IgY技术及其医药应用:理论基础

卵黄抗体技术 (IgY技术 )正在成为生物技术领域和医药研究中的新热点 ,并且越来越得到国内同仁的重视。因为卵黄抗体 (IgY)化学性质稳定 ,产量高、成本低 ,以及动物种系发生学距离的优势 ,更适于生产特异性抗体 ,具有开发功能性食品和新药的潜能。该文述及该技术发展的背景和理论基础 ,详细综述了禽类的免疫学系统、IgY技术的生物学基础。

免疫鸡产生IgY抗体的技术

IgY技术正在成为生物技术领域和医药研究中的新热点 ,并且越来越得到国内同仁的重视。因为卵黄抗体 (IgY)化学性质稳定 ,产量高、成本低 ,以及动物种系距离的优势 ,更适于生产特异性抗体 ,具有开发功能性食品和新药的潜能。作为系列介绍的第二部分 ,本文详细介绍和探讨免疫鸡产生IgY抗体技术的主要技术环节和实践应用方面的具体信息 ,包括动物饲养 ,对鸡的免疫 ,抗体特性 ,IgY提取技术 ,鸡单克隆抗体的制备等方面。

IgY抗体的特性及其在诊断试剂中的应用

早在19世纪人们就认识到鸡母体内的抗体可传递到鸡卵的卵黄中．然而长期以来，这一发现并没有得到广泛应用。随着动物权益问题逐渐得到重视，它才被人们所关注。从卵黄中提取的抗体称为IgY（egg yolk immunoglobulin），1996年IgY抗体的生产和应用被定义为IgY技术。IgY相对于哺乳动物抗体IgG而言，具有抗原用量少、制备周期短、成功率高、动物创伤小、产量大等制备优势。因此，IgY作为诊断试剂的研究具有重要意义。本文述及鸡抗体的分子结构、理化性质及IgY在人类疾病诊断中的应用。

抗SARS-CoV-2卵黄抗体的制备与活性研究

目的:运用卵黄抗体(IgY)技术制备高效的抗新型冠状病毒(SARS-CoV-2)IgY并检测其免疫学活性。方法:使用SARS-CoV-2灭活疫苗免疫蛋鸡,运用冻融水稀释法、硫酸铵沉淀法和透析法从鸡蛋中提取IgY进行浓缩及纯化并优化IgY提取方法。采用SDS-PAGE对IgY的提取及纯化效果进行表征,BCA法检测纯化后蛋白的浓度、间接ELISA法检测抗体对重组SARS-CoV-2 S1蛋白、N蛋白的效价及其热稳定性。对Balb/c小鼠分别给予15 d常规剂量IgY及30 d大剂量IgY口服及滴鼻处理,采用ELISA法测定小鼠血清对IgY免疫反应性及小鼠体内部分炎症指标IL-1β、IL-6、IFN-γ和TNF-α表达情况,明确IgY安全使用剂量。结果:纯化后IgY SDS-PAGE表征条带正确,IgY提取及纯化效果好。纯化后的IgY效价在免疫完成后第2周达到最高,在200μg/mL时重组SARS-CoV-2 S1蛋白和N蛋白的效价高达1∶256。IgY抗体经25~60℃的温度处理4 h后活性仍基本保持稳定。常规剂量IgY未引起小鼠明显免疫反应。长期大剂量口服及滴鼻IgY时,IgY浓度为20 mg/mL处理组小鼠血清IL-1β、IL-6、IFN-γ及TNF-α分泌显著增加。结论:IgY技术具有快速获得针对不同抗原的高效IgY的潜力,且经其制成的IgY具有良好的热稳定性及生物安全性,但长期使用时IgY剂量应避免超过50 mg/kg,以免加重肾脏处理负担。