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亲和层析法纯化系统性红斑狼疮特异性60KDRo/SSA抗原 被引量:1
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作者 贺晨 《中国卫生检验杂志》 CAS 2005年第4期482-482,489,共2页
目的:建立亲和层析法纯化Ro/SSA自身抗原系统中60KD组分的方法。方法:从猪脾提ENA(可提取核抗原),以硫酸铵沉淀、离子交换层析进行初步纯化。挑选单纯抗60KDSSA抗体阳性的病人的血清,制备亲和层析柱。用ELISA法检测所制备的抗原。结果: ... 目的:建立亲和层析法纯化Ro/SSA自身抗原系统中60KD组分的方法。方法:从猪脾提ENA(可提取核抗原),以硫酸铵沉淀、离子交换层析进行初步纯化。挑选单纯抗60KDSSA抗体阳性的病人的血清,制备亲和层析柱。用ELISA法检测所制备的抗原。结果: 60KDSSA抗体阳性标准血清ELISA检测为阳性,Sm和RNP、Jo-1、Scl-70的标准抗血清为阴性。结论:该方法可获得高纯度的抗原,可用于ELISA检测等目的。 展开更多
关键词 亲和层析法 ro/ssa抗原 60kd 系统性红斑狼疮 ELISA检测 特异性 ELISA法检测 可提取核抗原 离子交换层析 抗体阳性 硫酸铵沉淀 亲和层析柱 抗原系统 初步纯化 标准血清 RNP 抗血清 高纯度 制备
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系统性红斑狼疮特异性抗原60KD Ro/SSA的提取和纯化
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作者 贺晨 《浙江实用医学》 2005年第4期230-230,240,共2页
目的建立从猪脾纯化Ro/SSA自身抗原系统中60KD组分的方法。方法从猪脾提取ENA(可提取核抗原),以硫酸铵沉淀结合离子交换层析分离ENA蛋白组分,并用对流免疫电泳检测60KDSSA抗原的活性,以得到纯化60KDSSA抗原的具体条件。结果60KDSSA抗原... 目的建立从猪脾纯化Ro/SSA自身抗原系统中60KD组分的方法。方法从猪脾提取ENA(可提取核抗原),以硫酸铵沉淀结合离子交换层析分离ENA蛋白组分,并用对流免疫电泳检测60KDSSA抗原的活性,以得到纯化60KDSSA抗原的具体条件。结果60KDSSA抗原在Tris-HCl缓冲液(pH8.3)中的硫酸铵沉淀范围是硫酸铵饱和度50%~60%。60KDSSA抗原在50mMTris-HCl缓冲液(pH8.3)+NaCl中的DE52离子交换层析洗脱范围为电导值35~40ms/cm。结论结合硫酸铵沉淀和DE52离子交换层析两种纯化方法所得的60KDSSA抗原相对于其它ENA有较高的纯度,并能有效分离中SSA中60KD、52KD两个组分。 展开更多
关键词 60kd ro/ssa 蛋白纯化 硫酸铵沉淀 离子交换层析 可提取核抗原 纯化方法 系统性红斑狼疮 特异性抗原 Tris-HCl缓冲液
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Role of M<sub>3</sub>Muscarinic Acethylcholine Receptor Antibodies as a New Marker in Primary Sjögren Syndrome
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作者 Silvia Reina Cecilia Pisoni +2 位作者 Roberto Arana Sabrina Ganzinelli Enri Borda 《Pharmacology & Pharmacy》 2017年第7期242-252,共11页
Aims: This paper investigates the presence of M3 muscarinic acetylcholine receptor autoantibody present in the serum of patients with primary Sj?gren syndrome (pSS). Main methods: We detected the levels of M3mAChR pep... Aims: This paper investigates the presence of M3 muscarinic acetylcholine receptor autoantibody present in the serum of patients with primary Sj?gren syndrome (pSS). Main methods: We detected the levels of M3mAChR peptide IgG, PGE2, IL-1β in serum of SS patients using the enzyme-linked immune sorbent assay (ELISA). To measure the quantity of nitrite/nitrate, we used Griess reagent system. Key findings: Titres of M3mAChR antibody in sera from SS patients are significantly enhanced compared to healthy subjects (control). The enhancement of these autoantibodies is accompanied by the increase of the levels of PGE2, IL-1β and nitrite/nitrate in serum. Under in vitro conditions, the synthetic human M3 peptide impaires the increment of M3mAChR antibody but not that of nati-Ro/SSA antibody. In positive anti-Ro/SSA antibody patients, the increment of M3mAChR peptide IgG and the measured pro-inflammatory substances is related. Significance: On this basis, anti M3mAChR peptide IgG can be said to act as a modulator of the immune system and to play a role in the host-chronic increment of proinflammatory substances in SS patients with positive Ro/SSA antibody. This association between the antibody and the pathogenesis of SS disease may result in useful predicting SS. 展开更多
