鉴定IgE BF/sCD23的IgE介导的间接Western印迹技术的建立

基于 Western 印迹技术的基本原理,利用 IgE 结合因子/可溶性 CD23(IgEBF/sCD23)能够和 IgEFC 端特异性结合的特点,在系统研究了包括:IgE 浓度,反应时间及转移条件等数种因素后,首创了 IgE 介导的间接 Western 印迹技术.用于对 SDS—PAGE 电泳分离后样品中 IgEBF/sCD23特异性片段进行鉴定.实践证明:该法具有重复性高,操作简便及节约资金等优点.运用该技术,我们确定了 RPMI8866细胞上清中具有 IgEBF 活性的五种不同分子量的多肽.此方法的建立对开展 IgEBF/sCD23的研究以及其它特异性分子的鉴定都具有参考价值.

哮喘患儿淋巴细胞IgE低亲和力受体(CD23)的表达和血清sCD23含量变化

应用免疫荧光标记流式细胞仪分析技术,对48例发作期、30例缓解期哮喘患儿和30例正常儿童的淋巴细胞IgE低亲和力受体(CD23)阳性率进行检测,同时检测血清中sCD23和IgE含量。结果显示:哮喘发作期和缓解期淋巴细胞CD23阳性率、血清sCD23和IgE含量均显著高于正常儿童;发作期患儿CD23阳性率与血清IgE含量呈显著正相关,与血清sCD23含量无相关性;血清sCD23与IgE含量之间在各组内均无相关性。提示CD23和sCD23与哮喘的发病有关。

血清sCD23在尿毒症维持性血液透析患者中的变化

目的 :观察尿毒症维持性血液透析患者应用不同种类透析膜对血清sCD2 3水平的影响 .方法 :采用双抗体夹心ELISA法 ,对尿毒症维持性血液透析患者采用醋酸纤维素膜(CA)、血仿膜 (HE)和聚砜膜 (PS)透析器进行透析 ,分为初用组和复用组检测透析过程中不同透析时间患者血清sCD2 3水平的变化 .结果 :尿毒症维持性血液透析患者首次使用透析器 (初用组 )透析开始后 1 5min时 ,血清sCD2 3水平迅速升高[CA (2 3± 1 1 )U/mL ,HE (1 8± 5 )U/mL ,PS (1 9± 8)U/mL],随着透析的继续进行 ,血清sCD2 3逐渐下降 ,透析结束时 [CA(1 5± 9)U/mL ,HE (1 2± 6 )U/mL ,PS (1 4± 7)U/mL]与透析前 [CA (1 3± 7)U/mL ,HE (1 2± 9)U/mL ,PS (1 2± 6 )U/mL]相比无显著性差异 (P >0 .0 5 ) .不同种类透析膜中 ,CA对血清sCD2 3的影响显著大于HE和PS(P <0 .0 5 ) ;透析器复用(复用组 )对血透患者血清sCD2 3水平无明显影响 .结论 :尿毒症维持性血透患者血透过程中血清sCD2 3水平规律性的变化 ,是导致患者机体免疫力下降的可能原因之一 ,而这些变化与透析膜的生物不相容性有关 ,HE和PS生物相容性优于CA 。

类风湿性关节炎患者sCD23测定的临床意义

目的：探讨ｓＣＤ２３ 在类风湿关节炎（ＲＡ） 发病中的作用。方法：采用固相酶联免疫分析（ＥＬＩＳＡ） 法检测３６ 例ＲＡ 患者血浆ｓＣＤ２３ 含量。结果：ＲＡ 患者血浆ｓＣＤ２３ 较献血员组明显升高（ Ｐ＜ ０ ．０１） ，而关节损伤组与献血员组间无显著差异，ＲＡ 患者血浆ｓＣＤ２３ 与ＣＲＰ呈正相关（ｒ ＝０ ．４６８ ，Ｐ＜ ０ ．０１） ，但与ＥＳＲ 间无相关性。结论：ｓＣＤ２３ 可能参与ＲＡ 的发病，血浆ｓＣＤ２３ 检测有助于对ＲＡ病情发展作出判断。

