丁型肝炎病毒HDV-IgM筛查状况与感染患者临床特征分析

目的了解乙型肝炎人群丁型肝炎病毒感染筛查情况及感染患者临床特征。方法回顾性分析2014年1月至2023年10月我院乙型肝炎病毒感染(HBsAg阳性)患者丁型肝炎感染筛查(HDV-IgM)结果,分析筛查比例变化及阳性结果临床情况,收集丁型肝炎感染患者(HDV-IgM阳性)的临床资料,与HDV-IgM阴性乙型肝炎患者比较,总结丁型肝炎感染患者的临床特点。结果近10年乙型肝炎感染患者中HDV-IgM的平均筛查比例仅有3.60%(18533/514271),其中2014年的筛查比例最高,为6.67%(3407/51073),2020年的筛查比例最低,为1.84%(855/46413)。2014-2020年筛查比例呈逐年下降的趋势,2021年开始逐渐上升。HDV-IgM筛查阳性共45例,年龄(43.31±13.59)岁(1~80岁),男23例,女22例,其中有1例是乙肝阴性(HBsAg和HBV DNA均阴性)。地区分布是居住在北京的国际友人(主要为蒙古国)27例(60.00%);内蒙古自治区11例(24.44%);北京市4例(8.89%);河北省2例(4.44%);河南省1例(2.22%)。HDV-IgM阳性组与HDV-IgM阴性组比较,年龄、性别、HBV DNA水平差异无统计学意义情况下,HDV-IgM阳性组HBeAg阳性率明显低于HDV-IgM阴性组(P=0.001),且HDV-IgM阳性组ALT、AST和GGT高于HDV-IgM阴性组(P均<0.001)。HDV-IgM阳性组与HDV-IgM阴性组乙肝五项模式分布具有显著性差异(P<0.05)。结论近10年,丁型肝炎的筛查率低,阳性率不高,发病率高的地区应重视HDV的筛查,提高诊断率。HDV感染会加重肝炎病情程度,值得重视。

B亚型患者血清不规则抗B抗体的检测分析

目的分析B亚型(Bw)患者血清中存在IgM型不规则抗B抗体的血型血清学检测结果及其临床意义。方法对ABO血型正反定型不一致或交叉配血不相合的患者血标本,采用抗A、抗B、抗AB、抗H定型试剂和不同试验方法进行正反定型,采用吸收放散试验、直接抗人球蛋白试验及ABO血型以外不规则抗体筛查进行检测鉴定。对需要输血的B亚型及血清中存在不规则抗B抗体的患者,选择O型悬浮红细胞或洗涤红细胞进行配合性输血治疗。结果15例患者红细胞与抗B定型试剂在22℃立即离心,凝集强度弱于1+(1+^(w)),置4℃反应15min,离心2次,凝集强度强于1+(1+^(s))~2+(2+^(s))。患者红细胞与抗AB定型试剂的凝集强度大于抗B定型试剂,与抗H定型试剂的凝集强度小于O型红细胞。在试管法反定型中,患者血清与B型试剂红细胞混合,在22℃立即离心,凝集强度为1+^(w)~1+^(s);置4℃反应15min,离心2次,凝集强度为1+^(s)~2+。结果显示患者血清中存在凝集强度为1+~2+的IgM型不规则抗B抗体。结论B亚型患者B抗原性表达很弱或血清中存在IgM型不规则抗B抗体,在22℃以下进行检测可引起ABO血型正反定型不一致或交叉配血不相合,B亚型不配合的输血可产生不规则抗B抗体或引起溶血性输血反应。

潜慢型克山病患者柯萨奇B组病毒特异性IgM的检测

目的研究柯萨奇Ｂ组病毒（ＣｏｘｓａｃｋｉｅｖｉｒｕｓＢ，ＣＶＢ）感染与克山病发病的关系。方法采用间接酶联免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）对陕西省黄陵县克山病病区潜、慢型克山病患者血清ＣＶＢ１－６ＩｇＭ和ＣＶＢ１－６ＩｇＧ进行检测。结果①潜在型、慢型克山病组血清ＣＶＢ１－６ＩｇＭ抗体阳性率明显高于非病区健康对照组（２８．５７％ｖｓ７．５％，Ｐ＜０．０５），但明显低于心肌炎组（６０．００％，Ｐ＜０．０５）。②潜、慢型克山病组血清ＣＶＢ１－６ＩｇＧ抗体阳性率明显高于非病区健康对照组（３８．１０％ｖｓ７．５％，Ｐ＜０．０５），但与心肌炎组比较无明显差异。结论病区潜。

