿司匹林+氯吡格雷组)进行治疗,通过一般资料及测定生化指标和血栓弹力图,同时提取静脉血全基因组DNA,采用Snapshot方法检测ITGB3基因型,分析4组患者的血小板抑制情况,比较各组结果。结果整体水平上,各组经药物治疗后,血小板抑制率显著提高,血栓通治疗对3种ITGB3基因型AA、AG、GG患者血小板抑制率显著高于阿司匹林组,且组间没有显著性差异。结论中药制剂血栓通可以抑制血小板聚集发挥药效,并且突变型ITGB3基因AA及GG不会对血栓通产生抵抗。

ITGB5对肝细胞癌侵袭力的影响及其机制研究

目的通过体外实验探讨ITGB5在调控HCC细胞侵袭力中的作用及其相关机制。方法收集35例HCC患者的癌与癌旁组织,采用PCR技术检测ITGB5的表达量,比较ITGB5在肿瘤组织和正常组织的表达差异。使用脂质体转染技术将小干扰RNA转入Huh7与Hep3B两种HCC细胞系细胞,通过CCK8以及Transwell实验观察ITGB5敲除对HCC细胞增殖、迁移与侵袭能力的影响。使用PCR、Western Blot方法对侵袭相关分子以及上皮-间质转化(EMT)相关标志物进行表达量的检测,并且对调控EMT的关键转录因子进行筛选,寻找受ITGB5调控的关键转录因子。结果肿瘤组织的ITGB5表达量显著高于正常组织(<0.05)。ITGB5敲除之后,在全部两个细胞系中都观察到24 h之后细胞的增殖速度显著下降(均<0.05);肿瘤细胞的迁移与侵袭能力在ITGB5敲除后明显下降(<0.05);ITGB5敲除后,肿瘤细胞表现出更加显著的上皮样分子表型E-Cad,CLDN蛋白表达量显著升高;VIM,N-Cad,FN蛋白表达量显著下降(<0.05);转录因子Twist蛋白的表达量在ITGB5敲除后发生显著下调(<0.05)。结论 ITGB5敲除可以明显抑制HCC细胞的增殖与侵袭能力,其可能机制与其对Twist蛋白的调控有关,更加系统、深入地研究对于HCC的治疗具有深远意义。

LncRNA ITGB2-AS1靶向miR-338-3p对肺癌细胞多西他赛耐药性的影响

目的研究lncRNA ITGB2-AS1对肺癌细胞增殖、凋亡及多西他赛耐药性的影响及潜在的分子机制。方法用不同浓度(6.25μg/L、12.5μg/L、25μg/L、50μg/L、100μg/L、200μg/L)多西他赛(DTX)处理肺癌A549和多西他赛耐药细胞A549/DTX细胞,CCK8法测定DTX对A549细胞增殖抑制率和IC 50,qRT-PCR检测A549和A549/DTX细胞中lncRNA ITGB2-AS1和miR-338-3p的水平,Western blot检测细胞中CyclinD1、p21、Bax和Bcl-2表达水平,流式细胞术检测细胞凋亡率,双荧光素酶报告系统验证lncRNA ITGB2-AS1和miR-338-3p的靶向关系。结果多西他赛(DTX)(6.25μg/L、12.5μg/L、25μg/L、50μg/L、100μg/L、200μg/L)对A549/DTX细胞的抑制率显著低于A549细胞,呈浓度依赖性,A549/DTX对DTX的IC 50(256.80±10.22)μg/L显著高于A549细胞(23.57±2.11)μg/L;在A549/DTX中,lncRNA ITGB2-AS1含量显著高于A549细胞(P<0.05),miR-338-3p含量显著低于A549细胞(P<0.05);抑制lncRNA ITGB2-AS1联合12.5μg/L DTX处理可提高A549/DTX细胞凋亡率,增强DTX对A549/DTX细胞的增殖抑制率,上调p21和Bax水平,下调Cyclin D1和Bcl-2蛋白含量;lncRNA ITGB2-AS1靶向负调控miR-338-3p的表达;下调miR-338-3p可逆转抑制lncRNA ITGB2-AS1对A549/DTX细胞增殖、凋亡和多西他赛耐药性的作用。结论LncRNA ITGB2-AS1可靶向miR-338-3p调控A549/DTX细胞的增殖、凋亡及多西他赛耐药性。LncRNA ITGB2-AS1是肺癌潜在的分子靶点。