真核细胞源性sCD23促T细胞增殖效应分析

用自然裂解法提取的可溶性ＣＤ２３分子（ｓＣＤ２３）作用于体外培养的扁桃体单个核细胞，没有观察到任何显著效应。在系统研究ＰＨＡ预处理与Ｔ细胞增殖之间关系的基础上发现：粗提天然ｓＣＤ２３对经ＰＨＡ预活化２４或３６小时的扁桃体Ｔ细胞具有明显的促增殖作用。但ｓＣＤ２３在高浓度（≥１２８ｎｇ／ｍｌ）时可抑制Ｔ细胞增殖。包被ＣＤ２３ＭｃＡｂ的羊红细胞（ＳＲＢＣ）吸收实验证实，对Ｔ细胞产生ＴＣＧＦ样效应的有效成份是ｓＣＤ２３。用亲和层析纯化的ｓＣＤ２３进行效应分析也得到与粗提ｓＣＤ２３相同的结果，我们认为，ｓＣＤ２３不能直接活化Ｔ细胞，但可能促进经适当诱导后Ｔ细胞的增殖。活化可能诱导Ｔ细胞表达ｓＣＤ２３受体的假说，为一步研究ＣＤ２３分子介导的免疫细胞间相互作用提供了充分依据。

sCD23促LIF效应分析

对可溶性CD23(sCD23)的淋巴因子效应进行了初步研究。通过采用毛细管法对sCD23的白细胞移动抑制因子(LIF)效应观察,发现sCD23对PHA激活的正常人外周血白细胞具有促进LIF效应。据此认为,sCD23可能通过作用于活化后的T细胞而发挥其细胞因子样作用,促进LIF效应。

SLE患者血清中sCD137与sCD23的检测及临床意义

系统性红斑狼疮（SLE）是全身性自身免疫性疾病，近年来有多发的趋势，为了进一步探讨其发病机制，我们对62例SLE患者血清可溶性CD137（sCD137）、可溶性CD23（sCD23）及自身抗体进行了检测，现报道如下。

sCD23刺激效应T细胞蛋白磷酸化现象以及对其亚群的影响

在ｓＣＤ２３促Ｔ细胞增殖的最佳条件下，体外渗透化的活化Ｔ细胞经亲和纯ｓＣＤ２３的刺激后，比阴性对照多出６条发生磷酸化的蛋白带，分子量分别为＞１００ｋＤ、１００ｋＤ、８８ｋＤ、８４ｋＤ、７６ｋＤ和５２ｋＤ。用ＦＡＣＳ分析ｓＣＤ２３效应靶细胞中效应亚群的特征，结果显示：亲和层析纯ｓＣＤ２３可促使预活化Ｔ细胞中ＣＤ４￣＋ＣＤ８￣－与ＣＤ４￣－ＣＤ８￣＋亚群的比值由阴性对照的１．０８增高到１．５５。按细胞体积大小进一步取门分析，结果表明，该效应主要反映在小体积Ｔ细胞群中。本试验结果提示，ｓＣＤ２３可能参与Ｔ细胞的信号传递过程；ｓＣＤ２３的效应靶细胞可能是ＣＤ４￣＋Ｔ细胞亚群。

从RPMI8866细胞制备CD23分子最佳条件及提取方法的研究

建立从高表达CD23分子的RPMI8866细胞株分离制备CD23分子的两种方法:自然裂解法和木瓜蛋白酶水解法。比较了此两法的优劣,探讨了CD23回收量的影响因素,经Western blot-ting技术鉴定出制备品中18、37、42、45和86KDa的CD23片段。结果表明,上述方法简便、可靠、易行,且回收量较高。可供研究及分离其它膜分子参考。

过敏性紫癜患者可溶性CD_(23)水平的研究

目的 :探讨 s CD2 3 在过敏性紫癜 (H SP)发病中的作用。方法 :采用固相酶联免疫分析 (EL ISA)法检测 5 5例 HSP患者血浆 s CD2 3 的水平。其中急性期 2 8例 ,缓解期 2 7例 ,并以 2 5例健康体检者为对照组。结果 :HSP急性期患者血浆s CD2 3 含量较健康对照组明显升高 (P <0 .0 1) ,而 HSP缓解期患者与健康对照组间无显著差异。 HSP患者血浆 s CD2 3 水平与ESR呈正相关 (r =0 .46 2 ,P <0 .0 1) ,但与 CRP间无相关性。结论 :s CD2 3 与 HSP的发病密切相关 ,血浆 s CD2 3 水平检测有助于对

CD23在银屑病发病中的作用

为了解ｓＣＤ２３及ＣＤ２３在银屑病发病中的意义，采用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法及免疫组化法对３４例银屑病患者血清ｓＣＤ２３水平及皮损ＣＤ２３表达进行了测定，结果显示银屑病患者血清ｓＣＤ２３水平与对照组比较未见明显变化，表明ｓＣＤ２３及ＣＤ２３在银屑病发病中意义不大。

