海南省39株幽门螺杆菌的耐药性及毒力基因特征

目的了解海南省幽门螺杆菌(Hp)耐药性及其毒力基因vacA、cagA和iceA基因型特征。方法对146例上消化道症状疾病患者进行胃镜检查,取胃黏膜组织进行Hp的分离和培养,对Hp进行药敏检测;通过聚合酶链式反应(PCR)对毒力基因cagA、vacA和iceA进行检测和分型,cagA测序进行聚类分析、并构建系统进化树;使用Fisher确切概率法分析各型毒力基因和患者疾病发生的相关性。结果共培养出39株Hp,对阿莫西林和克拉霉素的耐药率分别为2.6%和48.7%;39株均为vacA^(+)菌株,iceA 1型26株、2型13株;33株为cagA^(+)菌株,其中5株为西方型(EPIYA-ABC型),28株为东亚型(EPIYA-ABD型);cagA^(+)和vacA^(+)菌株与胃和十二指肠疾病有显著的相关性(P<0.05),iceA则无显著性差异(P>0.05)。结论海南省胃和十二指肠Hp患者中Hp毒力基因多样化,vacA s1am2/cagA^(+)基因型在消化性溃疡患者中占优势,不同毒力基因型对胃和十二指肠疾病的发生具有明显的差别,阿莫西林可作为该地区根除Hp首选抗生素。

广州地区儿童感染幽门螺杆菌iceA基因亚型与胃炎的相关性研究

目的探讨广州地区儿童感染幽门螺杆菌(H.pylori)的iceA基因亚型与胃炎的关系。方法105例胃、十二指肠疾病患儿的胃窦处取3块胃黏膜,分别进行快速尿素酶反应、病理检查和聚合酶链反应(PCR)。抽提胃黏膜基因组DNA,用3对引物检测H.pyloriureA和iceA基因,分析H.pylori iceA基因亚型与胃炎的关系。结果105例样本中,快速尿素酶反应、病理检测和聚合酶链反应(PCR)三者均阳性的标本52例,H.pylori iceA1亚型菌株单独检出率78.84%(41/52),H.pylori iceA2亚型菌株单独检出率1.92%(1/52),H.pylori iceA1和iceA2亚型均阳性的检出率3.84%(2/52),iceA1和iceA2亚型均阴性的比率15.38%(8/52),H.pylori iceA1亚型阳性率与其它基因亚型相比较,差异有显著性;感染H.pylori iceA1亚型菌株的患儿中轻度慢性胃炎3例,中度慢性胃炎15例,重度慢性胃炎25例;未感染H.pylori iceA1亚型菌株的患儿中轻度慢性胃炎2例,中度慢性胃炎4例,重度慢性胃炎3例,感染H.pylori iceA1亚型菌株患儿与未感染H.pylori iceA1亚型菌株患儿的胃黏膜病变程度差异有显著性(P<0.05)。结论H.pylori iceA1亚型是广州地区儿童感染H.pylori的优势基因亚型,H.pylori iceA1菌株容易引起较严重慢性胃炎。

幽门螺杆菌cagA、oipA、iceA1基因的检测及其意义

〔目的〕检测分离自胃炎、胃溃疡患者的幽门螺杆菌 (Hp)cagA、oipA、iceA1基因 ,了解这些基因与消化性疾病的关系。〔方法〕取 163份临床胃活检标本 ,用布氏平板分离培养Hp ,分离培养出来的细菌 ,用聚合酶链反应 (PCR)方法扩增cagA、oipA、iceA1基因片段 ,用卡方检验进行统计学分析。〔结果〕163份标本中检出Hp 5 8株 ,检出率为 3 5 .6%。ca gA基因的阳性率为 75 .9%(4 4 5 8) ,其中胃炎 66.7%(2 8 42 ) ,胃溃疡 10 0 %(16 16) ;oipA基因的阳性率为 46.6%(2 7 5 8) ,其中胃炎 2 6.2 %(11 42 ) ,胃溃疡 10 0 %(16 16) ;iceA1基因的阳性率为 3 1.0 %(18 5 8) ,其中胃炎 2 1.4%(9 42 ) ,胃溃疡 3 3 .3 %(9 16)。卡方检验分析表明胃溃疡患者HpcagA、oipA、iceA1阳性率均显著高于胃炎患者。〔结论〕HpcagA、oipA、iceA1毒力基因在胃溃疡患者的检出显著高于胃炎患者。

