Immunoradiometric assay for carcinoembryonic antigen using avidin-biotin separation technique

A sensitive, specific, noncompetitive, sandwich-type radioimmunoassayfor carcinoembryonic antigen (CEA) has been developed in our laboratoryl which canbe performed conveniently. The assay involves two monoclonal antibodies, selectedfor high affinity and specificity and also for reaction against antigenic sites on CEAthat are distal from each other. One of these antibodies was labeled with 1251 andthe other was conjugated covalently to biotin. Polystyrene tubes were conjugatedcovalently to avidin. These tubes represent a rapid, simple method for separating theCEA-bound antibody from the free antibody. The biotin-antibody-CEA-"’I-labeledantibody complexes bind to the tubes and CEA concentration is directly related tocounts per minute. This assay can detect the CEA at a concentration of 0.22 ig/L inserum.

应用IRMA法与ELISA法测定静脉血斑sTSH的对比研究

应用ＥＬＩＳＡ法和ＩＲＭＡ法测定９５对滤纸静脉血斑ｓＴＳＨ。结果表明，应用ＩＲＭＡ法和ＥＬＩＳＡ法测定同一个体静脉血斑ｓＴＳＨ其结果无差异性，两者存在正相关（ｒ＝０．４９６），回归方程Ｙ血斑ＥＬＩＳＡ法＝０．４５＋０．７６Ｘ血斑ＩＲＭＡ法。即静脉血斑ｓＴＳＨＩＲＭＡ法的５ｍＵ／Ｌ、１０ｍＵ／Ｌ相当于ＥＬＩＳＡ法的４．２５ｍＵ／Ｌ和８．０５ｍＵ／Ｌ；其次，ＩＲＭＡ法和ＥＬＩＳＡ法对静脉血斑ｓＴＳＨ的测定结果与ＩＲＭＡ法对血清ｓＴＳＨ的测定值均有良好的线性回归关系。因此。

胃癌患者胃液血清中CA72-4、CA19-9和CEA联合检测的临床价值探讨

目的:探讨胃液血清CA72-4、CA19-9和CEA联合检测对胃癌的诊断价值。方法:采用IRMA法测定32例各期胃癌和20例良性胃病患者胃液和血清中CA72-4、CA19-9和CEA的含量。结果:胃癌组胃液及血清CA72-4、CA19-9和CEA定值平均水平和灵敏度显著高于良性胃病组(P<0.01);胃癌组胃液CA72-4、CA19-9和CEA测定值平均水平显著高于其血清水平(P<0.01);胃液CA19-9+血清CA19-9+血清CA72-4联合检测效果最高;晚期胃癌患者胃液和血清CA72-4、CA19-9水平和灵敏度高于早期病例(P<0.05)。结论:选择适当的血清、胃液肿瘤标志物联合检测不仅可能提高胃癌的早期诊断率,还能提示肿瘤的扩散和转移,以及预后判断,都有一定的临床价值。

血清胃蛋白酶原、促胃液素对胃癌的诊断价值

目的研究血清胃蛋白酶原Ⅰ(PG I)、胃蛋白酶原Ⅱ(PGⅡ)及促胃液素(GS)与胃癌发生的关系,探讨检验血清PGⅠ,PGⅡ,GS对胃癌的诊断价值。方法采用免疫放射分析法(IRMA)和放射免疫分析法(R IMA)检测36例胃癌患者、23例胃良性病、11例萎缩性胃炎和34例正常人血清蛋白酶原、促胃液素水平并进行比较。结果胃癌患者血清PGⅠ,PGⅡ的水平显著低于胃良性病和正常人组(P<0.05),而血清GS水平显著高于胃良性病和正常人组(P<0.05),其中不同分化程度间差异不明显(P>0.05),术后血清PGⅠ,PGⅡ,GS水平显著低于术前水平(P<0.05),复发组的水平显著高于术后未复发组(P<0.05)。结论检测血清PGⅠ,PGⅡ,GS对胃癌的诊断及区别胃良性病具有较高的临床价值。

