期刊文献+
共找到12篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
肠上皮细胞中大肠杆菌侵袭素IbeA结合蛋白的分离 被引量:1
1
作者 惠长野 郭妍 +3 位作者 李珺 郝小燕 曹虹 黄胜和 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期2375-2378,共4页
目的分离肠上皮Caco-2细胞中与IbeA相互作用的蛋白。方法表达并纯化重组IbeA,将1、5、10μg/ml的His-IbeA及牛血清白蛋白与Caco-2单层细胞4℃孵育30min后,在37℃利用庆大霉素保护实验测定各组大肠杆菌K1致病株E44侵袭率的变化。裂解Cac... 目的分离肠上皮Caco-2细胞中与IbeA相互作用的蛋白。方法表达并纯化重组IbeA,将1、5、10μg/ml的His-IbeA及牛血清白蛋白与Caco-2单层细胞4℃孵育30min后,在37℃利用庆大霉素保护实验测定各组大肠杆菌K1致病株E44侵袭率的变化。裂解Caco-2得全细胞蛋白,上样至结合有His-IbeA的金属离子螯和柱,His pull down纯化特异性结合蛋白,电泳分析,Far-Western blotting进行两者结合特异性的验证,并分析结合蛋白N末端氨基酸序列。结果重组IbeA阻断E44侵袭Caco-2,并呈一定剂量依赖关系,对照组BSA对侵袭没有显著影响。His pull down的方法纯化出两个结合条带,Far-Western blotting验证了结合的特异性。并测定强结合条带pI约5.0,N端序列为MASITKLP。结论分离得到两个与IbeA相互作用的蛋白,为研究IbeA分子致病机制奠定了基础。 展开更多
关键词 CACO-2细胞 ibea蛋白 侵袭 结合蛋白 纯化
下载PDF
脑膜炎大肠埃希菌侵袭素IbeA结合多肽的初步研究 被引量:1
2
作者 曹虹 陈丽丹 +4 位作者 林琳 刘北一 杨军 贡树基 李明 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期618-622,共5页
目的脑膜炎大肠埃希菌(E.coli)侵袭素IbeA通过与脑微血管内皮细胞表面受体结合,从而介导细菌穿透血脑屏障引起新生儿细菌性脑膜炎。为通过肽库筛选获得与IbeA蛋白结合的多肽,建立噬菌体随机肽库筛选IbeA结合多肽模体的方法。方法首先制... 目的脑膜炎大肠埃希菌(E.coli)侵袭素IbeA通过与脑微血管内皮细胞表面受体结合,从而介导细菌穿透血脑屏障引起新生儿细菌性脑膜炎。为通过肽库筛选获得与IbeA蛋白结合的多肽,建立噬菌体随机肽库筛选IbeA结合多肽模体的方法。方法首先制备靶分子,用PCR扩增出全长ibeA基因序列,克隆至表达载体pET28a中,转化大肠埃希菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达出带有His-tag的目的蛋白,经变性复性后通过Ni2+-NTA亲和层析柱得到纯度达90%的重组蛋白。然后以固相化IbeA重组蛋白为靶亲和筛选噬菌体线性12肽库。结果经过3轮淘选,得到能和IbeA结合的24个重组噬菌体克隆;挑选15个亲和力高的克隆进行DNA测序,对比分析所得的短肽序列。固相Fmoc法合成短肽,并进行结合实验、阻断实验和竞争抑制实验。结论以重组表达的IbeA融合蛋白为靶筛选得到的重组噬菌体十二肽克隆,能够和IbeA蛋白结合,为IbeA蛋白结合多肽。结果提示所筛选的阳性噬菌体克隆及其合成肽可能模拟IbeA受体表位的结构。 展开更多
关键词 脑膜炎大肠杆菌 ibea蛋白 表达 噬菌体展示肽库 结合多肽
下载PDF
脑膜炎大肠杆菌IbeA蛋白结合肽序列的亲和筛选 被引量:1
3
作者 曹虹 林琳 +4 位作者 刘北一 陈丽丹 杨军 贡树基 李明 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期101-106,共6页
应用噬菌体展示肽库技术,以重组的脑膜炎大肠杆菌致病蛋白IbeA作为靶分子,经过吸附-洗脱-扩增-再吸附的亲和筛选,随机挑选亲和力强的噬菌体克隆,进行ELISA、竞争抑制实验和序列测定。结果显示,经3轮淘选后,间接ELISA鉴定得到高亲和性结... 应用噬菌体展示肽库技术,以重组的脑膜炎大肠杆菌致病蛋白IbeA作为靶分子,经过吸附-洗脱-扩增-再吸附的亲和筛选,随机挑选亲和力强的噬菌体克隆,进行ELISA、竞争抑制实验和序列测定。结果显示,经3轮淘选后,间接ELISA鉴定得到高亲和性结合IbeA蛋白的15个阳性克隆。竞争抑制实验结果表明,游离IbeA蛋白能竞争抑制噬菌体结合肽克隆与固相包被的IbeA蛋白的结合,其抑制作用随游离IbeA蛋白浓度的降低而减弱。测序结果得到5种阳性噬菌体克隆展示肽序列。上述结果提示以脑膜炎大肠杆菌IbeA蛋白为靶筛选所获得的噬菌体12肽克隆,具有特异性,其结合肽序列呈现相对保守性。建立的从噬菌体随机肽库筛选IbeA蛋白结合肽的方法具有方便、灵活和高效可行的特点。 展开更多
关键词 噬菌体展示肽库 脑膜炎大肠杆菌ibea蛋白 结合肽 亲和筛选
下载PDF
IBEA-SVM: An Indicator-based Evolutionary Algorithm Based on Pre-selection with Classification Guided by SVM 被引量:6
4
作者 LI Hao-ran HE Fa-zhi YAN Xiao-hu 《Applied Mathematics(A Journal of Chinese Universities)》 SCIE CSCD 2019年第1期1-26,共26页