淮南地区幽门螺杆菌iceA1、babA2基因分布及其细胞免疫功能研究

目的研究淮南地区幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori,Hp)iceA1、babA2基因分布特征及其细胞免疫功能。方法对244例有消化道症状者行胃镜检查,并在胃窦部取活检粘膜作Hp的分离培养,利用聚合酶链反应技术(PCR)测定分离培养出的Hp菌株的iceA1、babA2基因,并采用生物素-链霉亲和素(biotin-sreptavidin,BSA)系统检测患者外周血T细胞亚型,ELISA法检测其细胞因子。结果244例中,检出Hp菌株185例,其中慢性胃炎、萎缩性胃炎、胃溃疡及十二指肠球部溃疡阳性率分别为70.65%(65/92)、74.14%(43/58)、85.25%(52/61)及75.76%(25/33);基因测定结果显示,185株分离株中,79.46%(147/185)含iceA1基因,75.14%(139/185)含babA2基因;其中慢性胃炎、萎缩性胃炎、胃溃疡及十二指肠球部溃疡iceA1、babA2基因检出率分别为66.15%(43/65)、56.92%(37/65);79.07%(34/43)、74.42%(32/43);90.38%(47/52)、88.46%(46/52);92.00%(23/25)、96.00%(24/25);差异均具显著性(P<0.01)。细胞免疫功能检测,iceA1+、babA2+患者的CD+3、CD+4、CD+4/CD+8、IL-2下降,IL-6、IL-8水平升高,差异有显著性(P<0.001)。结论淮南地区Hp感染多为iceA1+、babA2+菌株,iceA1+、babA2+Hp菌株为高毒力菌株,是致消化性溃疡的重要因素;iceA1+、BabA2+菌株可使患者细胞免疫功能下降,引起患者以Th1为主的浸润反应。

胃癌、消化性溃疡患者幽门螺杆菌和iceA基因的研究

目的研究幽门螺杆菌（Ｈｐ）的ｉｃｅＡ基因与胃癌、消化性溃疡病的关系。从１２１例患不同胃十二指肠疾病的患者胃活检组织中分离培养Ｈｐ，ＰＣＲ扩增检测Ｈｐ的ｃａｇＡ和ｉｃｅＡ基因。结果胃癌、消化性溃疡及功能性消化不良患者Ｈｐ的ｃａｇＡ基因的阳性率分别为：９１２％、８７１％和８９７％（Ｐ＞０．０５）；而ｉｃｅＡ１基因的阳性率分别为：６８０％、７１０％和６９２％（Ｐ＞０．０５）。结论我们的研究表明Ｈｐ的ｃａｇＡ和ｉｃｅＡ１基因与胃癌及消化性溃疡的发生不相关。

幽门螺杆菌中国临床分离株iceA基因突变株的构建和鉴定

目的:构建幽门螺杆菌(Hpylori)iceA基因突变株.方法:克隆iceA基因及两侧的部分序列至载体pBluescriptSKⅡ(-)多克隆位点中.运用基因重组方法将卡那霉素抗性基因(kam)插人iceA基因片段之间,构建出带卡那霉素抗性标志的突变载体pBS-iceA-kam.再将突变载体转化至Hpylori中国临床分离株MEL-Hpylori27中,用卡那霉素筛选iceA基因的突变株,经PCR和DNA测序鉴定.结果:用PCR方法扩增突变株基因组DNA,结果显示卡那霉素抗性基因已插入iceA基因片段中,测序进一步证实已筛选获得Hpylori中国临床分离株iceA基因的突变株.结论:成功构建一株HpyloriiceA基因突变株.

