马蔺IlNRAMP5介导Cd^(2+)吸收功能初探

天然抗性相关巨噬细胞蛋白NRAMP5是一类高度保守的跨膜重金属转运蛋白,在介导Cd^(2+)吸收中扮演着重要的角色。然而,有关IlNRAMP5在马蔺Cd^(2+)吸收过程中是否起重要作用至今仍不清楚。本研究以马蔺(Iris lactea)根总RNA为模板,采用RT-PCR方法,获得了IlNRAMP5基因片段。采用In-Fusion无缝连接方法,构建了CaMV35 s启动子驱动的含有内含子发卡结构正反向重复序列的RNA干扰植物表达载体pART27-pHANNIBAL-IlNRAMP5-RNAi(PPIR)。并通过农杆菌介导将PPIR转入马蔺,经抗性筛选及分子检测获得IlNRAMP5-RNAi遗传转化株系。初步发现,镉胁迫下其IlNRAMP5-RNAi株系Cd^(2+)浓度较野生型显著降低。为进一步解析IlNRAMP5在马蔺Cd^(2+)吸收中的作用机制奠定了工作基础。