Multi-objective optimization has many important applications and becomes a challenging issue in applied science. In typical multi-objective optimization algorithms, such as Indicator-based Evolutionary Algorithm(IBEA)... Multi-objective optimization has many important applications and becomes a challenging issue in applied science. In typical multi-objective optimization algorithms, such as Indicator-based Evolutionary Algorithm(IBEA), all of parents and offspring need to be evaluated in every generation, and then the better solutions of them are selected as the next generation candidates. This leads to a large amount of calculation and slows down convergence rate for IBEA related applications. Our discovery is that the evaluation of evolutionary algorithm is a binary classi?cation in nature and a meaningful preselection method will accelerate the convergence rate. Therefore this paper presents a novel preselection approach to improve the performance of the IBEA, in which a SVM(Support Vector Machine) classi?er is adopted to sort the promising solutions from unpromising solutions and then the newly generated solutions are conversely added as train sample to increase the accuracy of the classi?er. Firstly, we proposed an online and asynchronous training method for SVM model with empirical kernel. The initial population is randomly generated among population size, which is used as initial training. In the process of training, SVM classi?er is modi?ed and perfected to adapt to the evolutionary algorithm sample. Secondly, the classi?er divides all the new generated solutions from the whole solution spaces into promising solutions and unpromising ones. And only the promising ones are forwarded for evaluation. In this way, the evaluation time can be greatly reduced and the solution quality can be obviously improved. Thirdly, the promising and unpromising solutions are labeled as new train samples in next generation to re?ne classi?er model. A number of experiments on benchmark functions validates the proposed approach. The results show that IBEA-SVM can signi?cantly outperform previous works. 展开更多
关键词 MULTI-OBJECTIVE optimization SVM ibea training CLASSIFICATION
下载PDF
脑膜炎大肠杆菌侵袭素ibeA蛋白在大肠杆菌中的表达和纯化 被引量:1
5
作者 杨军 曹虹 +1 位作者 陈丽丹 林琳 《西北国防医学杂志》 CAS 2005年第4期286-288,共3页
目的:为了研究大肠杆菌ibeA的有效表达方法。方法:通过PCR扩增得到大量ibeA基因,并将扩增后的ibeA蛋白基因插入pGEX载体,转化E.coliDH5α,得到ibeADNA重组子的克隆。并以包涵体和可溶形式获得大量表达。结果:亲和层析纯化后获得了大量... 目的:为了研究大肠杆菌ibeA的有效表达方法。方法:通过PCR扩增得到大量ibeA基因,并将扩增后的ibeA蛋白基因插入pGEX载体,转化E.coliDH5α,得到ibeADNA重组子的克隆。并以包涵体和可溶形式获得大量表达。结果:亲和层析纯化后获得了大量纯化蛋白,所获得的ibeA蛋白具有良好的抗原性。结论:该方法为进一步研究ibeA介导E.coli穿入血脑屏障的机理,以及筛选ibeA侵袭素的拮抗剂奠定了基础。 展开更多