应用免疫放射分析法鉴定水稻细菌性条斑病稻种

应用(125)~I-A蛋白与兔抗血清免疫球蛋白IgG非特异性结合原理,建立了检测水稻细菌性条斑病病原菌的免疫放射分析法。经反复检验表明:检测灵敏度约为10~3菌/ml,批内和批间变异参数(CV)均<15％,兔抗血清对其它病原细菌基本上无交叉反应。通过对我国南方6省部分水稻病区的331个品种稻种样品鉴定表明,水稻病区稻种自然带菌非常普遍,其阳性率高达81.3％。采用浓缩接种试验证明,免疫放射分析法应用于自然带菌稻种的鉴定是可行的。

固相抗体包被管法TSH免疫放射分析

采用 TSH单克隆抗体包被聚苯乙烯试管 ,并对抗体包被条件进行了研究 ,建立了 TSH免疫放射分析法。结果表明 :在 2～ 8℃下过夜包被 ,抗体浓度为 2 .1mg/L时 ,制备的包被管用于 TSH免疫放射分析 ,结合达到最大 ;不同浓度下包被 ,包被温度和时间对制备的包被管的影响不同。TSH免疫放射分析最小检测限为 0 .0 5 m IU/L;回收率为 88.4 %～ 10 0 .0 % ;批内、批间变异系数分别为7.4 %～ 10 .9%和 8.7%～ 10 .7%。 4 6例健康人血样测定值为 0 .3～ 6 .2 m IU/L。

PGⅠ,PGⅡ免疫放射分析方法的建立与初步临床试用

目的 建立PGⅠ,Ⅱ(胃蛋白酶原-Ⅰ,-Ⅱ)免疫放射分析法(IRMA),并初步临床试用,探讨其用于胃癌早期诊断的可能性。方法 取抗PGⅠ、PGⅡ单克隆抗体PGA4、PGA7、PGC8、PGC10共四株,在pH9.6的碳酸缓冲液中将PGA4、PGC8包被在聚苯乙烯小珠上成为固相抗体,用氯胺T方法将PGA7、PGC10制成125Ⅰ-标记抗体,与不同量的PGⅠ、PGⅡ标准品在pH7.5的磷酸缓冲液中保温反应,完成标准曲线。取胃癌及正常人血清各50例,检测PGⅠ、PgⅡ值,并作对比。结果对于PGⅠ与PGⅡ标准曲线,BMax/T分别为26.6％和36.5％,BMax/BO分别为73.1和67.6,非特异结合在0.6％以下,检出灵敏度两者均在0.5ng/ml以下;批内变异系数分别为5.3％和6.7％,批问变异系数11.7％和13.1;将不同量的标准加入血清样品中,经测定后所得平均回收率为98.2％和97.7％。正常人PGⅠ、PGⅡ、PGⅠ/PGⅡ值分别为65.2±25.1ng/ml、5.72±4.2ng/ml和10.2±6.9;癌症病人为33.6±22.9ng/ml、9.26±4.90ng/ml和4.04±3.37;两组间差异非常显著,三项P值均小于0.001。结论建成了PGⅠ、PGⅡ免疫放射分析法,初步临床检测显示,胃癌病人的血清PGⅠ降低,PGⅡ升高,PGⅠ/PGⅡ比率降低。本检测法简便经济无损伤,有可能在早期胃癌普查中应用。

