大叶苦丁茶抗氧化活性研究进展

大叶苦丁茶是我国南方一种药食两用的传统饮品与药材,也是市场上广泛流通、被普遍当作“苦丁茶正品”的别样茶(non-Camellia teas),具有清热解毒、抗氧化、抗炎、止血凉血、抗菌等多种功效,其次生代谢物质化学成分复杂,主要包括多酚、多糖、黄酮、三萜等多种活性成分。大叶苦丁茶活性成分是天然的抗氧化剂,具有绿色、无毒、高效等特点,在食用油脂储藏、食品保鲜、化妆品、保健品以及抗氧化药物等方面具有良好的应用前景。本文以大叶苦丁茶化学成分的抗氧化作用为主线,综述大叶苦丁茶中具有代表性的多酚、多糖、黄酮、三萜等化学成分的含量、组成及其抗氧化作用,探讨大叶苦丁茶的应用并对其进行展望,拟为大叶苦丁茶的开发与利用提供参考。

枸骨的化学成分

从枸骨(IlexcornutaLindl.exPaxt.)中分离得到20个化合物,鉴定了16个,分别为:枸骨甙1(Gouguside1,Ⅴ)即坡摸酸3 β O α L 吡喃阿拉伯糖甙;枸骨甙2(Gouguside2,Ⅵ)即3 β O D 吡喃葡萄糖基坡摸酸 β 28 O D 吡喃葡萄糖酯;枸骨甙3(Gouguside3,Ⅶ)即3 β O (β D 吡喃葡萄糖基) α L 吡喃葡萄糖基坡摸酸 β 28 O D 吡喃葡萄糖酯的类似物;枸骨甙4(Gouguside4,ⅩⅦ)即3 β O (β D 吡喃葡萄糖基) α L 吡喃葡萄糖基坡摸酸 β 28 O D 吡喃葡萄糖酯;枸骨甙5(Gouguside5,ⅩⅧ)即坡摸酸3 β O α L 2′ 乙酰氧基吡喃阿拉伯糖基 28 O β D 吡喃葡萄糖酯,枸骨甙6(Gouguside6,ⅩⅨ)即3 β O (β D 吡喃葡萄糖基) α L 4 乙酰氧基吡喃阿拉伯糖基坡摸酸 β 28 O D 吡喃葡萄糖酯;枸骨甙7(Gouguside7,ⅩⅩ)即3 β O α L 吡喃阿拉伯糖基 28 O β D 吡喃葡萄糖酯;胡萝卜甙(daucostorolⅧ);2,4 二羟基苯甲酸(2,4 dihydroxybenzoicacidⅠ);3,4 二羟基桂皮酸(3,4 dihyroxycinnamunicacidⅡ、Ⅳ);长链脂肪酸或醇5个(Longchainfattyacid,Ⅲ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ、ⅩⅣ)。在鉴定的16个化合物中,枸骨甙1、枸骨甙2、枸骨甙6和枸骨甙7为首次从枸骨中分离得到,枸骨甙3和枸骨甙4为新化合物。

枸骨中3种化合物的心血管药理作用

从枸骨中分离了20个化合物,对其中的3个进行了心血管方面的药理作用研究。结果表明,3,4 二羟基桂皮酸和胡萝卜甙对小鼠缺氧、氯仿诱发的小鼠心室纤颤及脑垂体后叶素诱发的大鼠心肌缺血均无保护作用,也不能改变豚鼠离体心肌的心率、冠脉流量及心肌收缩力。3 β O (β D 吡喃葡萄糖基) α L 吡喃阿拉伯糖基坡摸酸 β 28 O D 吡喃葡萄糖酯(命名为枸骨甙4)对小鼠缺氧、氯仿诱发的小鼠心室纤颤无保护作用,对脑垂体后叶素诱发的心肌缺血有一定的保护作用,不改变豚鼠离体心肌的心率和冠脉流量,但可显著降低心肌收缩力。

中药枸骨叶的化学成分研究

目的:对中药枸骨叶的化学成分进行研究。方法:采用溶剂提取和柱层析色谱分离,根据化合物理化性质和光谱数据鉴定其结构。结果:分离并鉴定了6个化合物:七叶内酯(1)、槲皮素(2)、异鼠李素(3)、金丝桃苷(4)、3-O-α-L-阿拉伯吡喃糖-28-O-6’-O-甲基葡萄糖坡摸醇酸苷(5)、23-羟基乌索酸-3-O-α-L-阿拉伯吡喃糖(1→2)β-D-葡萄糖醛酸-28-O-β-D-葡萄糖苷(6)。结论:以上化合物均为首次从该植物中分离得到。