关键词 脑膜炎 大肠杆菌 基因表达
下载PDF
禽致病性大肠杆菌ibeA基因缺失及其特性分析 被引量:3
6
作者 朱善元 王健 +1 位作者 左伟勇 成大荣 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第12期1578-1581,共4页
运用大肠杆菌Red同源重组系统,对禽致病性大肠杆菌(Avian pathogenic Escherichia coli,APEC)DE02株的ibeA基因进行了缺失,其结果为揭示IbeA的功能奠定了基础。通过对APECibe A基因缺失株与人脑微血管内皮细胞(Human brain microvascula... 运用大肠杆菌Red同源重组系统,对禽致病性大肠杆菌(Avian pathogenic Escherichia coli,APEC)DE02株的ibeA基因进行了缺失,其结果为揭示IbeA的功能奠定了基础。通过对APECibe A基因缺失株与人脑微血管内皮细胞(Human brain microvascular endothelial cells,HBMECs)的黏附与侵袭,发现ibeA基因缺失后与HBMECs的黏附率为45%,侵袭率为1.2%,相对于野生型APEC均显著降低;提示ibeA基因是APEC的重要致病因子。 展开更多
关键词 致病性大肠杆菌 ibea基固 缺失
原文传递
脑膜炎大肠杆菌新基因cglE的克隆、表达及功能分析 被引量:5
7
作者 陈丽丹 曹虹 +3 位作者 黄胜和 杨军 周浩 贡树基 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期419-422,共4页
目的研究脑膜炎大肠杆菌新基因cglE在细菌穿透血脑屏障中的作用。方法1)PCR扩增cglE基因片段,克隆到原核表达载体pET22b,转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达并对目的蛋白进行纯化及初步鉴定。2)应用生物信息学方法对cglE表达产物进... 目的研究脑膜炎大肠杆菌新基因cglE在细菌穿透血脑屏障中的作用。方法1)PCR扩增cglE基因片段,克隆到原核表达载体pET22b,转化大肠埃希菌BL21(DE3),IPTG诱导表达并对目的蛋白进行纯化及初步鉴定。2)应用生物信息学方法对cglE表达产物进行一级和二级结构预测。结果经Western-blot验证原核表达的CglE蛋白,SDS-PAGE电泳显示其分子量大小约50 000 Da。生物信息学分析表明,该基因与编码二氢硫辛酰胺脱氢酶(Dihydrolipoamide Ddhydrogenase,DLDH)的基因有同源性,与脑膜炎大肠杆菌侵袭素IbeA在二级结构上有相似性。结论建立稳定的原核表达系统并成功表达cglE基因产物,cglE基因可能与能量代谢及细菌穿透血脑屏障有关。目的蛋白CglE的表达及初步鉴定可为研究其功能及脑膜炎大肠杆菌的感染组学奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 脑膜炎 大肠杆菌 cglE ibea蛋白表达 生物信息学
下载PDF
大肠杆菌侵袭基因缺失突变株与人脑微血管内皮细胞的相互作用 被引量:4
8
作者 陈冬松 方文刚 +1 位作者 陈誉华 宋今丹 《细胞生物学杂志》 CAS CSCD 2005年第3期329-333,共5页
ibeA、ibeB、ibeC是与大肠杆菌侵袭人脑微血管内皮细胞(HBMEC)密切相关的基因,但迄今各基因的功能并不清楚。应用侵袭分析和免疫荧光技术分析了各基因的缺失突变型及野生型大肠杆菌对HBMEC的侵袭、细胞骨架与细胞间紧密连接的影响。结... ibeA、ibeB、ibeC是与大肠杆菌侵袭人脑微血管内皮细胞(HBMEC)密切相关的基因,但迄今各基因的功能并不清楚。应用侵袭分析和免疫荧光技术分析了各基因的缺失突变型及野生型大肠杆菌对HBMEC的侵袭、细胞骨架与细胞间紧密连接的影响。结果显示:野生型菌大肠杆菌侵袭率为3.46%,而ibeA、ibeB、ibeC缺失突变株分别为0.54%、0.82%和0.73%;ibeA缺失突变型与野生型大肠杆菌作用相似,可引起HBMEC的细胞骨架蛋白分布改变,在细胞膜处呈明显的聚集,而ibeB和ibeC缺失突变株并未引起细胞骨架的明显改变;野生型和ibeA缺失突变型大肠杆菌可引起紧密连接结构的明显改变,而ibeB和ibeC缺失突变株对紧密连接结构的影响不明显。这些观察到的结果提示:ibeB和ibeC基因产物可能在调节细胞骨架和影响细胞紧密连接中起重要作用,而ibeA基因产物在其中的作用较小。 展开更多
关键词 大肠杆菌 基因缺失突变株 人脑微血管内皮细胞 相互作用 细胞骨架 细胞间紧密连接 新生儿 细菌性脑膜炎
下载PDF
一种基于超体积指标的多目标进化算法 被引量:9
9
作者 王学武 魏建斌 +1 位作者 周昕 顾幸生 《华东理工大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期780-791,共12页