ITGB 2基因在苏博美利奴羊不同细度皮肤组织中的DNA甲基化及mRNA表达水平分析

本研究旨在分析ITGB 2基因在苏博美利奴羊不同细度皮肤组织中的DNA甲基化和mRNA表达水平。以苏博美利奴羊周岁母羊为试验动物,以不同细度的皮肤组织样为试验样本,对ITGB 2基因(GenBank登录号:NC_040252.1)启动子区CpG岛进行预测并设计BSP引物,并对ITGB 2基因(GenBank登录号:NM_001009485.1)、GAPDH基因(GenBank登录号:NM_001190390.1)mRNA序列设计引物,采用重亚硫酸盐测序法(BSP法)进行扩增纯化后将其连接pMD19-T载体,转化JM109细胞过夜培养,形成单菌落,筛选阳性克隆菌进行测序,对所获序列进行分析,分析ITGB 2基因启动子区CpG岛在周岁母羊皮肤组织的甲基化模式,并运用实时荧光定量PCR检测ITGB 2基因在苏博美利奴羊不同细度皮肤组织中的mRNA表达水平。结果显示,极细组苏博美利奴羊CpG岛甲基化率(94.29%)高于极粗组苏博美利奴羊的CpG岛甲基化率(87.62%),其中,极细组苏博美利奴羊CpG2、CpG3、CpG4、CpG7甲基化率(100%、100%、100%和80.00%)均高于极粗组(86.67%、93.33%、80.00%和73.33%);ITGB 2基因在苏博美利奴羊极粗皮肤组织中的表达量极显著高于极细皮肤组织的表达量(P<0.01),且ITGB 2基因的DNA甲基化水平与mRNA表达量呈明显负相关。研究表明,DNA甲基化对皮肤生长发育有一定作用,可作为一个候选的表观遗传标记用于苏博美利奴羊。

PRLR和ITGB1基因多态性对大白猪繁殖性能的影响

为了研究PRLR和ITGB1基因多态性对大白猪繁殖性能的影响,本研究采用PCR-RFLP技术检测基因多态性,并将基因型与母猪繁殖性能进行关联分析。结果显示:对于PRLR基因,初产母猪各基因型间的繁殖性状差异均不显著(P>0.05);经产母猪的总产仔数、活仔数和健仔数均呈现AA>AB>BB的趋势,AA型比BB型、AB型总仔数分别多0.55头(P<0.05)、0.13头,AA型、AB型比BB型活仔数分别多0.59头(P<0.05)、0.43头(P<0.05),AA型比BB型健仔数多0.5头(P<0.05)、0.26头。对于ITGB1基因,初产母猪和经产母猪各基因型间的个体繁殖性状虽有差异,但差异不显著(P>0.05)。对于合并基因型,初产母猪ABCC型比BBTT型个体的初生窝重多1.35头(P<0.05);经产母猪AACC型相对于BBCC和BBTC型,健仔数分别多1.07头(P<0.05)和0.71头(P<0.05),AACC型个体总仔数和活仔数分别比BBCC型多1.31和1.39头、比BBTT型多0.77头和0.64头,差异均显著(P<0.05)。

ITGB1基因表达与鹅肥肝形成的关系

为探究ITGB1基因与鹅肥肝形成的关系,选取30只70日龄健康朗德公鹅,随机分为填饲组与对照组并进行24 d填饲。运用ITGB1基因序列进行生物信息学分析,采用RT-q PCR技术检测不同填饲阶段(填饲12 d与24 d)鹅肝脏中ITGB1基因的表达水平,同时,使用不同剂量的脂肪肝形成相关因子(胰岛素、葡萄糖、油酸、亚油酸和棕榈酸)处理鹅原代肝细胞,检测ITGB1基因的表达水平。结果发现:全长CDS共2418 bp,编码805个氨基酸,与鸭的同源性高于98%,可编码1种亲水性蛋白;与对照相比,填饲12 d与24 d时,鹅肝脏中ITGB1基因的表达均显著上调(P<0.05);0.5 mmol·L^(-1)油酸、亚油酸和棕榈酸均能显著地诱导鹅原代肝细胞中ITGB1基因上调(P<0.05);200 mmol·L^(-1)葡萄糖能极显著地诱导鹅原代肝细胞中ITGB1基因上调(P<0.01);此外,0.2 mmol·L^(-1)胰岛素也能在一定程度上有诱导其表达上调的趋势(P=0.098)。结果表明,ITGB1基因表达上调与鹅肥肝形成密切相关,受脂肪肝形成相关因子诱导,提示ITGB1基因表达上调可能会促进鹅肥肝的形成。

