枸骨的化学成分及其药理活性研究进展

枸骨(Ilex cornuta)为冬青科冬青属常绿灌木或小乔木,是我国传统中药之一,其叶子常被瑶胞聚居区当作“苦丁茶”的来源。枸骨的化学成分是其药理活性的基础,主要包括三萜皂苷类、黄酮类、多酚类、生物碱类和挥发油类等,近10年共鉴定出278种单体成分。现代药理学研究表明,枸骨具有抗氧化、抗菌、抗炎及抗肿瘤等多种活性。本研究对近10年国内外有关枸骨化学成分、提取与检测方法、药理活性及作用机制的研究报道进行了总结,并对枸骨研究的不足及未来研究发展方向进行了探讨,旨在为枸骨的进一步研究与应用提供参考。

酶解辅助——超声提取岗梅总黄酮研究

以芦丁为标准品,建立岗梅总黄酮含量测定标准曲线;单因素考察岗梅总黄酮影响因素,并建立以酶用量(A)为6,9,12 mL,料液比(B)为1∶10,1∶15,1∶20(g∶mL),乙醇体积分数(C)实验,以期得到岗梅总黄酮酶解辅助超声提取最佳工艺。研究得出,岗梅总黄酮超声提取最优方法为:A_(2)B_(3)C_(2)D_(3),即酶用量9 mL,料液比1∶20(g∶mL),乙醇体积分数60%,超声次数3次。本实验优选出的最佳提取方法方便、可靠、提取率高,适合岗梅总黄酮提取。

苦丁茶中熊果酸的提取工艺

在苦丁茶中提取熊果酸的过程中,采用正交实验研究了乙醇体积分数、液固比、提取时间、提取温度、提取次数等对熊果酸浸出率的影响。正交实验的方差分析结果表明:对于熊果酸的浸出率,提取时间的影响最大,乙醇浓度和固液比的影响次之;最佳回流提取工艺条件为:在85℃水浴中,以90%(体积分数)乙醇水溶液为提取液,液固比为14∶1,提取2次,每次提取2.5h时,熊果酸的浸出率可达到1.44%。

以枸骨叶为原料提取熊果酸工艺的研究

采用正交实验筛选出从枸骨叶中提取熊果酸的最佳工艺。当使用 85%～ 95%乙醇提取两次、每次 80min时 ,对干枸骨叶的提取率达到 90 %。在后处理中使用 2 .5倍于沉淀物质量的石油醚洗涤 3次 ,最后使用乙醇重结晶得到产品。

毛冬青总提取物的抗血栓作用及基于ADP的机制研究

目的:研究毛冬青总提取物的抗血栓作用。方法:采用家兔体外血凝块溶解实验,胶原-肾上腺素小鼠血栓实验,角叉菜胶小鼠血栓实验,Fe Cl3大鼠血栓形成实验,观察毛冬青提取物溶解血栓和抗血栓形成的作用。结果:毛冬青总提取物的0.2 mg/m L浓度对体外形成的家兔血凝块有明显的溶解作用;毛冬青总提取物(1、0.5、0.25 g/kg)剂量组均能减少胶原蛋白-肾上腺素诱发血栓形成小鼠的死亡数,增加保护率;能减少角叉菜胶诱导血栓形成小鼠的相对黑尾长度;毛冬青总提取物(195、97.5、48.75 mg/kg)各剂量组均减轻Fe Cl3颈动脉血栓模型大鼠的血栓的重量和内皮受损程度;降低ADP诱导的血小板聚集率;降低FIB的含量及抑制P2Y12受体的表达,对APTT、TT、PT的表达几乎无影响;提高c AMP的表达水平;减少TXB2和P-选择素的含量、不影响6-Keto-PGF1α的表达;并降低血小板胞浆Ca2+平均荧光强度及抑制GPⅡb/Ⅲa的表达。结论:毛冬青总提取物具有一定的抗血栓的作用,能改善血管内皮的受损程度,具有保护血管内皮的作用,并通过影响P2Y12受体αGi亚单位和βγ亚单位功能的表达,降低P2Y12受体的含量,抑制血小板的聚集,最终抑制血栓的形成。

广西苦丁茶老叶提取物抗炎作用实验

目的:研究广西苦丁茶老叶提取物的抗炎作用。方法:采用小鼠巴豆油性耳肿胀、醋酸致毛细血管通透性增加及角又菜胶致小鼠关节肿胀等急、慢性炎症模型,观察苦丁茶提取物的抗炎作用。结果:苦丁茶提取物能明显抑制小鼠巴豆油性耳肿胀,降低醋酸所致毛细血管通透性增加,显著抑制角叉莱胶性足肿胀。结论:苦丁茶提取物具有显著的抗炎作用。

冬青叶中黄酮类化合物提取工艺

用乙醇提取冬青叶总黄酮,考察了乙醇浓度、提取温度、固液比与提取时间对总黄酮提取量的影响。结果表明,用乙醇提取冬青叶总黄酮的最佳工艺为:乙醇浓度为60%,提取温度70℃,固液比1∶10,提取时间120 min。在此条件下冬青叶总黄酮的提取量为3.97 mg/g。

