紫外分光光度法测定动物血清IgG含量方法的研究

目的建立一种操作简便,快速,灵敏度高,重复性好的测定动物血清IgG制品含量的方法。方法研究紫外分光光度法测定动物血清IgG含量的可行性,并将其与免疫单扩散法进行方法学的比较。结果相比免疫单扩散法,紫外分光光度法得到的结果稳定,线性相当好。结论紫外分光光度法可用于测定动物血清IgG制品含量,该测定方法数据稳定,线性关系好,准确性高,操作简便。

雏鸡新城疫免疫后部分黏膜中抗新城疫IgG的检测

利用新城疫Ⅳ系对不同免疫途径免疫后雏鸡的泪液、气管液、血清中抗新城疫病毒的HI抗体效价进行了检测。结果表明:黏膜免疫途径比非黏膜免疫途径更活跃地激活黏膜免疫应答部位产生IgG,并且黏膜免疫后,离Ag刺激近的部位免疫应答较强。黏膜免疫应答部位的HI抗体在一免后要比血清中抗体效价高,而二免后其IgG含量要低于血清中IgG含量。

不同个体牛的血清IgG水平的差异分析

研究了仔牛哺乳期血清IgG水平的变化及血清IgG含量与牛龄、性别的关系。结果表明:仔牛吃完母乳24h后血清中的IgG达到峰值(65.58±9.87)mg.mL-1,提取免疫球蛋白的原料血液应选择的牛龄在8年以下为宜;当以6￣8年的牛血液作为原料时,母牛血液IgG含量比公牛血液IgG含量高1%。

饱和硫酸铵法提取IgG工艺的优化

为获得最佳的IgG提取工艺参数,采用单因素试验设计,借助SDS-PAGE分析方法对温度、静置沉降时间、pH值三个因素进行了优化。结果表明:最佳工艺参数分别为提取温度30℃,静置时间45 min,pH值7.0。另外对提取温度、静置时间和pH值进行了三因素三水平正交试验设计,结果表明:提取温度20℃,静置时间45 min,pH值7.4时,IgG含量最高,达到了88.08%。

液相色谱法分析牛血清中IgG的方法研究

本文以牛布氏菌病血清为例,阐述了采用两种不同原理的高效液相色谱法测定血清中IgG含量的方法。通过实验,筛选出利用Protein G柱测定血清中IgG含量的方法比较理想,该方法精密度试验的相对标准偏差为0.2%,平均回收率为95.71%,回收率试验的相对标准偏差为0.9%。并利用该方法测定不同的牛布氏菌病阳性血清中IgG的含量,与其效价(补体结合试验测定)进行比较,可知在一定范围内牛布氏菌病阳性血清中的IgG含量与其效价存在一定的趋势性对应关系。

复合微生态制剂对武定鸡公鸡生长性能、盲肠菌群和血清IgG含量的影响

为探讨复合微生态制剂对武定鸡公鸡生长性能、盲肠菌群和血清IgG含量的影响,试验采用单因子完全随机设计方法,挑选刚出壳武定鸡公鸡500只,随机分成5组,每组5个重复,每个重复20只。其中,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组饲喂三个不同剂量(3.12×10~9、2.75×10~7、1.38×10~5cfu/mL)的微生态制剂,Ⅳ组为空白对照,Ⅴ组为抗生素组,饲喂期60 d。测量指标为各阶段生长性能、免疫器官指数、盲肠菌群数、血清IgG含量等。结果显示:复合微生态制剂饲喂后均相应提高了鸡只平均日增重、料重比、部分免疫器官指数、盲肠内乳酸杆菌、血清IgG含量,相应降低鸡只死淘率、盲肠内容物pH值及大肠杆菌、沙门菌的数量,差异显著(P<0.05),综合分析,2.75×10~7cfu/mL添加剂量效果较显著。研究表明,复合微生态制剂对武定鸡公鸡生长性能、盲肠菌群和血清IgG含量的影响在添加剂量为2.75×10~7cfu/mL可达显著效果。

改良火箭免疫电泳法测定静脉注射用丙种球蛋白的IgG含量

目的 建立一种特异性的检测静脉注射用人免疫球蛋白中的 Ig G含量的方法。方法 用火箭免疫电泳法 ,以不同浓度的甲醛对 Ig G甲酰化处理 ,再进行免疫电泳。用 Ig G标准品建立标准曲线 ,测定样品中的Ig G含量。结果 用该法制备的标准曲线有良好线性关系 (r=0 .996 7)。对 3批样品做重复性测定 (n=6 ) ,其百分含量分别为 5 .37%± 0 .2 1% ,5 .2 8%± 0 .39%和 5 .80 %± 0 .30 % ,重复性好。

婴幼儿配方乳粉中IgG活性质量浓度的测定

为经济、快速、准确的测定婴儿配方乳粉中IgG的活性质量浓度,建立了ELISA试剂盒。以质量浓度为5mg/L的兔抗牛IgG(37℃,3h)加4℃过夜包被酶标板,1︰250稀释度的HRP-兔抗牛IgG作为酶标二抗37℃温育1h,TMB底物溶液(150μL的TMB使用液+30μL的H2O2+10mL底物缓冲液)反应15min,酶联检测仪读出OD450nm值。应用上述条件制作试剂盒。结果表明,应用试剂盒制作的标准曲线方程为y=225.45x2-21.237x-1.4713,相关系数R2=0.9997,在4℃条件下保存至少2个月,回收率在0.93～1.06之间。应用试剂盒检测婴幼儿配方乳粉中的IgG,具有特异性强、灵敏、稳定和易于推广等优点。

