枸骨的化学成分和药理活性研究进展

[目的]概述从枸骨(Ilex cornuta Lindl.et Paxt.)中分离得到的化学成分及其药理作用研究进展,并探讨了今后研究的主要方向。[方法]搜集整理现有的有关枸骨化学成分和药理作用的研究结果。[结果]文献报道,从枸骨中共分离得到40个化合物,主要为三萜皂苷及其苷元、黄酮及其苷类、多酚类及其衍生物、脂肪酸类和其他类(包括链状倍半萜tanacetene、胡萝卜苷和苦丁茶糖脂素甲、乙等),其中,三萜皂苷及其苷元18个,黄酮及其苷类5个,多酚类及衍生物5个,脂肪酸类7个,其他类6个。枸骨提取物的药理活性主要有降血脂、抗菌和抗生育等作用。其中,单体化合物熊果酸具有镇静、消炎、抗菌、抗糖尿病、抗溃疡、降低血糖,提高免疫作用、抗致癌、抗促癌、诱导F9畸胎瘤细胞分化和抗血管生成作用等多种生物效应;槲皮素和金丝桃苷具有较强的镇痛、增强脑组织血流量和抗脑缺血性损伤等活性;枸骨苷4对脑垂体后叶素诱发的大鼠心肌缺血有一定的保护作用,可显著降低心肌收缩力;腺苷对冠脉血流有增加作用,3,4-二咖啡酰鸡纳酸对前列腺环素(PGI2)的释放有较显著促进作用。[结论]该研究可以为更好地开发和利用枸骨资源提供参考。

枸骨的化学成分

从枸骨(IlexcornutaLindl.exPaxt.)中分离得到20个化合物,鉴定了16个,分别为:枸骨甙1(Gouguside1,Ⅴ)即坡摸酸3 β O α L 吡喃阿拉伯糖甙;枸骨甙2(Gouguside2,Ⅵ)即3 β O D 吡喃葡萄糖基坡摸酸 β 28 O D 吡喃葡萄糖酯;枸骨甙3(Gouguside3,Ⅶ)即3 β O (β D 吡喃葡萄糖基) α L 吡喃葡萄糖基坡摸酸 β 28 O D 吡喃葡萄糖酯的类似物;枸骨甙4(Gouguside4,ⅩⅦ)即3 β O (β D 吡喃葡萄糖基) α L 吡喃葡萄糖基坡摸酸 β 28 O D 吡喃葡萄糖酯;枸骨甙5(Gouguside5,ⅩⅧ)即坡摸酸3 β O α L 2′ 乙酰氧基吡喃阿拉伯糖基 28 O β D 吡喃葡萄糖酯,枸骨甙6(Gouguside6,ⅩⅨ)即3 β O (β D 吡喃葡萄糖基) α L 4 乙酰氧基吡喃阿拉伯糖基坡摸酸 β 28 O D 吡喃葡萄糖酯;枸骨甙7(Gouguside7,ⅩⅩ)即3 β O α L 吡喃阿拉伯糖基 28 O β D 吡喃葡萄糖酯;胡萝卜甙(daucostorolⅧ);2,4 二羟基苯甲酸(2,4 dihydroxybenzoicacidⅠ);3,4 二羟基桂皮酸(3,4 dihyroxycinnamunicacidⅡ、Ⅳ);长链脂肪酸或醇5个(Longchainfattyacid,Ⅲ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ、ⅩⅣ)。在鉴定的16个化合物中,枸骨甙1、枸骨甙2、枸骨甙6和枸骨甙7为首次从枸骨中分离得到,枸骨甙3和枸骨甙4为新化合物。

枸骨中3种化合物的心血管药理作用

从枸骨中分离了20个化合物,对其中的3个进行了心血管方面的药理作用研究。结果表明,3,4 二羟基桂皮酸和胡萝卜甙对小鼠缺氧、氯仿诱发的小鼠心室纤颤及脑垂体后叶素诱发的大鼠心肌缺血均无保护作用,也不能改变豚鼠离体心肌的心率、冠脉流量及心肌收缩力。3 β O (β D 吡喃葡萄糖基) α L 吡喃阿拉伯糖基坡摸酸 β 28 O D 吡喃葡萄糖酯(命名为枸骨甙4)对小鼠缺氧、氯仿诱发的小鼠心室纤颤无保护作用,对脑垂体后叶素诱发的心肌缺血有一定的保护作用,不改变豚鼠离体心肌的心率和冠脉流量,但可显著降低心肌收缩力。

