人血小板膜糖蛋白ITGB3基因终止突变C．1476G〉A的体外表达研究

目的对ITGB3基因新的终止突变c．1476G〉A进行体外表达研究，以阐明其功能。方法应用体外定点诱变技术构建突变型ITGB3e．1476G〉AcDNA的真核表达载体，转化感受态细胞，提取质粒后测序验证。采用非脂质体介导重组质粒转染中国仓鼠卵巢癌细胞株（Chinesehamsterovariancancer，CHO）细胞，经G418筛选获取稳定表达细胞株。采用实时荧光定量PCR、Western印迹和流式细胞术分别检测CHO稳定表达株ITGB3基因的mRNA表达和血小板膜糖蛋白llIa（glycoproteinIIIa，GPⅢa）糖蛋白水平。结果成功构建野生型和突变型ITGB3cDNA的真核表达载体，转染筛选后分别获得了稳定表达的CHO细胞株。突变型细胞株中CD61抗原表达量仅为野生型的37％，而ITGB3mRNA转录水平为野生型的6％。Western印迹结果显示，野生型细胞株稳定表达完整的GPⅢa蛋白，而突变型CHO细胞株无完整的GPⅢa蛋白表达。结论ITGB3c．1476G〉A终止突变可导致ITGB3基因的转录水平降低，影响GPⅢa蛋白合成及CD61抗原的表达水平。

新生儿期起病的血小板无力症一例

报告1例新生儿期起病及诊断的血小板无力症,患儿主要临床表现为生后出现的皮肤多发出血点、瘀斑,不伴其他部位出血,血小板功能检査提示血小板聚集障碍,流式检査CD41及CD61明显下降,基因检查患儿ITGB3基因IVS2 c.166-2A>C及EX5 c.665T>G复合杂合突变。新生儿期起病的血小板无力症非常罕见,临床应提髙对该病的警惕性。

新生儿血小板无力症1例并文献复习

目的:探讨新生儿血小板无力症的临床特征和基因变异特点。方法:对南京医科大学附属苏州医院新生儿科收治的1例新生儿血小板无力症患儿的临床资料进行回顾性分析。以“新生儿”、“血小板无力症”、“neonate”、“newborn”、“glanzmann thrombasthenia”为检索词对中国知网、万方数据库、维普、中华医学期刊网、PubMed、Embase数据库收录的文献进行检索,分析总结该病的临床特征和遗传学特点。结果:本例患儿为足月男婴,生后半小时出现头颅包块伴瘀斑瘀点,渐出现帽状腱膜下出血、重度贫血,血小板计数、血小板体积、凝血功能正常,血小板聚集试验提示花生四烯酸和二磷酸腺苷诱导的血小板聚集率下降,基因检测发现患儿ITGA2B基因存在c.886G>A(p.Gly296Arg)、c.2855dup(p.Phe953Valfs*83)两个杂合变异。共检索到42篇文献,结合本例,共44例血小板无力症患儿,其中33例(75.0%)在生后1 d出现皮肤瘀斑、瘀点;13例患儿有详细资料记录,5例重度贫血,均予输注悬浮红细胞和血浆,其中1例输注血小板,发生基因纯合变异、复合杂合变异各4例,10例有随访记录,2例随访期间无出血,其余8例出血程度轻重不一,无死亡病例。结论:对生后早期以瘀斑、瘀点为主要表现的新生儿,应考虑到血小板无力症可能;符合输血指征时,输血为新生儿期治疗的较佳选择。