老年胃癌患者胃液中肿瘤标志物联合检测的临床意义

目的探讨老年患者胃液中TNFα、CA199和CA724联合检测对胃癌的诊断意义。方法采用放射免疫技术测定42例胃癌、30例浅表性胃炎和31例胃癌前病变的老年患者胃液中TNFα、CA199和CA724浓度。结果胃癌组胃液中TNFα、CA199和CA724的浓度分别显著高于浅表性胃炎组、胃癌前病变组(8.96±2.10)ng/mlvs(5.66±1.65)ng/ml,(4.92±1.24)ng/ml;(59.47±10.58)U/mlvs(38.73±9.23)U/ml,(36.89±11.23)U/ml;(37.08±7.06)U/mlvs(25.42±7.26)U/ml,(23.87±6.31)U/ml;P均<0.001);胃癌组联合检测胃液中TNFα、CA199和CA724,其敏感度、特异度分别为86.9%,83.3%,均分别高于3项标志物的敏感度和特异度(TNFα69.1%,75.4%;CA19965.7%,67.2%;CA72466.7%,70.5%)。结论联合检测胃液中TNFα、CA199和CA724等肿瘤标志物能有助于提高老年患者胃癌的诊断准确率。

鳞癌相关抗原在食管鳞癌中的临床检测价值

用免疫放射量度分析法测定52例食管鳞癌病人血清中的鳞癌相关抗原(SCC Ag)浓度,发现SCC Ag浓度与病期密切相关,总阳性率(>1.5ng/ml)为63.5％,Ⅰ～Ⅳ期阳性率分别为0、25、73.1和85.7％。SCC Ag在根治性切除术后可在72h内降至正常,若肿瘤未彻底切除则不能显示同样改变。SCC Ag在肿瘤复发或转移时重新显著增高,并先于临床表现。研究结果表明,SCC Ag能反映肿瘤的情况,有助于食管鳞癌的辅助诊断、预测预后、监测手术疗效及病情变化,及早发现复发或转移。

人促甲状腺激素生物素-亲和素系统免疫放射分析法的建立

报道将ＢＡＳ（生物素－亲和素系统）引入双位点夹心ＩＲＭＡ（免疫放射分析法），建立了人血清ＴＳＨ（促甲状腺激素）固相试管双位点夹心ＢＡＳ－ＩＲＭＡ。该法批内ＣＶ为１．４％—８．３％，批间ＣＶ为６．１％—８．４％，最小检出量为０．０４ｍＩＵ／Ｌ，平均回收率为１００．１６％，灵敏度约是同条件下ＩＲＭＡ的３倍；与ＩＲＭＡ对比测定２０份病人血清ＴＳＨ样品，经统计学处理，两者测定结果呈良好相关性。

免疫放射分析法与浓缩接种法检测稻种带细菌性条斑病病菌的比较研究

浓缩接种法是传统的种子带菌检测方法,对水稻细菌性条斑病菌的可检测浓度为10~5个/ml左右,检测一批样品的速度为7～10d,但由于受到诸多环境因素和寄主的影响,该方法的稳定性和准确性较差。免疫放射分析法是一种新颖的超微量检测技术,由于它具有放射性同位素的灵敏性和血清学的特异性,用于细菌性条斑病菌的检测与前者相比具有许多优点,灵敏度高,可检测浓度为10~3个/ml;速度快,4h左右可得出结果;稳定性好,抗血清冻干品在4℃和-25℃下分别可保存70d和300d;可靠性强,与浓缩接种法的阴性符合率为100％,阳性符合率为63.04％。特别在低浓度下检测准确性更高。

前列腺特异性抗原(PSA)免疫放射分析及临床应用

以１２５Ｉ－抗ＰＳＡ单克隆抗体为示踪剂，抗ＰＳＡ多克隆抗体为固相包被抗体，采用两步法，建立了ＰＳＡ免疫放射分析方法。其灵敏度为０．５μｇ／Ｌ，批内变异系数为１．１％—３．７％，批间变异系数为１．４％—７．０％，平均回收率为９７．５％。测定了１００名６３岁以下健康男性血清ＰＳＡ含量，正常参考值＜３．８μｇ／Ｌ；２０例前列腺良性疾病患者血清ＰＳＡ含量为２４．３±１３．８μｇ／Ｌ；９例前列腺癌患者血清ＰＳＡ含量为８７．０±５６．３μｇ／Ｌ。本法与放射免疫分析法血清ＰＳＡ测定值相关性良好，ｒ＝０．９２４（ｎ＝１０９），与ＰＳＡ酶免疫分析法（ＭａｘｉｍＢｉｏｔｅｃｈ）相关系数为０．７８１（ｎ＝２９）。