枸骨茎抗炎活性成分研究

目的研究枸骨(Ilex cornuta Lindl.et Paxt)茎的抗炎活性成分。方法运用80%乙醇提取、大孔吸附树脂、正反相硅胶、Sephadex-LH20色谱柱等多种方法进行分离和纯化,根据理化性质和波谱数据进行结构鉴定。采用脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7的NO生成模型对部分化合物的抗炎活性进行测试。结果共分离得到10个化合物,经结构鉴定分别为α-香树脂醇(1)、齐墩果酸(2)、熊果酸(3)、羽扇豆醇(4)、menisdaurin(5)、lithospermoside(6)、槲皮素(7)、芦丁(8)、汉黄芩苷(9)、5,2′-二羟基-6,7,8,3′-四甲氧基黄酮(10)。测试了化合物2~8对LPS诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7的NO生成抑制活性。结论化合物5、6、9、10为首次从该植物中分离得到。化合物3和7能较明显地抑制LPS诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7的NO生成。

超临界CO_2萃取法与水蒸气蒸馏法提取枸骨叶挥发油的GC-MS分析

采用超临界CO_2流体萃取法(SFE-CO_2)和水蒸气蒸馏法(SD)提取枸骨叶中的挥发油成分,并运用气相色谱-质谱联用法(GC-MS)分离和分析这两种提取物的化学成分,用峰面积归一化法确定各化合物的相对百分含量,比较两种不同提取方法所得挥发油组分的差异。结果表明,从SFE-CO_2法提取的挥发油中,共检出80个成分,鉴定出其中的47个,占挥发油总量的82.32%,含量最高的组分为蒲公英甾醇;从SD法提取的挥发油中,共检出48个成分,鉴定出其中的15个,占挥发油总量的78.91%,含量最高的组分为β-桉叶醇。两种方法提取枸骨叶挥发油的化学组分与含量差别较大,因此可根据生产需要,选用不同方法提取枸骨叶中的有效成分。

枸骨不同药用部位的显微特征研究

目的研究枸骨不同药用部位的石蜡包埋切片和粉末显微构造,为枸骨资源的综合开发利用奠定基础。方法采用石蜡切片法对枸骨不同药用部位进行切片,采用显微技术观察组织构造及显微特征。结果描述了枸骨叶、树皮、果实、根的显微特征,绘制了横切面图和粉末显微图。结论枸骨各部位的显微特征均较明显,其中,枸骨树皮、种子、根的显微特征属首次报道。

HS-SPME-GC-MS分析枸骨叶挥发性成分

以顶空固相微萃取技术(HS-SPME)提取枸骨叶的挥发性成分,采用气质联用技术(GC-MS)结合保留指数法,用峰面积归一法测定相对百分含量。从枸骨叶中鉴定出32个化合物,占总峰面积的91.30%。化学成分主要为植酮(19.64%)、二氢猕猴桃内酯(5.38%)、壬醛(5.10%)和六氢假紫罗酮(3.94%)。

不同干燥方式对枸骨叶片和果实中亚硝酸盐含量的影响

【目的】:研究不同干燥方式对枸骨叶片和果实中亚硝酸盐含量的影响。【方法】:将采集的枸骨叶片和果实用自来水洗涤干净,沥干后分为叶片、果实两组,再将两组样品分别进行室内阴干(20～30℃)、恒温烘干(60℃)、室外晒干三种干燥方式处理。其中室内阴干的样品从采集当天开始测试,每天测定一次,连续测定6d,恒温烘干和室外晒干样品先用水煮沸,从沸腾开始每隔3min采样测定一次,每份样品连续测定6次。测定的各样品均设3个重复,求均数。【结果】:室内阴干过程中,新鲜枸骨叶片和果实中亚硝酸盐含量随阴干时间延长而增加。在恒温烘干和室外晒干的枸骨干样中亚硝酸盐含量均随煮沸时间的增加而增加,枸骨叶片在煎煮9min时显著增加,枸骨果实在煎煮6min时显著增加。【结论】:为了提高枸骨的药用安全性,新鲜枸骨采摘后尽快使用,或仅用其叶片部分。从枸骨亚硝酸盐含量方面分析,恒温烘干方式处理低于室外晒干方式。为减少亚硝酸盐的危害,煎煮枸骨干样的时间建议不超过6min。

枸骨叶总皂甙提取工艺的研究

以枸骨叶总皂甙提取率为指标,利用浸提法,通过单因素和正交实验法优化枸骨叶总皂甙的提取工艺。结果表明枸骨叶总皂甙的最佳提取工艺条件为:80%乙醇,料液比1∶10,提取温度65℃,提取时间1.5 h。验证实验结果表明该提取工艺稳定可行,适用于枸骨叶总皂甙的提取。

枸骨内生真菌IFB-GLP-4的鉴定

从药用植物枸骨中分离到一株具有抗芽孢杆菌活性且能产生新骨架化合物的内生真菌,该菌命名为IFB-GLP-4,综合运用形态学和分子生物学方法对该菌进行分类鉴定,确定其为子囊菌亚门(Ascomycotina),腔菌纲(Loculoascomycetes),座囊菌(Dothideales),球座菌属(Guignardia),芒果球座菌(Guignardia mangiferae)。