枸骨茎抗炎活性成分研究

目的研究枸骨(Ilex cornuta Lindl.et Paxt)茎的抗炎活性成分。方法运用80%乙醇提取、大孔吸附树脂、正反相硅胶、Sephadex-LH20色谱柱等多种方法进行分离和纯化,根据理化性质和波谱数据进行结构鉴定。采用脂多糖(LPS)诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7的NO生成模型对部分化合物的抗炎活性进行测试。结果共分离得到10个化合物,经结构鉴定分别为α-香树脂醇(1)、齐墩果酸(2)、熊果酸(3)、羽扇豆醇(4)、menisdaurin(5)、lithospermoside(6)、槲皮素(7)、芦丁(8)、汉黄芩苷(9)、5,2′-二羟基-6,7,8,3′-四甲氧基黄酮(10)。测试了化合物2~8对LPS诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7的NO生成抑制活性。结论化合物5、6、9、10为首次从该植物中分离得到。化合物3和7能较明显地抑制LPS诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7的NO生成。

超临界CO_2萃取法与水蒸气蒸馏法提取枸骨叶挥发油的GC-MS分析

采用超临界CO_2流体萃取法(SFE-CO_2)和水蒸气蒸馏法(SD)提取枸骨叶中的挥发油成分,并运用气相色谱-质谱联用法(GC-MS)分离和分析这两种提取物的化学成分,用峰面积归一化法确定各化合物的相对百分含量,比较两种不同提取方法所得挥发油组分的差异。结果表明,从SFE-CO_2法提取的挥发油中,共检出80个成分,鉴定出其中的47个,占挥发油总量的82.32%,含量最高的组分为蒲公英甾醇;从SD法提取的挥发油中,共检出48个成分,鉴定出其中的15个,占挥发油总量的78.91%,含量最高的组分为β-桉叶醇。两种方法提取枸骨叶挥发油的化学组分与含量差别较大,因此可根据生产需要,选用不同方法提取枸骨叶中的有效成分。

枸骨不同药用部位的显微特征研究

目的研究枸骨不同药用部位的石蜡包埋切片和粉末显微构造,为枸骨资源的综合开发利用奠定基础。方法采用石蜡切片法对枸骨不同药用部位进行切片,采用显微技术观察组织构造及显微特征。结果描述了枸骨叶、树皮、果实、根的显微特征,绘制了横切面图和粉末显微图。结论枸骨各部位的显微特征均较明显,其中,枸骨树皮、种子、根的显微特征属首次报道。

枸骨中芦丁和槲皮素含量测定

目的采用高效液相色谱法测定枸骨不同部位（嫩叶、老叶、枝、青果、红果）及不同采收期枸骨叶中芦丁和槲皮素的含量。方法采用C18色谱柱（250mm×4.6mm,5μm）,流动相为甲醇-0.5%磷酸水溶液（47∶53）,流速为0.7ml/min,检测波长为356nm,柱温25℃,测定枸骨中芦丁和槲皮素含量。结果芦丁和槲皮素线性范围分别为0.52-5.2μg和0.34-3.4μg,相关系数r均为0.9999,平均回收率分别为98.6%和99.2%,RSD分别为1.70%和1.91%（n=6）。结论枸骨不同部位及不同采收期枸骨叶中芦丁和槲皮素含量有明显差异。

枸骨根的化学成分研究

目的:研究枸骨Ilex cornuta Lindl.et Paxt.根的化学成分。方法:利用硅胶柱色谱法、Sephadex LH-20凝胶柱色谱法、中压柱层析及半制备高效液相色谱等方法分离纯化;通过核磁共振谱、质谱等光谱数据鉴定化合物结构。结果:分离鉴定了10个化合物,分别为:齐墩果酸(1)、暹罗树脂酸(2)、19α-羟基-乌苏酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(3)、坡模酸(4)、23-羟基-坡模酸-3β-O-α-L-吡喃阿拉伯糖苷(5)、19α-羟基-齐墩果酸-3β-O-α-L-吡喃阿拉伯糖基-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(6)、23-羟基-羽扇豆醇(7)、竹节参皂苷Ⅳa正丁酯(8)、齐墩果酸-3β-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸甲酯苷(9)、齐墩果酸-3β-O-[α-L-吡喃阿拉伯糖基(1→2)]-β-D-吡喃葡萄糖醛酸甲酯苷(10)。结论:其中,化合物7～10为首次从该属植物中分离得到,化合物2～6为首次从该植物中分离得到。