幽门螺杆菌iceA1,babA2基因型与临床消化疾病的关系

目的:研究镇江地区幽门螺杆菌(H.Pylori)iceA1,babA2基因型分布及其与临床消化疾病的关系。方法:从70例胃十二指肠疾病患者胃黏膜活检组织中分离培养H.Pylori,PCR扩增检测H.Pylori iceA1,babA2基因型。用χ2检验分析各基因在不同胃十二指肠疾病中的统计学意义。结果:70例菌株的总检出率分别为iceA1 68.6%,babA265.7%。其中iceA1的分布为胃癌12/14(85.7%),慢性胃炎18/30(60%),消化性溃疡18/26(69.2%);而babA2的检出率为胃癌8/14(66.7%),慢性胃炎19/30(63.3%),消化性溃疡19/26(73.1%)。结论:镇江地区分离的H.Pylo-ri的iceA1与babA2基因与胃癌、消化性溃疡、慢性胃炎等疾病类型的发生无显著相关性,但iceA1在胃癌中的检出率高于慢性胃炎与消化性溃疡患者。

内蒙古地区幽门螺杆菌iceA基因型的分布

目的:研究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)iceA基因型与胃十二指肠疾病的关系,旨在寻找内蒙古地区Hp iceA基因型的分布特点。方法:从164例胃十二指肠疾病(包括CSG 32例,CAG 70例,PUD32例,GC 30例)患者的胃黏膜活检组织中分离培养并经系统鉴定确认为Hp者,传代培养2 d扩增细菌。用标准方法提取Hp基因组DNA,进行PCR扩增检测Hp iceA基因的表达情况。iceA基因与疾病关系的分析采用χ2检验,P<0.05认为有统计学意义。结果:在164例临床分离的Hp菌株中,iceA基因的检出率为56.71%,iceA 1基因的检出率为39.63%(65/164),iceA 2基因的检出率为30.49%(50/164),iceA1的检出率高于iceA 2,差异有统计学意义(P<0.05)。在各疾病组中,iceA 1检出率分别为CSG 40.63%,CAG37.14%,PUD 43.75%,GC 40.00%,iceA 2检出率分别为CSG28.13%,CAG28.57%,PUD31.25%,GC33.33%,iceA 1和iceA 2基因在各组疾病中的检出率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:Hp临床分离株的基因型以iceA 1为主,Hp感染后其iceA基因型不能预示感染的个体将更有可能发生何种胃十二指肠疾病,iceA基因不能作为Hp毒力强弱的指标。

幽门螺杆菌iceA基因对SGC7901细胞生长的影响

目的观察幽门螺杆菌(Hp)野生株与iceA基因插入失活突变株对人胃上皮细胞株SGC7901细胞生长的影响,研究Hp毒力基因iceA相关的细胞毒性效应。方法分别将幽门螺杆菌野生株与iceA基因插入失活突变株与SGC7901细胞共培养48h,观察比较细胞形态学变化;用MTT法检测分析共培养12～36h细胞增殖活性;流式细胞仪分析48h细胞周期和24、48h细胞凋亡。结果 Hp野生株组和突变株组引起相似的细胞形态学改变;30h和36h时各组细胞的增殖活性表现出明显差异(P<0.05),培养30h时突变株组(0.745±0.006)的细胞增殖活性高于野生株组(0.728±0.017)(P<0.05);细胞周期结果显示,野生株组G2期阻滞,而突变株组为S期阻滞;培养24、48h野生株组[(33.04±10.69)%、(52.28±3.41)%]和突变株组[(44.23±11.34)%、(57.32±0.88)%]均可以诱导细胞产生明显凋亡(P<0.05),但二者在诱导细胞凋亡的能力方面差异无统计学意义(P>0.05)。结论幽门螺杆菌对于SGC7901细胞生长状态产生明显的影响,iceA基因的插入失活突变对于SGC细胞的形态变化和凋亡的影响无明显差异,对细胞增殖和细胞周期影响差异较明显。