枸骨叶水提物对蟾蜍心肌收缩力的影响及其机制初探

目的 研究枸骨叶水提物对蟾蜍心肌收缩力的影响及其机制。方法 采用煎煮法制备枸骨叶水提物。采用蛙心灌流法和BL-420E智能生物信号采集与处理系统,观察不同浓度枸骨叶水提物对离体蟾蜍心肌收缩力的作用、枸骨叶水提物对肾上腺素刺激以及不同钙离子浓度灌流条件下心肌收缩力的影响。结果 枸骨叶水提物在0.1~1.6mg/ml浓度范围内剂量依赖性抑制蟾蜍基础条件下心肌收缩力,最大效应可使心肌收缩力降低55.12%;枸骨叶水提物对肾上腺素刺激条件下蟾蜍心肌收缩力亦有显著抑制作用,0.4mg/ml枸骨叶水提物即可完全阻断肾上腺素的兴奋作用;枸骨叶水提物在不同钙离子浓度任氏液灌流条件下抑制率保持稳定,约为20%。结论 枸骨叶水提物对基础条件下以及肾上腺素刺激条件下蟾蜍心肌收缩力均有显著抑制作用,其抑制率与浓度相关,与细胞外钙离子浓度无关,其作用机制可能与抑制心肌细胞β受体有关。

无刺枸骨快速繁殖技术研究

无刺枸骨具有较高的生态和观赏价值。笔者以带芽新梢茎段为外植体,研究了培养基配方、培养方式以及移栽和扦插基质等对其组培快繁的影响。结果表明:无刺枸骨芽诱导和增殖的最佳培养基为MS(或B5)+BA3.0mg/L+IBA0.1mg/L(或NAA0.1mg/L)+3.0%蔗糖+0.7%琼脂;生根培养则以试管外扦插生根为好,其基质配比为河沙:壤土=5:5。

枸骨夏插育苗试验

枸骨夏插育苗，采穗的母树年龄以不超过１５年为好；采用全封闭管理，不仅生根快，成活率高，苗木长势好，而且方法简单，操作简便，成本低廉。

用投影寻踪回归方法研究红蜡蚧在枸骨球上的空间分布

用投影寻踪回归方法研究红蜡价在枸骨球上的空间分布结果表明，枸骨球上红蜡故的空间分布与枸骨球的方位和层次有关。雌成虫主要聚集在植物的外层和中层，并以球顶部和西面为重，内层和南面轻。用PP回归方法客观地分析和描述了数据的内在结构，为综合治理提供了可靠的依据。

RP-HPLC-PAD法同时测定枸骨中熊果酸和齐墩果酸含量

目的结合超声技术提取枸骨中熊果酸和齐墩果酸,建立RP-HPLC-PAD法同时测定其含量。方法采用Kromasil C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.2%磷酸水溶液(88∶12),光电二极管阵列检测器(PAD),检测波长210nm,流速0.8mL/min,柱温30℃。以保留时间和紫外光谱对分离出的组分予以定性确证,用峰面积进行定量。结果组分的质量浓度与其峰面积在一定的范围内呈现良好的线性关系,相关系数均为0.9999,熊果酸进样量在0.443～7.088μg、齐墩果酸进样量在0.247～3.952μg时呈现良好的线性关系,平均加样回收率分别为99.12%、98.76%,RSD分别为1.2%、1.7%(n=6)。结论本方法灵敏、准确,重现性好,可用于枸骨中熊果酸和齐墩果酸含量的测定。

枸骨茎的化学成分研究

目的对冬青科冬青属植物枸骨Ilex cornuta茎进行化学成分研究,并考察分得化合物的自由基清除能力。方法利用硅胶、中压柱色谱及半制备高效液相色谱等方法,对枸骨茎的化学成分进行系统分离;通过质谱、核磁共振谱等光谱数据鉴定化合物结构;利用DPPH清除自由基实验测定化合物1~9的抗氧化活性。结果从枸骨茎50%乙醇提取物中分离并鉴定了15个化合物,分别为3,4-二咖啡酰奎宁酸（1）、3,4,5-三咖啡酰奎宁酸（2）、4,5-二咖啡酰奎宁酸甲酯（3）、3,4-二咖啡酰奎宁酸甲酯（4）、3,5-二咖啡酰奎宁酸甲酯（5）、3,4,5-三咖啡酰奎宁酸甲酯（6）、丁香醛（7）、没食子酸乙酯（8）、二氢芥子醇（9）、2,6-二甲氧基-1,4-苯醌（10）、牛蒡苷元（11）、1-O-香草酸-6-（3″,5″-二甲氧基没食子酰）-β-D-吡喃葡萄糖苷（12）、木质素苷（13）、（＋）-（7S,8S）-3,5-二甲氧基-4-羟基苯基丙三醇-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（14）、夏佛托苷（15）。结论化合物6、8~10、14、15为首次从该属植物中分离得到,化合物2、7、11、12为首次从该植物中分离得到;化合物1~6具有显著的清除自由基作用。