基于超体积指标的进化算法能够有效地解决多目标优化问题,可以获得收敛性和分布性均较好的解集,但计算复杂度高、程序运行效率低。针对二维和三维的多目标优化问题,提出了一种基于超体积指标的多目标进化算法(MOEA-HV)。利用精确计算种... 基于超体积指标的进化算法能够有效地解决多目标优化问题,可以获得收敛性和分布性均较好的解集,但计算复杂度高、程序运行效率低。针对二维和三维的多目标优化问题,提出了一种基于超体积指标的多目标进化算法(MOEA-HV)。利用精确计算种群中个体的独立贡献超体积来指导种群进化,在基于指标的进化算法(IBEA)前对所有种群个体进行非支配排序,提前删除被支配的个体,从而减少个体独立贡献超体积的计算量来提升运行效率,同时与NSGA-Ⅲ算法相结合来优化算法的分布性。实验结果表明,MOEA-HV算法的运行效率更高,且能够获得较好的收敛性和分布性。 展开更多
关键词 多目标优化 超体积 非支配排序 ibea
下载PDF
Managing Software Testing Technical Debt Using Evolutionary Algorithms 被引量:1
10
作者 Muhammad Abid Jamil Mohamed K.Nour 《Computers, Materials & Continua》 SCIE EI 2022年第10期735-747,共13页
Technical debt(TD)happens when project teams carry out technical decisions in favor of a short-term goal(s)in their projects,whether deliberately or unknowingly.TD must be properly managed to guarantee that its negati... Technical debt(TD)happens when project teams carry out technical decisions in favor of a short-term goal(s)in their projects,whether deliberately or unknowingly.TD must be properly managed to guarantee that its negative implications do not outweigh its advantages.A lot of research has been conducted to show that TD has evolved into a common problem with considerable financial burden.Test technical debt is the technical debt aspect of testing(or test debt).Test debt is a relatively new concept that has piqued the curiosity of the software industry in recent years.In this article,we assume that the organization selects the testing artifacts at the start of every sprint.Implementing the latest features in consideration of expected business value and repaying technical debt are among candidate tasks in terms of the testing process(test cases increments).To gain the maximum benefit for the organization in terms of software testing optimization,there is a need to select the artifacts(i.e.,test cases)with maximum feature coverage within the available resources.The management of testing optimization for large projects is complicated and can also be treated as a multi-objective problem that entails a trade-off between the agile software’s short-term and long-term value.In this article,we implement a multi-objective indicatorbased evolutionary algorithm(IBEA)for fixing such optimization issues.The capability of the algorithm is evidenced by adding it to a real case study of a university registration process. 展开更多
关键词 Technical debt software testing optimization large scale agile projects evolutionary algorithms multiobjective optimization indicatorbased evolutionary algorithm(ibea) pareto front
下载PDF
通过网格改进的基于指标的进化算法
11