LncRNA H19介导TSPAN9/ITGB1基因对食管癌细胞生物活性的作用机制

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)H19介导TSPAN9/ITGB1基因对食管癌细胞生物活性的作用机制。方法检测不同食管鳞癌细胞株中LncRNA H19水平。将食管癌KYSE30细胞分为EC组(无转染食管癌细胞株),NC组(食管癌细胞转染si-NC),干扰组(食管癌细胞转染LncRNA H19-siRNA)。聚合酶链反应(PCR)检测证实LncRNA H19转染成功后,采用噻唑蓝(MTT)、流式细胞仪、Transwell小室及划痕实验检测KYSE30生物活性,采用Western印迹及PCR检测时增加干扰Ⅱ组(干扰组上+TSPAN9模拟物+ITGB1-siRNA),检测TSPAN9/ITGB1蛋白及mRNA相对表达。结果在不同食管癌细胞株中均能够检测出LncRNA H19相对表达,在KYSE30食管癌细胞株中表达最高,选择KYSE30细胞进行后续实验;NC组和EC组KYSE30中LncRNA H19表达比较无显著差异(P>0.05),干扰组明显低于EC组、NC组(P<0.05);各组KYSE30在0 h及24 h时细胞增殖比较无显著差异(P>0.05),从48 h时起干扰组增殖抑制逐渐升高,与EC组、NC组比较,增值明显降低(P<0.05);NC组和EC组KYSE30细胞凋亡率比较无显著差异(P>0.05),干扰组凋亡率明显高于EC组、NC组(P<0.05);NC组和EC组KYSE30细胞侵袭、迁移数目比较无显著差异(P>0.05),干扰组细胞侵袭、迁移数目明显低于EC组、NC组(P<0.05);EC组和NC组TSPAN9/ITGB1蛋白及mRNA比较均无显著差异(P>0.05),干扰组与NC组比较存在显著差异(P<0.05),干扰Ⅱ组与干扰组比较存在显著差异(P<0.05)。结论LncRNA H19在食管癌KYSE30细胞中表达较高,转染LncRNA H19-siRNA后KYSE30细胞生物活性降低,作用机制与激活TSPAN9、抑制ITGB1表达相关。

广西扶绥县壮族肝癌家系人群Itgb1基因多态性与肝癌遗传易感性的研究

目的研究广西扶绥县壮族肝细胞癌（hepatocellularcarcinoma，HCC，以下简称肝癌）高发家系人群hgbl基因m2298141位点单核苷酸多态性（singlenucleotidepolymorphism，SNP）和肝癌遗传易感性的关系。方法采用病例一对照研究方法，选择扶绥县20个肝癌高发家系共79例（肝癌高发家系组）和10个正常对照家系共40名（正常对照家系组）为研究对象，应用时间飞行质谱技术（MALDI—TOFMS）检测两组ltgbI基因rs2298141位点的基因型及等位基因频率，并应用非条件logistic回归分析该位点基因多态性与肝癌遗传易感性的关系。结果正常对照家系组人群携带AA、AG、GG基因型频率分别为40．00％、47．50％、12．50％。肝癌高发家系组人群携带AA、AG、GG基因型频率分别为50．00％、40．00％、10．00％；两组^加J基因rs2298141位点各基因型频率与期望值吻合度较好（JD〉0．05），符合HaMy—Weinberg遗传平衡定律。正常对照家系组人群中AG、GG基因型个体罹患肝癌的风险分别是AA基因型个体的0．67倍（95％C1：0．22～2．1，P=0．50）和1．05倍（95％C1：0．17～6．6，P=0．96）；肝癌高发家系组人群中未患肝癌者AG、GG基因型个体罹患肝癌的风险分别是AA基因型个体的0．91倍（95％CI：0．31．2．71，P=O．86）和2．2倍（95％CI：0．40～11．96，P=0．37），但差异无统计学意义（P〉0．05）。结论广西扶绥县壮族人群中hgbl基因rs2298141位点的SNP与罹患肝癌无明显相关性。

鸡ITGB1基因生物信息学分析

利用生物信息学方法分析鸡ITGB1基因结构及其编码蛋白理化性质,结构位点及细胞定位等,旨在进一步探究该基因功能与潜在用途。同时从GenBank中下载鸡、鹅、鸭、火鸡、人、猪、兔、小鼠、大鼠、绵羊、黑猩猩11个物种的ITGB1基因CDS序列为材料,对该11个物种的ITGB1蛋白序列进行同源性和系统进化分析。结果表明,该基因CDS区长度为2412 bp,共编码803个氨基酸,其相对分子质量为88618.48,理论等电点为5.14;其是一个亲水性的稳定蛋白,有信号肽;蛋白二级结构上,含有162个α-螺旋,459个无规则卷曲,182伸展条和一个跨膜结构。鸡ITGB1基因的编码蛋白经同源性比对,发现其与鹅、火鸡、鸭的ITGB1蛋白高度同源。利用生物信息学方法对ITGB1基因及其表达的蛋白进行研究,有助于理解该基因在鸡这一物种上的相关作用,为进一步开发利用鸡ITGB1基因进行禽业生产、禽病防控以及分子育种提供了参考依据。