促甲状腺素免疫放射药盒的质量评价

对本所生产的 TSH(IRMA)药盒连续 12批的检测数据进行质量评价 ,基本质控内容 :Bmin/ T≤ 0 .3% ,Bmax/ Bmin>190 ,标准曲线经 lg D- lg(B/ Bmax)线性回归 ,r≥ 0 .993,平均批变异系数 (ABCV)≤ 3.4 %。斜率 (B)及截距 (A)的批间变异系数 CV<5 %。质控血清测定值均在参考范围内 ,批内、批间 CV<10 % ,批内、批间偏倚 <15 %。灵敏度为 0 .0 4 6 m IU/ L。药盒于 4℃存放 6 0天除 Bmin/ T略高于质控指标外 ,其它各项指标均正常 ,与 DPC公司 TSH固相包被法药盒测定样品的相关系数 (r)为 0 .986 8,与 TSH放射免疫法测定的 r为 0 .94

前列腺酸性磷酸酶(PAP)免疫放射分析试剂盒的研制

采用包被管分离技术,利用两株抗PAP单克隆抗体,双位点夹心免疫放射分析方法测量人血清中PAP含量。结果表明,该试剂盒分析灵敏度为0.1μg/L;批内变异系数为(8.8～9.6)％;批间变异系数为(7.7～12.3)％;回收率为(96.3～105.0)％;标准曲线范围为2.5～200.0μg/L。与DPC公司CAC PAP IR-MA试剂盒进行方法学比较,相关系数r=0.909。

胃液中CA19-9、CA72-4、CEA检测对胃癌诊断价值的探讨

目的:探讨胃液中CA19-9(糖链抗原19-9)、CA72-4(糖链抗原72-4)、CEA(癌胚抗原)的检测对胃癌的诊断价值。方法:采用IRMA(免疫放射分析)及RIA(放射免疫分析)法分别测定胃癌、慢性萎缩性胃炎、胃黏膜肠上皮化生、胃黏膜异型增生、胃溃疡各15例患者胃液中CA19-9、CA72-4、CEA的含量,以15例慢性浅表性胃炎患者为对照组,结果比较采用方差分析。结果:胃癌组及异型增生组CA19-9测定值平均水平升高,与慢性浅表性胃炎组比较有非常显著性差异(均P<0.01);胃癌组CA72-4测定值平均水平升高,与对照组比较也有非常显著性差异(P<0.01),异型增生组CA72-4测定值平均水平升高,与对照组比较有显著性差异(P<0.05);胃癌组、异型增生组及肠上皮化生组之胃液CEA水平升高,与对照组比较有非常显著性差异(均P<0.01);CA19-9、CA72-4、CEA三项联合检测胃癌灵敏度86.67%,准确性73.33%。结论:合理地检测胃液中CA19-9、CA72-4、CEA,不仅有助于胃癌的治疗监视及复发预测,还有助于高危人群的筛选监测,以提高胃癌的早期诊断率。

血清和腹水IGF-1水平在子宫内膜异位症中的意义

目的 :研究子宫内膜异位症 (EM)患者血清和腹水IGF 1水平及其在EM发病机制中的作用。方法 :采用放射免疫测定法IRMA检测 2 8例EM患者和 15例正常妇女血清和腹水中IGF 1水平。结果 :对照组和EM早期IGF 1的血清和腹水水平比EM晚期显著低 (P <0 .0 5 ) ,而EM早期和对照组之间无明显差异。结论 :IGF 1可能是晚期子宫内膜异位症发生发展和 /或维持的重要的调节因子 ,参与EM的病理生理机制。