乙肝患者 HBV 载量与IgA，IgG，IgM 及 C3，C4相关性研究

目的：旨在探讨深圳市乙肝患者 HBV-DNA 与免疫球蛋白（IgA，IgG，IgM）和补体（C3，C4）的关系。方法首先采用实时荧光定量 PCR 技术检测210例乙肝患者的 HBV-DNA，按检测结果10n copies／ml 进行分组，可分为102～108 copies／ml 7组实验组。然后对7组实验组和对照组同时进行 IgA，IgG，IgM 及 C3，C4检测，分析乙肝患者 HBV-DNA 与IgA，IgG，IgM 及 C3，C4的相关性。结果乙肝患者 HBV-DNA 为105～108 copies／ml 时，均出现了 IgA，IgG，IgM 的增高（U ＝12.43，10.96，6.42，P ＜0.01）及 C3，C4的降低（U ＝8.37，6.0，P ＜0.01），而在102～104 copies／ml 只出现 IgA 和 IgM的增高（U ＝2.36，2.04，P ＜0.05），其他指标差异均无统计学意义。在7组实验组的两两比较中，只有104组与105组出现了显著性的变化（IgA，IgM 增高，C4降低；U ＝2.39，2.46，2.09，P ＜0.05，IgG 增高，U ＝3.25，P ＜0.01），而其他低载毒量组之间和高载毒量组之间均无显著性差异。结论乙肝患者体内不同的 HBV 载量会引起 IgA，IgG，IgM 及 C3，C4相应的改变，特别是当 HBV 载量为105～108 copies／ml 的4个实验组，伴随着 HBV-DNA 的增高均出现 IgA，IgG，IgM 增高及C3，C4降低，严重的影响了机体免疫功能，两者呈正相关（r ＝0.967，P ＜0.01）。104组与105组各指标出现显著性改变，提示对乙肝患者的抗病毒护肝治疗中，要尽量将 HBV 载量控制在104 copies／ml 以下，才能达到最小程度损伤免疫功能的疗效。

IgM诱导人B淋巴瘤Daudi细胞凋亡

目的：探讨BCR介导B淋巴细胞凋亡的作用机制。方法：光镜观察细胞形态。3H－TdR掺入法检测细胞生长。应用FACS：（1）AnnexinV法检测细胞凋亡，（2）PI染色分析细胞周期。结果：IgM影响Daud细胞的生长，改变细胞形态，镜下可见类似细胞凋亡样变化。高浓度IgM明显抑制其生长。AnnexinV分析显示IgM刺激可导致Daudi细胞发生凋亡；凋亡的发生存在时间上的规律性，在IgM刺激后的48－72小时，细胞凋亡最多；极高浓度IgM导致细胞迅速凋亡。DNA含量分析显示，凋亡发生在G1期和S期两群细胞比值相差最大时。结论：IgM可诱导Daudi细胞凋亡，细胞不能通过G1→S的检测点很可能是细胞调亡发生的重要原因之一。

乙型肝炎患者血清中抗HBc-IgM的临床意义

抗HBc-IgM在鉴别急性乙肝、慢性乙肝及慢性乙肝急性发作中的意义。应用亚培试剂盒检测抗HBc-IgM,追溯120例抗体阳性患者的临床诊断和各临床类型的抗体滴度水平分布,同时统计急性乙肝、慢性乙肝和慢性乙肝急性发作共240例患者的抗HBc-IgM检测结果,比较其抗体阳性率和滴度水平之间的差异。抗HBc-IgM阳性率,急乙肝组明显高于慢乙肝组和慢乙肝急性发作组。抗体滴度<2.0者,慢乙肝组和慢乙肝急性发作组的百分率明显高于急肝组。抗体滴度的检测对鉴别急乙肝和慢乙肝急性发作有较大的意义。

应用VP1蛋白的合成肽抗原检测心肌炎患者血清中柯萨奇B病毒IgM抗体

从柯萨奇B病毒(CVB)衣壳蛋白VPI的保守区选出一段13肽进行化学合成,经ELISA证买该段多肽是CVB的共同优势抗原表位.以多肽作包被抗原,建立了检测CVBIgM的间接ELISA法,对85例健康人、230例病毒性心肌炎、19例RF阳性血清、40例其它疾病患者进行了检测,阳性率分别为7.1%、41.3%、21.1%、10%.230例心肌炎中有106例用以病毒作包被抗原的间接ELISA进行了CVBIgM检测,阳性率49.1%.两者之间结果有良好的相关性(X^2=41.9,P<O.0001),阳性率无明显差别(X^2=2.45,P>0.05).提示,应用合成肽抗原检测CVBIgM抗体有较好的敏感性和特异性.

