亲和层析一步纯化IgM类单克隆抗体

本文介绍采用兔抗鼠IgM血清制备的亲和层析柱从小鼠腹水中一步提纯单克隆抗体IgM的方法。提纯的IgM应用琼脂糖电泳检测,为一个区带;应用还原条件下的SDS—PAGE检测,分离为分子量～80K的重链和～25K的轻链两条区带,几未见其他杂带;应用免疫印染法鉴别,进一步确证为IgM,不含常见的杂质IgG。实验过程还发现提纯的IgM不够稳定,在贮存过程有降解现象。另外应用同一亲和柱从吸附IgG后的小鼠血清中提取多克隆抗体IgM的效果也是良好的,经用还原条件下的SDS-PAGE检测,同样也只分离为轻、重链两条区带,未见混有其他杂蛋白。