苦丁茶不同提取物抗氧化活性比较及其GC-MS分析

利用气相色谱-质谱联用技术(GC-MS),对苦丁茶超声辅助不同有机溶剂(乙醇、乙酸乙酯、石油醚)提取物及超临界CO2萃取物的体外抗氧化活性(DPPH自由基清除能力、羟基自由基清除活性、超氧阴离子自由基清除活性和ABTS+自由基清除能力)进行比较分析。结果表明,苦丁茶不同提取物DPPH清除能力和超氧阴离子自由基清除活性依次为:超声-乙醇提取物>超临界CO2萃取物>超声-乙酸乙酯提取物>超声-石油醚提取物,羟基自由基和ABTS+自由基清除能力依次为:超声-乙醇提取物>超声-乙酸乙酯提取物>超临界CO2萃取物>超声-石油醚提取物。GC-MS结果显示,苦丁茶不同提取物中主要有5类物质,共有49种化学成分,7种共有成分。

毛冬青叶多酚的提取工艺及其抗氧化性质的研究

以毛冬青叶为原料,进行毛冬青叶多酚提取工艺及其抗氧化性活性的研究,建立以没食子酸为标准品,分光光度法测定毛冬青叶多酚含量的分析方法。结果显示:以pH 4的水为溶剂、料液比1∶30(g/mL)、50℃水浴1.5 h条件下提取1次,毛冬青叶多酚得率为2.89%。其多酚化合物对羟基自由基(·OH)和二苯基苦基肼自由基(DPPH·)均有较强的清除效果,最大清除率分别为55.00%和62.85%。

苦丁茶冬青叶总黄酮微波提取工艺

为了对苦丁茶冬青叶总黄酮工业生产和其资源利用途径提供参考,通过单因素试验和正交试验,对苦丁茶总黄酮微波提取工艺进行研究。结果表明,微波提取苦丁茶冬青叶总黄酮的最佳工艺条件:料液比1∶25,微波功率640W,乙醇浓度60%,微波时间70 s,在此工艺条件下总黄酮提取率为33.67 mg/g。微波法提取苦丁茶冬青叶总黄酮,省时高效。

冬青叶中黄酮类化合物提取方法的研究

以茶果冬青为原料,经微波破壁,水作溶剂回流提取黄酮类化合物,并用2SI—106A型大孔吸附树脂分离纯化,研究了含水量、微波处理时间、处理次数及溶剂种类等因素对提取率的影响.结果表明,实验的最佳条件为:含水量20%,微波处理3次,每次30 s,料液比1∶6和1∶4各回流提取1 h;经2SI—106A型大孔吸附树脂吸附,50%乙醇洗脱,提取率为96.3%,精制后产品收率为4.38%,总黄酮含量25.7%.

大叶冬青苦丁茶多糖提取、纯化与抗氧化活性研究

大叶冬青苦丁茶经85%乙醇溶液脱脂、热水提取、S-8大孔树脂脱色、醇沉、干燥,得到大叶冬青苦丁茶粗多糖。粗ILPS经DEAE-52纤维素阴离子交换层析柱分离,得到4个多糖组分ILPS-1,ILPS-2,ILPS-3和ILPS-4。采用化学法分别测定了粗多糖及其纯化组分的体外清除自由基(DPPH.自由基,O2-.自由基,.OH自由基)能力、还原能力以及螯合金属离子能力。结果表明,大叶冬青苦丁茶多糖具有较强的体外抗氧化活性,并且抗氧化能力与多糖浓度之间存在良好的相关性。

毛冬青叶中总黄酮提取工艺及其抗氧化性能研究

以毛冬青叶为原料,进行毛冬青叶总黄酮提取工艺及其抗氧化性活性的研究,建立以芦丁为标准品,分光光度法测定毛冬青叶总黄酮含量的分析方法。结果显示:以60%乙醇的水为提取溶剂,浓度为60%、料液比为1∶60(g/mL)、50℃水浴5 h条件下提取1次,毛冬青叶总黄酮提取率为15.08%。其总黄酮化合物对羟基自由基(·OH)和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical,DPPH)自由基均有较强的清除效果,最大清除率分别为45.96%和83.33%。

超临界CO_2萃取技术分离和纯化苦丁茶中熊果酸的工艺

对超临界CO2萃取苦丁茶中熊果酸的工艺进行了研究,并采用酸碱沉淀法纯化萃取液。结果表明:在以无水乙醇作为夹带剂,CO2流量为20L·h-1,萃取温度为45℃,萃取压力为30MPa,萃取时间为3h的萃取条件下,萃取效果最好,萃取率可达0.453%,最终能得到w=21.44%纯度的熊果酸粗品。该工艺优于传统的熊果酸提取方法,适于产业化生产。