病毒性心肌炎患者柯萨奇B组病毒特异性IgM抗体检测的应用

目的 早期诊断成人病毒性心肌炎柯萨奇B组病毒IgM抗体 (CBVIgM )。方法 采取免疫酶染色法 (酶染玻片法 )测患者血清CBVIgM抗体 ,并与病毒分离和微量细胞中和抗体测定相比较。结果 12 9例心肌炎患者血清CBVIgM阳性 82例 ,阳性率 63 6% ;46例心肌炎患者咽拭子作病毒分离 ,分离出CBV 12株 ,其CBVIgM阳性有 11例 ;46例病毒分离患者的双份血清 2 6份与单份血清 (为急性期血清 ) 2 0份 ,其中和抗体≥ 4倍升高和单份血清≥ 1∶32 0者有 31例 ,31例中CBVIgM阳性为 2 9例。 40例健康对照组病毒分离和中和抗体均阴性 ,其CBVIgM阳性 2例。结论 免疫酶染色法检测CBVIgM ,方法简单 ,快速 ,可靠 ,其结果与对照组相比有非常显著差异 ,与病毒分离阳性符合率为 91 7% ,与血清中和抗体阳性符合率为 93 5 %。

抗慢性B淋巴细胞白血病患者血清IgM McAb的纯化及其酶结合物的制备

应用DEAE-22纤维素离子交换柱和正辛酸法从接种杂交瘤细胞BALB/C 鼠的腹水或腹腔肿瘤浸出液中纯化抗慢性淋巴细胞白血病(B-CLL)患者血清IgM 单克隆抗体(McAb),纯化物经巴比妥琼脂电泳,SDS-PAGE 鉴定为高纯度。ELISA 法证明具有高效价、高度特异性。采用过碘酸钠氧化结合法制备的辣根过氧化酶 HRPO-McAb 结合物的免疫活性、酶与蛋白质二者mol比、标记率均达到质量要求。

潜、慢型克山病患者柯萨奇B组病毒特异性IgM、IgG的检测

目的 了解柯萨奇B组病毒 (CoxB)感染与克山病的相关关系。方法 采用间接酶联免疫吸附法对四川省克山病病区 30例潜、慢型克山病患者血清中CoxB1～ 6 IgM和CoxB1～ 6 IgG进行检测 ,同时选取非病区 10名健康者作对照。结果 ①潜、慢型克山病组血清CoxB1～ 6 IgM抗体阳性率 (33.3 % )明显高于非病区健康对照组 (P <0 .0 5 )。②潜、慢型克山病组血清CoxB1～ 6 IgG抗体阳性率与非病区健康对照组差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论 病区潜、慢型克山病患者有CoxB感染存在。

急慢性乙肝患者血清preS1-Ag抗HBc-IgM检测的临床意义

目的观察急、慢性乙肝患者病变及治疗过程中Pre-S1Ag、抗HBc-IgM的变化并探讨其临床意义。方法应用酶联免疫法、荧光定量PCR技术及化学法对145例急、慢性乙肝患者病变及治疗过程中血清Pre-S1Ag、抗HBc-IgM、HBV-DNA及肝功能(总蛋白、白蛋白、总胆红素、直接/间接胆红素、丙氨酸氨基转移酶、总胆汁酸)等指标进行检测并观察其与预后的关系。结果Pre-S1Ag、抗HBc-IgM在急性乙型肝炎中检出率高达95.2%和97.6%,治疗后,两项指标均显著下降;肝功能完全恢复组Pre-S1Ag、抗HBc-IgM阳性率显著低于未恢复组(P<0.05);慢性活动性乙肝中两项指标均为83.3%且活动性乙肝组显著高于非活动性乙肝组;Pre-S1Ag、抗HBc-IgM与HBV-DNA阳性率高度相关(r1=0.98,r2=0.96,P<0.05)。结论检测Pre-S1Ag和抗HBc-IgM对急性乙肝的早期诊断、监测复制及预后评估及慢性乙肝的分类均具有较大价值。