可溶性CD23的B细胞生长因子效应分析

应用本室提取、鉴定的可溶性 CD 23(SCD 23)作为刺激因子,观察分析其对正常人外周血淋巴细胞(PBL)的促增殖效应。首次表明,SCD 23对于正常人PBL无直接活化作用,而对由 SAC预刺激活化后的人外周血B淋巴细胞具有显著的促生长效应。IgE包被的羊红细胞(IgE-SRBC)吸收实验进一步证明了效应成份为具有IgE结合特性的可溶性分子。

变应性疾病患者血清IL-4、sCD23的研究

目的为了解几组变应性疾病患者血清 IL-4和 sCD23水平及 IL-4对 sCD23(CD23)产生的影响。方法采用 ELISA 法对荨麻疹、湿疹及过敏性鼻炎患者血清、外周血单-核细胞(PBMC)及培养条件下 IL-4、sCD23(CD23)水平及调控关系进行了研究。结果①3组疾病血清_IL-4及 sCD23水平均明显高于正常人对照组(P<0.05～0.01),sCD23与 IL-4之间具有明显的正相关关系(r=0.68～0.92,P<0.01);②rIL-4可促进 PBMC 产生和表达 sCD23(CD23),湿疹患者 rIL-4对 PBMC 产生 sCD23的诱导能力比正常对照组明显增强。结论 IL-4及 sCD23参与了变应性疾病的发展过程,IL-4诱导 PBMC 产生sCD23为时间效应关系。

sCD23在SLE患者血清中的检测

目的了解ｓＣＤ２３及ＣＤ２３在系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）发病中的变化及意义。方法采用双抗体夹心ＥＬＩＳＡ法、ＳＰ及ＡＰＡＡＰ免疫组化法检测ＳＬＥ患者血清ｓＣＤ２３水平、皮损及外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）ＣＤ２３表达，对ｓＣＤ２３及ＣＤ２３同ＡＮＡ、抗ｄｓＤＮＡ抗体关系进行了比较。结果①病人组血清ｓＣＤ２３水平〔（４．１０±３．１６）ｎｇ／ｍｌ〕与正常对照组〔（１．４８±０．４１）ｎｇ／ｍｌ〕比较显著增高（Ｐ＜０．００５），活动期水平明显高于静止期；②血清ｓＣＤ２３与ＡＮＡ滴度、抗ｄｓＤＮＡ抗体等具有明显的平行关系；③皮损表皮少数（３／９）弱表达ＣＤ２３，ＰＢＭＣ则明显表达ＣＤ２３。结论ＣＤ２３及ｓＣＤ２３在ＳＬＥ发病中有一定的意义，其主要作用可能与抗原处理和递呈以及促进Ｂ淋巴细胞分化、增殖产生自身抗体有关。

不同透析膜对维持性血液透析患者B细胞活化的影响

目的 观察尿毒症患者反映B细胞活化的血清sCD2 3 浓度水平的变化及不同种类透析膜对维持性血液透析患者血清sCD2 3 水平的影响。方法 采用双抗体夹心ELISA法检测尿毒症非透析患者 ,及使用不同种类透析膜透析器初用及复用 5次时分别观察透析过程中患者血清sCD2 3 水平的变化。结果 尿毒症血液透析患者透析前及尿毒症非透析患者血清sCD2 3 较正常对照组显著增高。血透过程中尿毒症血透患者血清sCD2 3 分子浓度水平规律性的变化。不同类型透析膜中 ,醋酸纤维素膜 (CA)对血清sCD2 3 的影响显著大于血仿膜 (HE)和聚砜膜 (PS) ;透析器复用对血透患者血清sCD2 3 水平无明显影响。结论 血透过程中血清sCD2 3 分子浓度水平规律性的变化 ,是导致机体免疫力下降的可能原因之一。HE膜和PS膜生物相容性优于CA膜 。

维持性血液透析患者应用不同透析膜血清sCD23的变化

血液透析(HD)是治疗尿毒症的主要方法之一，但HD不能改善患者的免疫功能，而HD相关因素如透析膜生物相容性等可导致尿毒症患者免疫功能障碍．严重影响透析患者的生存质量。sCD23是反映机体B淋巴细胞激活或免疫状况的指标之一。我们采用ELISA法检测尿毒症维持性血透(MHlD)患者应用不同膜材料透析器初用。