小鼠免疫刺激后乳腺pIgR mRNA转录及乳特异性IgA含量的变化

为了探讨免疫刺激后昆明小白鼠乳腺pIgR基因mRNA转录和特异性IgA含量变化。选择48只健康受孕昆明小白鼠,分为A、B、C、D组,分别于分娩后第4天注射灭菌生理盐水、Lipase+灭菌生理盐水、空ISCOM和Lipase+LTB+ISCOM,每组注射12只,并于分娩后第8天和12天采集小鼠乳样、血样和乳腺组织,用间接ELISA法测定乳和血浆中的特异性IgA含量,用Real Time-PCR检测小鼠乳腺中pIgR基因的相对转录水平。结果表明,免疫刺激对小鼠血浆中特异性IgA的含量无显著性影响(P>0.05),但是免疫B组和D组中小鼠分娩后12 d的乳中特异性IgA含量显著高于8 d乳中的特异性IgA含量(P<0.05)。RealTime-PCR相对定量也表明,免疫B组和D组中小鼠分娩后12 d的乳腺pIgR基因转录水平显著高于8 d乳腺pIgR基因转录水平(P<0.05)。免疫刺激后小鼠乳腺pIgR基因转录水平的提高能增加乳中特异性IgA的含量。

鱿鱼墨多糖改善小鼠肠粘膜免疫及作用机制的研究

目的探讨鱿鱼墨多糖对小鼠肠粘膜免疫的影响及其作用机制。方法将50只Balb/c小鼠随机分为5组:正常组、模型组、低、中、高鱿鱼墨多糖剂量组。采用环磷酰胺腹腔注射法制备免疫低下小鼠模型,并通过灌胃给予各剂量组小鼠鱿鱼墨多糖饲养28 d。检测胸腺指数/脾指数,取小鼠空肠段检测肠粘膜SIgA的含量,观察北太平洋鱿鱼墨多糖对肠道粘膜免疫的保护作用。采用酶联免疫反应和RT-PCR方法,检测了pIgR的蛋白质与mRNA表达量。结果与正常组相比,模型组小鼠胸腺指数、脾指数分别下降44.4%、19.4%,肠道SIgA的表达量下降40.9%,免疫组织化学染色也显示肠道IgA明显下降;与模型组相比,鱿鱼墨多糖可以改善免疫低下小鼠的机体免疫功能,并且呈剂量依赖性,胸腺指数在模型组水平上分别升高了53.5%、67.6%、61.8%,脾指数分别升高了12.7%、13.1%、15.6%。鱿鱼墨多糖还可以提高小鼠肠粘膜SIgA的分泌功能,相比于模型组小鼠,鱿鱼墨多糖组小鼠SIgA的分泌量分别升高了43.9%、63.6%、68.7%;免疫组织化学染色发现鱿鱼墨多糖组小鼠肠道固有层中IgA明显增加,且ELISA检测发现鱿鱼墨多糖高剂量组小鼠小肠pIgR的蛋白表达量明显增加。结论北太平洋鱿鱼墨多糖能够促进小鼠肠粘膜SIgA的分泌,并呈剂量依赖关系,作用机制可能与其促进浆细胞分泌IgA以及促进上皮细胞分泌pIgR有关。

RMK-03^(TM)皮肤黏膜护理喷剂对上呼吸道黏膜免疫功能低下小鼠免疫调节机制的影响

目的:通过寒冷致小鼠上呼吸道黏膜免疫功能低下(upper airway immunity dysfunction,UAID)模型的实验,基于免疫球蛋白A单克隆抗体(immunoglobulin A monoclonal antibody,IgA MAb)阻断新型冠状病毒(SARSCoV-2)的Spike-ACE 2相互作用探究RMK-03^(TM)喷剂对上呼吸道黏膜的免疫调节机制。方法:将40只SPF级ICR小鼠分为正常组、UAID模型组、利巴韦林喷雾剂组、RMK-03;喷雾剂组4组,每组10只;利巴韦林喷剂组和RMK-03^(TM)喷剂组先给予口腔喷雾0.1 mL/只q12h,给药3 d,;第3 d,除正常组外其他各组小鼠复制UAID模型,即将小鼠放入-20℃寒冷环境中15 min,之后在室温适应1 h,经腹腔注射毛果芸香碱滴眼液(0.25 mL/只),2 min后以安乐处死小鼠,取口腔、咽喉部黏膜组织进行HE病理学切片检查,以Western blotting法考察其IgA、pIgR蛋白的表达,采用ELISA法检测细胞因子IL-4、IL-6和IFN-γ、TNF-α含量;采用免疫组化法检测ACE 2和ACE的表达情况。结果:UAID模型组小鼠唾液中SIgA含量显著低于正常组(P<0.05),提示模型复制成功;与正常组相比,UAID模型组小鼠的口腔和咽喉黏膜组织可见轻度间质水肿、小血管扩张充血,中性粒细胞伴有淋巴管轻度扩张水肿;UAID模型组小鼠口腔、咽喉部黏膜组织IgA、pIgR蛋白表达,IgA相关细胞因子IL-4、IL-6的含量及pIgR相关细胞因子IFN-γ、TNF-α的含量均显著低于正常组(P<0.05),该组的ACE、ACE 2平均光密度值(IOD/area)均显著性高于正常组(P<0.05);利巴韦林喷剂组和RMK-03;喷剂组的上述主要指标均在不同程度上优于UAID模型组,且后者的上述主要指标优于前者。结论:RMK-03^(TM)皮肤黏膜护理喷剂通过调节局部黏膜免疫屏障低下相关IgA的含量,抑制呼吸道黏膜中ACE 2活性表达,间接推测其阻断SARS-CoV-2的Spike-ACE 2相互作用以提供黏膜免疫。

动物多聚免疫球蛋白受体研究概况

多聚免疫球蛋白受体(polymeric immunoglobulin receptor,pIgR)是主要组织相容性复合物(MHC)家族中的重要成员,是分泌性免疫系统(SIS)的重要组成成分,在IgA/IgM的转运和黏膜免疫中发挥着重要的作用。作者结合近年来的研究综述了pIgR的分子结构、生物学功能和研究概况。