兔抗条纹斑竹鲨IgNAR多克隆抗体的制备和应用

目的 制备条纹斑竹鲨(Chiloscyllium plagiosum)IgNAR的多克隆抗体,为条纹斑竹鲨单域抗体的开发提供工具。方法 合成条纹斑竹鲨IgNAR恒定区的一段多肽作为抗原,免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体血清,采用间接ELISA法测定抗体的效价,并通过Western Blot检测多克隆抗体的特异性。此外,利用制备的多克隆抗体对条纹斑竹鲨外周血淋巴细胞进行免疫荧光和流式分析。结果 制备的抗血清效价高达1 000万,该多克隆抗体不仅能识别条纹斑竹鲨的IgNAR,还能识别护士鲨(Ginglymostoma cirratum)的IgNAR,但对条纹斑竹鲨的灵敏度更高。通过免疫荧光和流式细胞术确定了该多克隆抗体还可以识别条纹斑竹鲨外周血淋巴细胞跨膜型IgNAR。结论 成功制备了条纹斑竹鲨IgNAR的多克隆抗体,该抗体可用于Western Blot、免疫荧光和流式细胞术等实验,为条纹斑竹鲨单域抗体的开发提供了有力工具。

天然小分子抗体研究进展

与传统意义上的由两条重链和两条轻链组成的单体抗体不同,天然小分子抗体是指在自然界中存在的一些奇特的小分子抗体,它们分子量比较小,有的仅由重链组成,有的仅由轻链组成。在骆驼体内发现的仅由重链组成的抗体可以发挥正常的生物学功能,克隆其可变区即获得具有抗原结合能力的纳米抗体(Nanobody)。鲨鱼体内也存在一种由重链同源二聚体组成的非典型抗体IgNAR。另外,在人体内也存在游离的轻链抗体(FLC),在疾病的发生诊断中具有重要意义。本文综述了Nanobody、IgNAR及FLC的结构特点与作用机制。

单域抗体的研究进展

抗体是实验研究和药物应用的重要工具。大多数抗体具有4条多肽链的对称结构,两条较长的重链和两条较短的轻链,两臂末端是相同的抗原结合部位。除了这些传统的抗体,羊驼、一些骆驼和鲨鱼体内会产生一种只含有重链的抗体,称为重链抗体。它们的抗原结合部位只由单一结构域构成。这类单域抗体具有分子小、可溶性好、热稳定性高和体内组织渗透性好等优点,引起了药物开发与免疫治疗应用等领域的广泛关注,具有很广阔的研究前景。文章主要概述了抗体药物的研究,单域抗体的特点及天然物种来源的单域抗体的研究概况。

单域抗体研究进展

近年来用基因工程方法从软骨鱼和骆驼科动物中克隆到的单域抗体(single-domain antibody,sdAb)具有无轻链、单一重链可变区保留了完整的抗原结合活性的特征。这类单域抗体具有分子小、稳定性高、体内组织渗透性好、可溶性好、易表达、抗原识别表位独特的特性,已引起生物技术研究与诊断治疗应用领域的广泛关注,取得了快速发展。综述了这类单域抗体发展历史、分子类别、结构特征、理化特征、分子演化及应用前景。