散射比浊法检测静注人免疫球蛋白中IgA残留量的方法学评价

目的建立基于散射比浊法检测静注人免疫球蛋白中免疫球蛋白A(IgA)残留量测定的方法并对其进行评价。方法使用德国西门子公司生产的BN ProSpec^(■)全自动蛋白分析仪及其配套IgA测定试剂盒(散射比浊法)和人IgA国家标准品,建立散射比浊法测定供试品中IgA残留量并进行方法学验证。供试品为采用低温乙醇蛋白分离工艺制备的静注人免疫球蛋白(pH4)和层析工艺制备的新型静注人免疫球蛋白。结果检测得到建立的散射比浊法测定IgA残留量的3次定标曲线的平均偏差分别为1.08%、0.95%和1.54%,质控品的3次检测偏差分别为4.00%、-2.30%和-0.20%,定标和质控结果良好。专属性试验中,含100 g/L麦芽糖对照品1和含20 g/L甘氨酸对照品2的IgA平均回收率分别为102.7%和105.8%。2种供试品的重复性试验的相对标准偏差RSD值分别为3.9%和1.9%;中间精密度试验的RSD值分别为3.6%和2.3%。供试品存放时间耐用性试验中各时间点的差异值均<10%;不同批号试剂盒耐用性试验测定2种供试品的RSD值分别为2.8%和2.2%。准确度试验中,加标静注人免疫球蛋白(pH4)的平均回收率分别为94.2%、101.7%和96.2%;加标新型静注人免疫球蛋白的平均回收率分别为102.8%、106.3%和99.7%。定量限试验的平均回收率为101.0%,RSD为4.0%。结论散射比浊法具有专属性强、精密度和准确度高、重复性好、操作简单快速、可自动化等优点,可用于静注人免疫球蛋白(pH4)和新型静注人免疫球蛋白制品中IgA残留量测定。

静注人免疫球蛋白(pH 4)中IgA残留量的不确定度分析

目的:紫外-可见分光光度法测定静注人免疫球蛋白中IgA残留量,并对其进行不确定度评定。方法:采用紫外-可见分光光度法,测定波长340 nm,比色皿狭缝1 nm,依据操作过程及测定环节引入的影响因素,对各个分量进行评估。结果:静注人免疫球蛋白(pH 4)中的IgA残留量结果为103μg·mL^(-1),扩展不确定度为10μg·mL^(-1)(k=2)。结论:本实验首次对静注人免疫球蛋白(pH 4)中的IgA残留量不确定度分量进行分析和评定,为血液制品检验提供了影响因素来源分析,为提高检验结果准确性提供了数据分析。

两种高浓度静注人免疫球蛋白中IgA残留量检测方法的验证及比较

目的对酶联免疫法与散射比浊法检测高浓度静注人免疫球蛋白(human immunoglobulin for intravenous injection,IVIG)中IgA残留量进行验证及比较。方法分别验证两种方法的线性范围、准确度、重复性、中间精密性、专属性,并对两种方法进行比对分析。用两种方法检测7批次高浓度IVIG中的IgA残留量,并与中国食品药品检定研究院检测结果进行比对。结果酶联免疫法IgA浓度在12.5~800 ng/mL范围内与A450呈良好的线性关系(r=0.99996),散射比浊法IgA浓度在0.261~8.35 mg/L范围内标准曲线均值偏差为0.56%;两种方法的加样回收率分别为103.32%和89.82%;重复性和中间精密性的RSD均小于8%;甘氨酸辅料对两种方法测定IgA残留量干扰较小。两种方法测定3批IVIG中IgA残留量结果差异无统计学意义(P>0.05);委外检测的7批次高浓度IVIG中IgA残留量略低于企业自检结果。结论酶联免疫法与散射比浊法均可快速、简便、准确地测定高浓度IVIG中IgA残留量,可用于产品质量控制。