关键词 Anti-ro/ssa antibody ANTI M3mAChR Peptide igg IL-1β PGE2 NITRIC Oxide
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线性免疫印迹法检测抗60 kD Ro/SSA IgG抗体的对比分析
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作者 劳小斌 何懿 +2 位作者 罗宇维 谭礼平 孙尔维 《中国卫生检验杂志》 北大核心 2014年第23期3415-3416,3419,共3页
目的评价5个不同厂家自身抗体谱线性免疫印迹法(LIA)试剂中的抗60 k D Ro/SSA Ig G抗体项目的一致性及符合率。方法收集本院54例自身免疫性疾病病人和10份2013年卫生部临检中心室间质评血清及30例健康人血清,同时使用酶联免疫吸附(ELISA... 目的评价5个不同厂家自身抗体谱线性免疫印迹法(LIA)试剂中的抗60 k D Ro/SSA Ig G抗体项目的一致性及符合率。方法收集本院54例自身免疫性疾病病人和10份2013年卫生部临检中心室间质评血清及30例健康人血清,同时使用酶联免疫吸附(ELISA)法和5个不同品牌LIA法试剂对血清中的抗60 k D Ro/SSA Ig G抗体进行检测,比较5个不同品牌LIA法试剂检测60 k D Ro/SSA Ig G抗体的一致性及总体符合率。结果 ELISA法试剂盒检测94例血清中阳性标本37例,阴性标本57例,同时进行的5种不同品牌LIA法抗核抗体谱试剂检测抗60 k D Ro/SSA Ig G抗体结果的总体符合率均超过90%,吻合系数均>0.8,说明一致性很好,但5种品牌均出现不相一致的阳性和阴性。结论 LIA法的抗核抗体谱检测试剂盒在检测抗60 k D Ro/SSA Ig G抗体项目中一致性很好,但检测结果可疑时应使用天然抗原包被的ELISA法试剂或双向扩散法进行复测。 展开更多
关键词 60 kd ro/ssa igg抗体 酶联免疫吸附法 线性免疫印迹法
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亲和层析法纯化系统性红斑狼疮特异性60KD Ro/SSA抗原
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作者 贺晨 《浙江省医学科学院学报》 2005年第1期13-14,48,共3页
目的建立亲和层析法纯化Ro/SSA自身抗原系统中60KD组分的方法。方法从猪脾提ENA(可提取核抗原),以硫酸铵沉淀、离子交换层析进行初步纯化。挑选单纯抗60KD SSA抗体阳性的病人的血清,制备亲和层析柱。用ELISA法检测所制备的抗原。结果... 目的建立亲和层析法纯化Ro/SSA自身抗原系统中60KD组分的方法。方法从猪脾提ENA(可提取核抗原),以硫酸铵沉淀、离子交换层析进行初步纯化。挑选单纯抗60KD SSA抗体阳性的病人的血清,制备亲和层析柱。用ELISA法检测所制备的抗原。结果60KD SSA抗体阳性标准血清ELISA检测为阳性,Sm和RNP、Jo-1、Scl-70的标准抗血清为阴性。结论该方法能获得高纯度的抗原,可用于ELISA检测等目的。 展开更多
关键词 亲和层析法 60kd ro/ssa抗原 系统性红斑狼疮 ELISA检测 特异性 ELISA法检测 可提取核抗原 离子交换层析 抗体阳性 硫酸铵沉淀 亲和层析柱 抗原系统 初步纯化 标准血清 RNP 抗血清 高纯度 制备
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发热伴血小板减少综合征病毒核蛋白特异结合宿主细胞60kD SSA/Ro
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作者 郑斌 王涛 +5 位作者 张硕 李阿茜 李川 张全福 梁米芳 李德新 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期233-237,共5页
为了初步探索发热伴血小板减少综合征病毒(Severe fever with thrombocytopenia syndrome virus,SFTSV)核蛋白(nucleoprotein,NP)对宿主细胞免疫功能的影响。将SFTSV NP和NSs蛋白的编码基因插入真核表达载体VR1012中,通过免疫共沉淀(IP)... 为了初步探索发热伴血小板减少综合征病毒(Severe fever with thrombocytopenia syndrome virus,SFTSV)核蛋白(nucleoprotein,NP)对宿主细胞免疫功能的影响。将SFTSV NP和NSs蛋白的编码基因插入真核表达载体VR1012中,通过免疫共沉淀(IP)、SDS-PAGE、质谱检测及蛋白质免疫印迹等方法寻找宿主细胞中与NP相互作用,同时又与免疫功能有关的蛋白质分子,并利用细胞免疫荧光方法检测SFTSV NP与该分子在细胞中的共定位情况。IP和质谱检测结果显示NP能与免疫功能相关的60kD SSA/Ro蛋白发生特异性结合,细胞免疫荧光试验进一步显示NP与60kD SSA/Ro蛋白在细胞质中存在共定位。提示SFTSV可能通过其核蛋白与免疫相关分子60kD SSA/Ro蛋白发生特异性结合,从而引起机体一系列的免疫反应和临床症状。 展开更多
关键词 发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV) 核蛋白(NP) 60kd ssa ro
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