毛冬青中IlexgeninA和IlexsaponinA1的分离和NMR归属

从岭南地区习用药毛冬青Ilex pubescens Hook．Et．Am．根的乙酸乙酯提取物中分离得到2个化合物，经理化鉴定及波谱技术分析，并结合文献对照，鉴定为乌苏烷型三萜——毛冬青皂苷元A（ilexgenin A，1）和乌苏烷型三萜皂苷——毛冬青皂苷A1（ilexsaponin A1，2）。首次利用2DNMR（^1H-^1H COSY，HMBC和HMQC）技术对此两个化合物的^1H和^13CNMR数据进行了全归属。

加速溶剂萃取/HPLC-MS对毛冬青药材中Ilexgenin A与Ilexsaponin A_1含量的测定

建立了加速溶剂萃取／高效液相色谱-质谱法（ASE／HPLC—MS）测定毛冬青药材中活性成分ilexgenin A和ilexsaponin A1含量的方法。采用ASE萃取毛冬青药材中的活性成分ilexgenin A和ilexsaponin A1，萃取溶剂为甲醇，萃取温度100℃，压力1．0×10^7 Pa，静态萃取模式，循环3次，每次萃取10min。采用HPLC—MS对萃取液中ilexgenin A和ilexsaponin A1进行定量分析，色谱柱选用Dikma Diamonsil C18（4．6mm×250mm，5μm），以水和乙腈为流动相进行梯度洗脱，大气压化学电离源（APCI），定量离子m／z485。ilexgenin A和ilexsaponin A1的线性范围为1．0～200．0mg／L，对毛冬青试样的定量下限分别为19．5和35．0μg/g，RSD分别为6．7％和7．8％，回收率分别为87％～96％和93％-102％。将建立的方法用于分析11个不同产地的毛冬青药材，ilexgenin A含量为0．42～6．3mg／g，ilexsaponin A1含量为0．80～8．9mg／g。

毛冬青皂苷在大鼠体内的药物动力学研究

目的研究毛冬青皂苷(ilexsaponin A1)静脉给药后在大鼠体内的药物动力学特性。方法大鼠尾静脉注射给予毛冬青皂苷ilexsaponin A1(30 mg/kg),用HPLC法测定血药浓度,采用DAS2.0软件分析其药代动力学参数。结果大鼠静脉给药后,ilexsaponin A1在体内呈二室模型分布,主要药代动力学参数为:t1/2(α)=3.542min,t1/(2β)=17.636 min,CL=0.02 L.min-1.kg-1,AUC(0→)t=1096 mg.min.L-1,tmax=5 min,Cmax=52.972 mg.L-1。结论该法可用于大鼠血浆中ilexsaponin A1的检测及其体内药物动力学研究;静脉给药后,ilexsaponin A1在大鼠体内分布和消除迅速。

毛冬青药材中毛冬青皂苷甲和毛冬青皂苷B_2的含量测定的研究

目的建立毛冬青药材的含量测定方法。方法采用Lichrospher-C18色谱柱(4.0 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%醋酸溶液(37∶63),流速1 ml/min,蒸发光散射检测器:漂移管温度107℃,气体流速2.6 L/min。结果毛冬青皂苷甲在5.19～64.88μg浓度范围内线性关系良好,r=0.999 8(n=6),平均回收率为100.26%,RSD=1.09%(n=6);毛冬青皂苷B2在0.9～11.25μg浓度范围内线性关系良好,r=0.999 7(n=6),平均回收率为101.39%,RSD=1.46%(n=6)。结论该法操作快速、准确,可作为毛冬青药材的质量控制方法。

HPLC波长切换法同时测定心舒宁片中有效成分的含量

目的:建立HPLC波长切换法时测定心舒宁片中槲皮素、葛根素、山柰素、异鼠李素、毛冬青皂苷B2、毛冬青皂苷A1、毛冬青皂苷B1和冬青素A的含量。方法:采用Inertsil ODS-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.4%磷酸溶液,梯度洗脱,流速为1.0 ml·min^-1,进样量为10μl,柱温为25℃,检测波长为360 nm(槲皮素、山柰素、异鼠李素)、250 nm(葛根素)、210 nm(毛冬青皂苷B2、毛冬青皂苷A1、毛冬青皂苷B1、冬青素A)。结果:槲皮素、葛根素、山柰素、异鼠李素、毛冬青皂苷B2、毛冬青皂苷A1、毛冬青皂苷B1和冬青素A的线性范围分别为10.406~208.120μg·ml^-1,15.426~308.520μg·ml^-1,2.358~47.160μg·ml^-1,5.352~107.040μg·ml^-1,2.688~53.760μg·ml^-1,6.620~132.400μg·ml^-1,5.784~115.680μg·ml^-1,21.604~432.080μg·ml^-1(r≥0.9994);平均加样回收率为98.4%~101.3%(RSD<2.0%,n=6);精密度、重复性、稳定性(24 h)试验的RSD<2.0%(n=6)。结论:所建立的方法稳定、可靠,可用于心舒宁片的质量控制。

HPLC-ELSD测定壮药山绿茶中3对三萜同分异构体含量

建立山绿茶中海南冬青皂苷D、冬青皂苷A1、3β,19α-dihydroxyolean-12-ene-24,28-dioic acid（命名为ilexhainanin E）、冬青素A、齐墩果酸、熊果酸等3对齐墩果烷型、乌苏烷型三萜同分异构体HPLC-ELSD含量测定方法,用于指导山绿茶药材的质量控制。以6种三萜成分为对照品,采用Waters XBridge C（18）色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,甲醇（A）-0.5%甲酸水溶液（B）为流动相,梯度洗脱（0～18 min,70%～85%A;18～20 min,85%～95%A;20～35 min,95%A）,流速1.0 m L·min^-1;柱温30℃;ELSD漂移管70℃,载气为N2,流速2.8 L·min^-1。进样量10μL。6批山绿茶药材中海南冬青皂苷D、冬青皂苷A1、ilexhainanin E、冬青素A、齐墩果酸、熊果酸质量分数分别为3.7～8.5,10.3～22.1,2.8～5.9,7.8～14.1,2.6～3.8,8.8～11.9 mg·g^-1。该研究可用于山绿茶药材中三萜成分的含量测定,为该药材质量标准的完善提供参考。

救必应总三萜主要成分在正常和高脂血症大鼠体内的药动学比较

目的比较救必应总三萜主要成分在正常和高脂血症大鼠体内的药动学行为。方法SD大鼠随机分为正常组和模型组,模型组制备高脂血症大鼠模型,各组单次ig救必应总三萜后于不同时间点取血。采用超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)测定大鼠血浆中冬青苷O、oblonganoside I、rotundinoside C、ilexside II、长梗冬青苷、苦丁冬青苷H、毛冬青皂苷A1、竹节参皂苷IVa、救必应酸、rotundanonic acid、冬青素A的浓度,将血药浓度和时间数据导入DAS 2.0软件中以非房室模型拟合药动学参数。结果苷元的吸收速度显著高于三萜皂苷,皂苷含糖的数目越多吸收入血的速度越慢。救必应酸在正常和高脂血症大鼠体内的达峰浓度(Cmax)分别为3257.9、2173.8 nmol/L,药-时曲线下面积(AUC0~t)分别为29897.6、24501.3 nmol·h/L,远超其他10个成分的总和。与正常组相比,模型组大部分成分的达峰时间(tmax)延长,Cmax、AUC0~t降低。结论救必应总三萜主要成分在正常和高脂血症大鼠体内的药动学行为存在显著差异,救必应酸为口服总三萜后大鼠体内的主要暴露成分。