免疫酸奶的制备

本实验以新鲜免疫常乳为原料，经离心脱脂，采用传统工艺制做既营养又保健的免疫酸乳。研究中发现，免疫酸乳中，IgG含量及活性基本保持不变，保加利亚乳酸杆菌和嗜热链球菌不分解IgG，同时，没有发现免疫常乳中特异性IgG对发酵剂的发酵能力有不良影响。

共轭亚油酸对小白鼠身体组成的影响

饲料中添加不同剂量共轭亚油酸喂养 4周龄小白鼠 4周。实验结果表明 ,血清中Chol、HDL和LDL含量的平均值随着共轭亚油酸添加量的增加而升高 ,而Chol/HDL的比值则几乎保持不变。饲料中添加 0 .5 %的共轭亚油酸对血清中甘三酯浓度影响不大 ,基本上类似于对照组的含量 ;当共轭亚油酸的添加量达到 1%时 ,与对照组间差异较大。共轭亚油酸对血清中免疫球蛋白含量影响不大。小白鼠身体水分和蛋白质含量分析结果表明 ,饲料中添加共轭亚油酸增加了水分和蛋白质含量。此外 ,共轭亚油酸能显著降低小白鼠身体的脂肪含量 ,这主要通过抑制LPL活性和增加肉碱棕榈酰转移酶活性来实现 ;同时通过抑制肝脏中硬脂酰辅酶A去饱和酶mRNA的表达来改变其脂肪酸组成。

不同泌乳期牛初乳主要成分指标的变化规律

本文对荷斯坦牛不同泌乳期脱脂初乳的酸度、比重、蛋白含量、活性IgG含量的变化规律进行了分析。结果表明，乳牛产犊后前三天内的脱脂初乳具有较高的开发价值，脱脂初乳的酸度、比重、蛋白和IgG含量变化近似呈二次曲线规律。

特定蛋白检测仪检测血浆IgG含量方法的验证及其应用

目的对特定蛋白检测仪BN-P检测血浆IgG含量的散射比浊法(nephelometry)进行验证,并用于层析法制备IgG的工艺过程监控。方法使用BN-P和IgG相关试剂对检测IgG含量的散射比浊法进行线性和范围、准确度、精密度、专属性、耐用性验证,并进行样品添加试验,将用该方法检测5批IgG成品的结果与凯氏定氮法比较,同时检测层析法制备的3批IgG工艺过程样品中IgG含量。结果用该方法检测蛋白SL标准品中IgG的线性范围为0.107~0.003 34 g/L;高、中、低浓度的SL/H(高水平)蛋白质控品的批内准确度为87.60%~91.05%,批间准确度为88.5%~90.5%;批内精密度CV值为1.85%~3.65%,批间精密度CV值为2.46%~3.16%;检测方法不受血浆白蛋白的干扰,专属性良好;样品经反复冻融5次以内检测,耐受性良好,5次以上耐受性较差;样品添加试验的回收率在90.2%~93.1%之间。该方法检测5批IgG成品中IgG含量,与凯氏定氮法相比差异无统计学意义(P>0.05);该方法检测3批IgG工艺过程中间品重复性较好,步骤回收率一致,工艺稳定。结论特定蛋白检测仪BN-P检测血浆IgG含量的散射比浊法准确可靠,可用于IgG制备工艺的过程监控。

中药提取物对兔出血症疫苗免疫效果的影响

为筛选对兔病毒性出血症(RHD)疫苗有免疫增强作用的中药提取物,本研究将50只30日龄家兔随机分为5组,分别为空白对照组、免疫对照组和3个给药组。饲养至35日龄时,除空白对照组外,其余各组均皮下注射2 m L RHD灭活疫苗。在免疫前3天和免疫后3天,3个给药组分别肌肉注射黄芪多糖、淫羊藿多糖和党参多糖溶液1 m L(浓度按多糖含量4mg/kg体重计),空白对照组和免疫对照组分别肌肉注射1 m L生理盐水。免疫后第7天、14天、21天和28天,各组随机抽取5只静脉采血,测定抗体水平、器官指数和免疫球蛋白Ig G含量。结果表明:3种中药提取物黄芪多糖、淫羊藿多糖和党参多糖对RHD疫苗的免疫效果具有增强作用,可作为RHD疫苗免疫增强剂开发。

RP-HPLC法测定注射用重组人B淋巴细胞刺激因子受体-抗体融合蛋白的含量

目的:建立测定注射用重组人B淋巴细胞刺激因子受体-抗体融合蛋白(简称TACI-Fc)含量的方法。方法:采用反相高效液相色谱法。色谱柱为VydacC18,流动相A液为含0.1%三氟乙酸的水溶液,流动相B液为含0.1%三氟乙酸的乙腈溶液,梯度洗脱,流速为1.3mL·min-1,检测波长为280nm。结果:TACI-Fc进样量在5.0～20.0μg范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.9997);方法平均回收率为99.71%,RSD=1.14%(n=9)。结论:本方法操作简便、重复性好、结果准确,适用于测定注射用TA-CI-Fc的含量。