大叶冬青叶中总黄酮测定方法和提取工艺研究

采用氯化铝法、硝酸铝-亚硝酸钠法分别测定大叶冬青叶中的总黄酮含量。实验结果表明两种方法的测定结果相差很大,通过显色机理的分析,确立了氯化铝法为大叶冬青叶总黄酮含量测定的适宜方法,方法的回收率90.7%～109.5%,平均回收率为97.8%,相对标准偏差2.2%。通过正交试验研究了大叶冬青叶中总黄酮提取工艺,结果表明其适宜工艺条件为液料比12:1(V/m)、乙醇浓度60%、提取时间2h、提取次数2次,此条件下总黄酮得率为0.68%。

超声浸渍法萃取苦丁茶防晒成分工艺的可视化分析

对超声浸渍法萃取苦丁茶防晒成分的工艺条件进行了系统研究。选择超声时间、超声温度、萃取剂乙醇溶液中乙醇体积分数和样品目数4个主要影响因素，运用多因素多水平可视化设计法安排超声萃取实验。以防晒光区紫外吸收面积值作为防晒成分萃取浓度的实验评定指标，用自主提出的多因素多水平实验结果可视化分析方法对多维空间实验数据进行分析。结果表明，当苦丁茶萃取母液质量浓度为25．0g·L-1时，超声浸渍陈化1d后，优化工艺条件为：超声时间30～40min，超声温度25～35℃，p（乙醇）=45％～70％，原料目数120～160目。

苦丁茶多糖的提取分离纯化及部分理化性质研究

以多糖提取率为指标,采用单因素实验和正交实验对苦丁茶多糖的提取工艺条件进行优化,确定最佳提取工艺为:水料比20:1、80℃、提取50 min。在此条件下,苦丁茶多糖提取率为2.43%,先后采用Sevag法脱蛋白、分级醇沉法、DEAE—52纤维素离子交换柱层析法对其进行分离纯化,最后得到K_1和K_22个组分。同时对各苦丁茶多糖进行理化性质分析,结合Sevag法预实验所得出的结果,推测苦丁茶多糖可能为以某种方式结合蛋白的糖缀合物。

苦丁茶冬青叶多糖的分离纯化及其对羟自由基的清除作用

苦丁茶冬青叶经乙醇脱脂、水提醇沉和Sevag法除蛋白,得苦丁茶冬青叶粗多糖KPSⅡ。KPSⅡ经DEAE-纤维素阴离子交换层析柱分离纯化,得到两个纯化多糖组分KPSⅢa和KPSⅢb。KPSⅢa和KPSⅢb经过硫酸水解,还原乙酰化,用气相色谱方法测定了其组成及相对含量。KPSⅢa与KPSⅢb均主要由阿拉伯糖、木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖组成,其摩尔比分别为10.2:1.0:1.2:8.0:5.4和17.7:1.0:1.1:1.8:4.1。以Fenton反应为产生·OH模型,用紫外分光光度法实验了苦丁茶冬青叶多糖(KPSⅡ、KPSⅢa、KPSⅢb)对模型中产生的·OH的清除作用。结果表明,KPSⅡ、KPSⅢa、KPSⅢb对·OH都具有一定的清除作用,且清除率与多糖的浓度存在一定的量效关系。苦丁茶冬青叶粗多糖KPSⅡ对·OH的清除作用均比纯化多糖(KPSⅢa、KPSⅢb)强。

大叶苦丁茶抗氧化成分的提取及活性的比较研究

大叶苦丁茶是一种传统的食药两用茶饮品,含有多种活性成分,为了提高大叶苦丁茶的利用效率,采用85%乙醇提取,并依次分别用等体积的石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇进行液-液萃取,分别得到石油醚组分(PS)、乙酸乙酯组分(PA)、氯仿组分(PC)、正丁醇组分(PB),和剩余的水溶性部分(PW)。随后采用化学方法对各组分进行定性和定量鉴定,并研究了各组分体外对DPPH自由基的清除作用,和体内对脂质过氧化小鼠血清中SOD和MDA的影响。结果表明,乙酸乙酯萃取组分主要为酚类和黄酮类,氯仿萃取组分中主要为蛋白质和生物碱类,正丁醇萃取组分主要为蛋白质类物质,而水相主要含有蛋白质和糖类。PA对DPPH自由基清除作用最好,当其浓度为100mg/m L时,最高清除率可达到50%。其次是PW、PC和PB。此外体内抗氧化实验表明PA和PW能够显著提高小鼠血清中SOD活性,降低MDA产量,与阳性对照组治疗效果接近,与模型组有显著差异。

中药枸骨叶研究进展

枸骨叶是苦丁茶的主要基源植物之一,作为日常保健饮品,具有减肥、强身健体的功效,其化学成分包括黄酮及其多酚类化合物、三萜及其皂苷和多种微量元素等。近年药理学研究表明,枸骨叶具有抗心肌缺血,降血脂、抗氧化、抗菌、免疫抑制,抗生育等广泛的药理作用。为了解枸骨叶与苦丁茶、十大功劳叶之间的关系,进一步深入研究枸骨叶的药效物质基础和作用机制,本文对枸骨叶的本草考证、化学成分、提取工艺、药理作用等方面进行综述,以期对今后枸骨叶的研究开发有所裨益。