胃癌及癌前病变患者幽门螺杆菌的sabA基因多态性的研究

目的对癌症和癌前病变患者幽门螺杆菌进行sabA基因遗传信息多态性的研究。方法采用特异引物聚合酶链反应(PCR)及测序和比较基因组方法分析42株国内癌症及癌前病变患者幽门螺杆菌的sabA基因CT双核苷酸重复序列调节区多态性。结果 sabA基因调节区的阳性检测率为85%,功能性sabA基因占所有测序菌株的55%。对随机挑选的18株检测阳性菌株进行测序分析,结果显示在碱基水平及氨基酸水平存在显著的遗传多态性。对sabA基因调节区的氨基酸序列聚类分析中发现,本研究菌株与国际已经完成测序的7株幽门螺杆菌可以明显的分为两个组,即中国组与西方组。结论 sabA基因CT双核苷酸重复序列调节区在中国菌株中普遍存在,且在翻译水平有很显著的多态性。聚类分析发现含有功能性sabA基因的幽门螺杆菌菌株多态性存在明显的地域性分布差异。

儿童幽门螺杆菌iceA1、babA2基因分布及其细胞免疫功能研究

目的探讨儿童幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,Hp)iceA1、babA2基因分布特征及其细胞免疫功能。方法对152例有消化道症状患儿行胃镜检查,并在胃窦部取粘膜作Hp的分离培养,利用聚合酶链反应技术(PCR)测定分离培养出的Hp菌株的iceA1、babA2基因,并采用生物素-链霉亲和素(biotin-sreptavidin,BSA)系统检测患者外周血T细胞亚型,ELISA法检测其细胞因子。结果152例中,检出Hp菌株98例,其中iceA1阳性菌株65例,轻度胃炎、中至重度胃炎iceA1阳性率分别为43.59%(17/39)、79.25%(42/53),差异有统计学意义(P<0.01);babA2阳性菌株71例,轻度胃炎、中重度胃炎babA2阳性率分别为48.72%(19/39)、86.79%(46/53),差异有统计学意义(P<0.05);6例活动性胃炎均为iceA1、babA2阳性;iceA1+、babA2+患儿的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+和IL-2下降,IL-6、IL-8水平升高(P均<0.001)。结论儿童Hp感染多为iceA1+、babA2+菌株。iceA1+、babA2+Hp菌株为高毒力菌株,易引起较严重的慢性胃炎,使患者细胞免疫功能下降,引起以Th1细胞为主的炎症浸润反应。

H pylori iceA基因与慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌的关系

目的:研究幽门螺杆菌(H priori)的iceA基因与慢性胃炎、消化性溃疡和胃癌的关系. 方法:从胃十二指肠疾病的患者胃镜活检标本中分离培养H priori,PCR扩增检测H priori的iceA基因共138例, 其中慢性浅表性胃炎47例、慢性萎缩性胃炎22例、消化性溃疡49例和胃癌20例. 结果:138例中iceA1基因、iceA2基因总的阳性率分别为47.1%和47.8%,其中36例(26.1%)为iceA1和iceA2均阳性, 43例(31.2%)为iceA1和iceA2均阴性.iceA1在慢性浅表性胃炎、慢性萎缩性胃炎、消化性溃疡及胃癌患者Hpylori中的阳性率分别为44.7%、40.1%、59.2%、30.0%,iceA2基因的阳性率分别为53.2%、31.8%、65.3%、10.0%,iceA1 和iceA2在消化性溃疡中的检出率明显高于其他疾病组.

