免疫毒素BDI-1-PEA的构建及其活性测定

目的 构建新型免疫毒素BDI- 1-PEA ,并进行抗人膀胱肿瘤活性的初步研究测定。方法 应用异型双功能连接剂N -琥珀酰胺酯 3- (2 -吡啶基二硫 )丙酸 (SPDP)将抗人膀胱肿瘤单克隆抗体 (BDI- 1)与铜绿假单胞菌外毒素 (PEA)交联 ,制备出新型免疫毒素BDI- 1-PEA。应用四甲基偶氮唑盐 (MTT)法初步检测其对人膀胱肿瘤细胞系E -J的选择性杀伤活性。结果 BDI- 1-PEA结合物具有高效靶向杀伤膀胱肿瘤细胞的能力 ,优于游离PEA或PEA与BDI- 1的混合物。结论 新型免疫毒素BDI- 1-PEA有较高的选择性抗人膀胱肿瘤细胞的活性 。

免疫毒素抗膀胱癌的实验与初步临床应用

目的:探讨抗人膀胱癌单克隆抗体绿脓杆菌外毒素(BDI-1-PEA)对膀胱癌细胞的特异杀伤作用。方法:应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测10-10～10-7mol/L浓度下的BDI-1-PEA、抗人膀胱癌单克隆抗体(BDI-1)、BDI-1和绿脓杆菌外毒素(PEA)的混合物(PEA+BDI-1)对体外癌细胞的杀伤能力。接种于裸鼠背部皮下的癌细胞长至直径0.3cm大小实体瘤时,随机分三组,每组10只裸鼠,于尾静脉隔日分别注入100倍半致死剂量浓度(1×10-7mol/L)的BDI-1-PEA100!l及相同剂量的BDI-1、正常小鼠IgG共6次,观察不同的药物对癌的抑制作用。24例膀胱移行细胞癌术后患者应用100倍半细胞致死剂量浓度(1×10-7mol/L)50mlBDI-1-PEA进行了膀胱灌注治疗,每周2次,共8次。每3个月复查膀胱镜或B超。结果:BDI-1-PEA抗膀胱癌细胞系E-J的作用明显优于单抗及毒素与单抗的混合物(P<0.01),与对非靶细胞肾肿瘤细胞系786-0的细胞毒性作用相比较差异非常显著。24例膀胱移行细胞癌术后患者,用药后随访7～22个月,平均15个月,2例患者复发。结论:BDI-1-PEA对膀胱癌细胞具有特异杀伤作用,对预防膀胱癌术后复发有较好疗效。