流式细胞术与微柱凝胶技术检测O型孕妇IgG anti-A(B)相关性分析及临床意义

目的研究流式细胞术与微柱凝胶技术检测孕妇IgG anti-A(B)相关性;探讨流式细胞术与微柱凝胶技术检测孕妇IgG anti-A(B)优、缺点及临床意义。方法选取O型孕妇27例,其丈夫血型为:A型(13例)、B型(10例)和AB型(4例)。β-巯基乙醇消化孕妇血浆以灭活IgM anti-A(B),消化后的血浆即为母液。生理盐水倍比稀释母液直至稀释管稀释倍数为1∶1024。流式细胞术检测母液管和稀释管IgG anti-A(B)总平均荧光强度(MFI)和IgG anti-A(B)阳性百分率(%)。微柱凝胶技术仅检测稀释液管IgG anti-A(B)效价。分析流式细胞术与微柱凝胶技术检测孕妇IgG anti-A(B)结果的相关性。结果①微柱凝胶技术检测孕妇IgG anti-A(B)效价分别与流式细胞术母液IgG anti-A(B)总MFI和IgG anti-A(B)阳性百分率成正相关(r=0.4726,P=0.0073;r=0.6158,P=0.0002),且IgG antiA(B)总MFI和IgG anti-A(B)阳性百分率成正相关(r=0.9185,P<0.0001);②流式细胞术按血型分组,不管是A型或B型,也不管是母液或稀释液管,IgG anti-A(B)总MFI和IgG anti-A(B)阳性百分率均成正相关(r=0.9020,P<0.0001;r=0.9043,P<0.0001)(r=0.8913,P<0.0001;r=0.8706,P<0.0001);③以微柱凝胶技术为金标准,取正常参考值1∶64作Cutoff值,得到流式母液管IgG anti-A(B)阳性百分率受试者工作曲线(ROC)面积(Area=0.8238,P=0.0041)大于IgG anti-A(B)总MFI的ROC面积(Area=0.7405,P=0.03289);④微柱凝胶技术检测孕妇IgG anti-A(B)效价1∶64时,其流式稀释管1∶64与稀释管1∶128的IgG anti-A(B)阳性百分率有显著差异(P=0.0044)。结论①流式细胞术与微柱凝胶技术检测孕妇IgG anti-A(B)其结果存在相关性;②相对于微柱凝胶技术,流式细胞术检测IgG anti-A(B)方法更简单、效率更高、敏感性更好。

抗HBc-IgM、前S_1抗原与HBV-DNA检测在乙肝诊断中的相关性研究

目的通过对乙肝最常见的大三阳和小三阳患者进行抗HBc—IgM、前S_1抗原及HBV—DNA检测,找出三项指标的相关性。方法取大三阳和小三阳患者各100例进行抗HBc—IgM、前S_1抗原及HBV—DNA荧光定量检测,并进行统计学分析。结果前S_1抗原与HBV—DNA荧光定量检测对乙肝复制检测有相关性。抗HBc-IgM与乙肝大三阳和小三阳存在密切关系。结论大三阳和小三阳的抗HBc—IgM、前S_1抗原及HBV—DNA,三项指标阳性率不同,反映的临床意义也不同,对乙肝患者不能只是诊断了大三阳或小三阳,还应进行抗HBc—IgM与前S_1抗原检测尤其进行HBV—DNA荧光定量检测,并进行长期随访研究。

人胎回肠淋巴组织发生及IgM阳性B细胞的发育

目的探讨人胎回肠淋巴组织的发生及IgM阳性B细胞在人胎回肠的分布、定位及发育。方法收集2003年1月至2005年12月贵阳市各医院妇产科因流产等终止妊娠的9～28周人胎回肠标本30例,男12例、女18例。采用HE染色观察人胎回肠淋巴组织发生,SABC法染色显示IgM阳性B细胞,并用BioMias29图像分析软件对免疫反应阳性细胞进行计数,有关数据作统计学分析。结果胎龄9周时少量淋巴细胞分布于回肠上皮外的间充质内,其中部分细胞表达膜表面IgM。胎龄17周时固有层内淋巴组织局部聚集形成孤立淋巴小结,小结内含有较多IgM阳性B细胞。自24周起,人胎回肠可见典型的集合淋巴小结。IgM阳性B细胞主要分布于淋巴小结,少量弥散分布在固有层结缔组织或绒毛上皮内。细胞计数显示9～12周人胎回肠IgM阳性B细胞数量为(12.80±5.72)个,随胎龄增加至25～28周人胎回肠IgM阳性B细胞达(201.30±36.35)个,各胎龄组间比较差异显著(P<0.05)。结论 24周人胎回肠壁淋巴组织结构基本发育成熟;人胎回肠具有潜在的IgM合成和释放能力,对胎儿肠道免疫功能的建立和健全起着重要作用。