幽门螺杆菌的iceA基因

本文主要论述幽门螺杆菌iceA基因的2个等位基因iceA1和iceA2的结构及与疾病的关系,并简要介绍iceA与cagA和vacA的相关性。

云南汉族白族与纳西族人群幽门螺杆菌iceA基因分布特征及其致病性

目的 探讨云南白族、纳西族与汉族幽门螺杆菌 (H pylori)菌株iceAl、iceA2基因型分布特征及 3民族的差异 ,评价该基因与上消化道疾病的关系。方法 (1)选取H pylori相关慢性胃炎和消化性溃疡患者的胃粘膜 ,分离培养H pylori菌株 ;(2 )用PCR方法检测云南白族、纳西族与汉族菌株的iceA1、iceA2基因 ;(3)通过组织病理学观察胃粘膜炎症等级和H pylori定植密度等级。结果 (1) 10 9例H pylori菌株iceA1与iceA2基因的检出率分别为 6 7 0 %与 4 1 3%。其中白族菌株 (31例 )、纳西族菌株 (4 5例 )、汉族菌株 (33例 )iceA1与iceA2基因的检出率分别为 87 1%与 6 1 3% ,4 8 9%与 31 1% ,72 7%与 36 4 % (2 )在云南地区H pylori菌iceA1基因与消化道疾病致病性和组织病理学的关系中 ,仅见云南 10 9例H pylori菌株中iceA1基因在轻度、中度、重度胃粘膜炎症等级中的检出率分别为 76 7% (2 3 30 )、 6 4 4 % (2 9 4 5 )与 85 3% (2 9 34) ,各胃粘膜炎症等级组间检出率有显著性差异 (P <0 0 5 ) ,重度组的检出率高于中组 ;在未观察到、轻度、重度H pylori定植密度患者中的检出率分别为 75 0 % (6 8)、 6 1 8% (2 1 34)、 6 5 5 % (19/ 2 9)、 92 1% (35 38) ,不同程度H pylori定植密度组间检出率有显著性差异 (

温阳化浊清解方对Hp感染GES-1细胞IceA 、SabA基因及HSP70、TRL4表达的影响

目的探讨温阳化浊清解方对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染人胃黏膜上皮细胞(GES-1)IceA、SabA基因及HSP70、TRL4表达的影响。方法制备幽门螺杆菌感染GES-1体外模型。实验分组为空白组、模型组、西药组、低、中、高浓度中药组(10,20,40μg/ml)。空白组为正常人GES-1细胞,不予任何处理;模型组为Hp感染后人GES-1细胞;西药组为标准四联杀菌药干预;低、中、高中药组分别以上述浓度中药进行干预。干预完成后,采用PCR法分别检测各组细胞中幽门螺杆菌IceA、SabA基因表达,采用Western斑点印迹技术进行HSP70及TRL4表达水平的检测。结果IceA1、IceA2、SabA模型组较空白组mRNA转录水平变化均明显上升,差异性明显(P<0.05)经药物干预后,各组mRNA转录水平均下降差异显著(P<0.05),温阳化浊清解方在降低IceA2mRNA转录水平表达方面存在量-效关系,随浓度梯度升高而增强。SabA基因mRNA转录水平变化,高浓度中药组优于其余几组,差异有特异性(P<0.05)。且在降低Sa-bA基因mRNA转录水平方面存在量-效关系。与空白组相比,各组样本TLR4、HSP70蛋白相对表达量及IL8水平均升高(P<0.05)。与模型组相比,西药组、温阳化浊清解方各浓度组TLR4、HSP70蛋白相对表达量及IL8水平均明显降低(P<0.05)。结论温阳化浊清解方能增强Hp感染后人胃黏膜上GES-1活力,降低细胞凋亡率,抑制IceA、SabA基因表达和HSP70、TRL4蛋白表达,抑制IL8,减轻炎症,这可能是其抑制Hp相关胃炎的作用机制。

