体外合成JSRV mRNA及其体内表达特异性中和抗体的研究

目的:应用假病毒中和法检测体外合成JSRV-env mRNA免疫小鼠产生的特异性抗体。方法:优化PT7TS载体序列,插入目的序列经电泳测序验证后,体外转录合成JSRV-env mRNA,将mRNA与鱼精蛋白结合后皮下注射免疫BALB/c小鼠。采用慢病毒包装系统制作JSRV假病毒,测定假病毒滴度,取不同组免疫小鼠血清进行假病毒为基础的抗体中和实验,检测小鼠体内针对JSRV-env mRNA的特异性抗体。结果:成功体外合成具有稳定性的JSRV-env mRNA;重组了基于慢病毒质粒结构的JSRV假病毒,且具有感染能力;假病毒体外中和实验检测出JSRV-env mRNA免疫小鼠体内产生了针对JSRV的特异性抗体。结论:针对JSRV病毒包膜的信使RNA,经皮下注射到小鼠体内,能够表达产生针对JSRV-env的中和抗体。