枸骨内生真菌IFB-GLP-4的鉴定

从药用植物枸骨中分离到一株具有抗芽孢杆菌活性且能产生新骨架化合物的内生真菌,该菌命名为IFB-GLP-4,综合运用形态学和分子生物学方法对该菌进行分类鉴定,确定其为子囊菌亚门(Ascomycotina),腔菌纲(Loculoascomycetes),座囊菌(Dothideales),球座菌属(Guignardia),芒果球座菌(Guignardia mangiferae)。

枸骨叶的化学成分研究

目的研究枸骨Ilex cornuta叶的化学成分。方法利用硅胶、凝胶等柱色谱和半制备高效液相色谱对枸骨叶的化学成分进行分离纯化,利用光谱数据结合理化性质鉴定其结构。结果分离得到了12个化合物,分别鉴定为(2R,3S,4S)-4-(4-hydroxy-3-methoxybenzyl)-2-(5-hydroxy-3-methoxyphenyl)-3-hydroxymethyl-tetrahydrofuran-3-ol(1)、大黄素甲醚(2)、11-酮基-α-香树脂棕榈酸酯(3)、羽扇豆醇(4)、30-醛基羽扇豆醇(5)、乌索醇(6)、3β-羟基-乌索-11-烯-13β(28)-内酯(7)、乌索酸(8)、β-谷甾醇(9)、胡萝卜苷(10)、坡模酸-28-O-β-D-葡萄糖苷(11)、长梗冬青苷(12)。结论化合物1和2为首次从冬青属中分离得到,化合物11和12为首次从该植物中分离得到。

RP-HPLC-PAD法同时测定枸骨中熊果酸和齐墩果酸含量

目的结合超声技术提取枸骨中熊果酸和齐墩果酸,建立RP-HPLC-PAD法同时测定其含量。方法采用Kromasil C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.2%磷酸水溶液(88∶12),光电二极管阵列检测器(PAD),检测波长210nm,流速0.8mL/min,柱温30℃。以保留时间和紫外光谱对分离出的组分予以定性确证,用峰面积进行定量。结果组分的质量浓度与其峰面积在一定的范围内呈现良好的线性关系,相关系数均为0.9999,熊果酸进样量在0.443～7.088μg、齐墩果酸进样量在0.247～3.952μg时呈现良好的线性关系,平均加样回收率分别为99.12%、98.76%,RSD分别为1.2%、1.7%(n=6)。结论本方法灵敏、准确,重现性好,可用于枸骨中熊果酸和齐墩果酸含量的测定。

枸骨茎的化学成分研究

目的对冬青科冬青属植物枸骨Ilex cornuta茎进行化学成分研究,并考察分得化合物的自由基清除能力。方法利用硅胶、中压柱色谱及半制备高效液相色谱等方法,对枸骨茎的化学成分进行系统分离;通过质谱、核磁共振谱等光谱数据鉴定化合物结构;利用DPPH清除自由基实验测定化合物1~9的抗氧化活性。结果从枸骨茎50%乙醇提取物中分离并鉴定了15个化合物,分别为3,4-二咖啡酰奎宁酸（1）、3,4,5-三咖啡酰奎宁酸（2）、4,5-二咖啡酰奎宁酸甲酯（3）、3,4-二咖啡酰奎宁酸甲酯（4）、3,5-二咖啡酰奎宁酸甲酯（5）、3,4,5-三咖啡酰奎宁酸甲酯（6）、丁香醛（7）、没食子酸乙酯（8）、二氢芥子醇（9）、2,6-二甲氧基-1,4-苯醌（10）、牛蒡苷元（11）、1-O-香草酸-6-（3″,5″-二甲氧基没食子酰）-β-D-吡喃葡萄糖苷（12）、木质素苷（13）、（＋）-（7S,8S）-3,5-二甲氧基-4-羟基苯基丙三醇-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（14）、夏佛托苷（15）。结论化合物6、8~10、14、15为首次从该属植物中分离得到,化合物2、7、11、12为首次从该植物中分离得到;化合物1~6具有显著的清除自由基作用。