作者 肖宝秋 刘洋 戴光明 《计算机应用》 CSCD 北大核心 2012年第11期2985-2988,共4页
设计一种高效的演化多目标优化算法,使其能获得一组同时具有优异的收敛性和多样性的解集是一项很困难的任务。为了能高效求解多目标优化问题,在基于指标的进化算法(IBEA)的基础上:1)引入基于目标空间网格的多样性保持策略,保证算法近似... 设计一种高效的演化多目标优化算法,使其能获得一组同时具有优异的收敛性和多样性的解集是一项很困难的任务。为了能高效求解多目标优化问题,在基于指标的进化算法(IBEA)的基础上:1)引入基于目标空间网格的多样性保持策略,保证算法近似前沿具有优异的分布性;2)引入反向学习机制,同时评估当前解和当前解的反向解,期望能找到一组较优的解从而加快算法收敛。通过6个标准测试函数对改进算法进行测试,其结果表明改进算法可以有效逼近真实Pareto前沿并且分布均匀。 展开更多
关键词 多目标优化 基于指标的进化算法 网格 反向学习
下载PDF
p54nrb, a PSF Protein Partner, Contributes to Meningitic <i>Escherichia coli</i>K1-Mediated Pathogenicities
12
作者 Lina He Feng Chi +4 位作者 Tao Bo Lin Wang Chunhua Wu Ambrose Jong Shenghe Huang 《Open Journal of Applied Sciences》 2012年第1期1-10,共10页
IbeA is an important invasion determinant contributing to Escherichia coli K1 entry into brain microvascular endothelial cells (BMEC) that is a key step in the pathogenesis of E. coli meningitis. Our previous studies ... IbeA is an important invasion determinant contributing to Escherichia coli K1 entry into brain microvascular endothelial cells (BMEC) that is a key step in the pathogenesis of E. coli meningitis. Our previous studies have shown that IbeA-induced signaling and E. coli K1 invasion is mediated by two IbeA-binding proteins, vimentin, which is constitutively present in the surface of human BMECs (HBMECs), and PSF, which is inducibly expressed in both mesenchymal (endothelium) and non-mesenchymal (epithelium) cells. However, it is unknown whether p54nrb, a PSF partner protein, could contribute to the pathogenesis of E. coli K1 meningitis. Here, we reported that a 54-kDa protein was identified by copurification with PSF through IbeA-affinity chromatography as an IbeA-binding protein, which is identical to p54nrb. Both p54nrb and PSF are RNA-binding proteins and share significant sequence homology. The specific interaction between IbeA and p54nrb was confirmed by Western blot and ligand overlay assays. Recombinant p54nrb blocked E. coli K1 invasion of human BMEC very effectively. Overexpressed p54nrb as a GFP fusion protein in the transfected 293T cells significantly enhanced E. coli K1 invasion. Furthermore, higher levels of surface p54nrb in the transfected 293T cells were detected by flow cytometry. These results suggest that the IbeA invasion protein of E. coli K1 interacts with p54nrb for bacterial invasion of human BMEC. 展开更多
关键词 MENINGITIS ESCHERICHIA coli BMEC ibea p54nrb Invasion PROTEIN Receptor PROTEIN Interaction
下载PDF
上一页 1 下一页 到第
使用帮助 返回顶部