冰核细菌Erwinia ananas 110冰核基因克隆和序列分析

从作者自行分离的冰核细菌(Erwinia ananas 110)中克隆到我国第1个细菌冰核基因,并完成其序列测定和分析。所克隆基因编码区全长3921bp,编码1306aa,氨基酸序列明显分为3个区即N-端(161aa)、C-端(41aa)的单一序列区和中部的高度重复序列R区(1104aa),以16氨基酸为重复单元的R区占整个编码序列的84.5％。序列分析表明我们所克隆的基因为一个新冰核基因,将其命名为iceA,该基因已在GenBank上登录,登录号为:AF387802。

浙江地区幽门螺杆菌优势基因型研究

目的研究浙江地区幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)的优势基因型并探讨各基因在不同胃十二指肠疾病患者中Hp的差异。方法从胃十二指肠疾病患者的胃粘膜活检组织中分离培养到Hp 129株,抽提基因组DNA后用PCR检测Hp的cagA、vacA、iceA及babA2等基因的分布,用卡方检验分析各基因在不同胃十二指肠疾病中Hp的差异。结果129株Hp中cagA的阳性率为99.2%(128/129),vacA sla基因型阳性率为94.6%(122/129),vacA m2为83.7%(108/129),iceA1为84.5%(109/129),iceA2为46.5%(60/129),babA2阳性率为81.4%(105/129)。消化性溃疡患者Hp的vacAm2基因阳性率高于慢性胃炎患者Hp(P<0.05),其余基因在不同类型疾病中的分布无统计学差异(P>0.05)。结论浙江地区Hp菌株的优势基因型为cagA,vacAsla/m2,iceAl,babA2;消化性溃疡患者Hp的vacAm2基因阳性率明显高于慢性胃炎患者。

云南汉、白、纳西族人群幽门螺杆菌的基因型与致病性

目的:探讨云南白族、纳西族与汉族幽门螺杆菌(Hpylori)菌株vacA、cagA、cage、iceA1、iceA2和babA2基因型与上消化道疾病的关系.方法:选取Hpylori相关慢性胃炎和消化性溃疡患者的胃黏膜,分离培养Hpylori菌株;用PCR方法检测云南白族、纳西族与汉族菌株的vacA基因亚型及cagA、cagE、iceA和babA等基因;通过组织病理学观察胃黏膜炎症等级和Hpylori定植密度等级.结果:iceA1检出率在重度慢性胃炎组和重度Hpylori定植密度组明显高于中度慢性胃炎组和中度Hpylori定植密度组.babA2基因在无、轻度、中度和重度Hpylori定植等级中的检出率分别为12.5%(1/8)、26.5%(9/34)、89.7%(26/29)和97.4%(37/38),不同密度组间检出率有显著性差异(P<0.05),其中,中重度组的检出率要高于另两组.而慢性胃炎、消化性溃疡组,胃黏膜炎症等级和Hpylori定植密度组间,vacA基因亚型和cagA、cagE、iceA2基因型的检出率及其在三民族间均无显著性差异.结论:云南患者感染的Hpylori菌株iceA1和babA2基因与Hpylori致病性有关,而vacA基因亚型和cagA、cagE、iceA2基因型与致病性无关.

幽门螺杆菌iceA、cagA相关性研究

目的研究幽门螺杆菌(Helicobecterpylori)cagA、iceA与胃十二指肠疾病的关系及二者的相关性。方法从138例胃黏膜活检组织中分离培养H·pylori,PCR扩增检测cagA、iceA,并测序。结果cagA+/iceA1+/iceA2+在消化性溃疡中的阳性率明显高于慢性胃炎和胃癌。cagA、iceA1同时阳性为55·4%(62/112),cagA阴性iceA1阳性为11·5%(3/26),存在统计学差异。cagA、iceA2同时阳性为51·8%(58/112),cagA阴性iceA2阳性为30·8%(8/26),存在统计学差异。结论cagA+/iceA1+/iceA2+菌株可能与消化性溃疡的发生、发展相关,cagA和iceA1可能存在协同作用,和iceA2关系不大。