早期诊断急性乙型肝炎的新指标:抗HBc-IgM/HBV DNA定量log值

目的探讨早期诊断急性乙型肝炎的指标。方法收集132例急性乙型肝炎和277例慢性乙型肝炎病例。通过统计分析发现两组存在统计学差异的指标,计算ROC曲线下面积(AUC)诊断急性乙型肝炎的敏感度和特异性。结果入院48 h内的抗HBc-IgM/DNA定量log值,急性乙型肝炎组为5.18(0.03,13.65),较慢性乙型肝炎组的0.04(0.01,3.48)明显升高,差异有统计学意义(P=0.000)。抗HBc-IgM/DNA定量log值诊断急性乙型肝炎的敏感度95.45%,特异性97.47%,最佳约登指数0.929,AUC为0.991,cutoff值1.025,简化为1时敏感度和特异性不变。抗HBc-IgM/DNA定量log值与传统指标抗HBc-IgM相比,诊断急性乙型肝炎的AUC差异有统计学意义(P=0.001)。结论入院48 h内的抗HBc-IgM/DNA定量log值,可作为早期诊断急性乙型肝炎的一个新指标,≥1考虑急性乙型肝炎。

不同年龄段儿童呼吸道感染EB病毒IgM抗体与病毒DNA的关系研究

目的:探讨不同年龄段儿童呼吸道感染E B病毒(EBV)IgM抗体与病毒DNA的关系。方法:回顾性分析2018年5月~2019年12月本院180例儿童呼吸道感染患儿的临床资料,均采用酶联免疫吸附法检测血清EBVIgM抗体,并经荧光探针P C R法检测EBV-DN A。分析不同年龄段患儿EBVIgM抗体、EBV-DNA检测结果及两种方法关系。结果:180例患儿EB V-DNA检测阳性率45.00%,高于EB VIgM抗体的28.89%(P<0.05);矣1岁、1~3岁患儿EB V-DNA检测阳性率高于EBVIgM抗体(P<0.05);>3~6岁患儿EBVIgM抗体、EBV-DNA阳性率高于矣1岁、1~3岁、6~12岁患儿(P<0.05);Spearson相关性分析显示,EBVIgM抗体、EBV-DNA阳性率呈正相关(P<0.05);EBVIgM抗体、EBV-DNA总符合率为82.78%。结论:3~6岁儿童呼吸道感染患儿EBVIgM抗体、EBV-DNA阳性率相对较高,且EBVIgM抗体、EBV-DNA阳性率呈正相关,两种方法总符合率较高。

抗HBc-IgM检测在乙型病毒性肝炎母婴垂直传播中的意义

目的通过检测乙肝孕妇及其新生婴儿抗HBc-ⅠgM水平,分析孕产妇及其新生婴儿抗HBc-ⅠgM水平关系,为早期发现新生儿宫内感染乙肝病毒提供依据。方法对兰州市妇幼保健院2012年1月-2014年12月住院孕产妇及其出生后2h内新生婴儿全部进行抗HBc-ⅠgM检测,对检测结果用SPSS 21.0进行相关性分析。结果母亲抗HBc-ⅠgM指标和子代HBc-ⅠgM指标存在较高的正相关。结论早期检测抗HBc-ⅠgM有助于早期发现新生儿乙肝,动态监测抗HBc-ⅠgM滴度是判断乙型肝炎病毒宫内传播的经济方便的检测指标。

EB病毒蛋白诱导IgG和IgM产生的作用

目的:检测热灭活或紫外线(UV)灭活的EB病毒(EBV)刺激培养的人脐带血B细胞产生IgG和IgM的效应。方法:常规分离人脐带血单个核细胞(UBMC),以L-亮氨酸甲酯去除法,去除单核细胞、NK细胞和细胞毒性T细胞,以2-氨乙基硫脲溴化物(AET)处理绵羊红细胞(SRBC)的花环形成分离法,去除T细胞以获得纯化的B细胞。分别用UV和热灭活的EBV刺激培养的B细胞后,用夹心ELISA法检测培养上清中IgG 和IgM的产生。结果:以UV灭活的EBV刺激培养B细胞后18 d起,IgG和IgM的产生具有意义(P<0.05);而热灭活的EBV刺激后,各时间点均无显著差异(P>0.05)。结论:UV灭活EBV具有诱导IgG和IgM产生的作用,但有明显的时效性,提示EBV诱导IgG和IgM产生,可能是通过病毒的蛋白成分实现的,为进一步验证EBV功能蛋白诱导天然自身抗体(NAA)产生中的作用奠定了基础。