<i>In Vitro</i>Germination and Early Vegetative Growth of Five Tomato (<i>Solanum lycopersicum</i>L.) Varieties under Salt Stress Conditions

In Senegal, tomato (Solanum lycopersicum L.) cultivation is affected by salinity in many agro-ecological zones. The selection of salt tolerant varieties would be an alternative solution to enhance the production. Thus, germination and growth are studied under axenic conditions for five varieties of tomato subjected to increasing concentrations of NaCl [0, 35, 70 and 105 mM], and supplemented in an MS/2 medium for 30 days. The results reveal that salt negatively affects the evaluated parameters. The Rodeo and Lady Nema varieties have the lowest final germination rates (50%) unlike the Mongal variety (55%). These last two varieties have a decrease of 71.78% and 81.28% in the height of the stem, respectively, in the presence of NaCl at [105 mM] while that of the Rodeo variety is 70%. The Xewel variety has the greatest average number of leaves in the presence of [NaCl 35 mM] (4.95 leaves) and [NaCl 70 mM] (4.77 leaves). The Lady Nema variety records the longest taproot length (2.99 cm) unlike the Rodeo variety (2.25 cm) at [NaCl 105 mM]. The Ganila variety reveals the highest number of secondary roots at the concentrations of [0, 35 and 105 mM] of NaCl with, respectively, 44.12, 29.25, and 4.25 roots. The Lady Nema variety records the highest fresh weight of aerial (0.055 g) and root parts (0.014 g) and the lowest root dry weights (0.0023 g). These results allow to conclude that the Lady Nema and Mongal varieties seem more tolerant, Ganila and Xewel are moderately tolerant and Rodeo is more sensitive to the presence of salt.

Spatiotemporal Neural Activity Changes in the Molluscan Olfactory Center Specifically Induced by Innately Aversive and <i>In Vitro</i>Aversively Conditioned Odors

In the procerebrum (PC), the olfactory center, of the land slug Limax, an oscillation of local field potential (LFP) with 0.5 - 1 Hz is observed by electrophysiological extracellular recording. The oscillation has a phase delay along the distal-proximal axis, resulting in the propagation of waves from the distal to proximal region. One important advantage of nervous systems of mollusks such as Limax is that their nervous systems in vitro retain several types of computational properties found in vivo (e.g. learning and memory). A previous study showed that the LFP frequency in the PC of Limax increased specifically in response to innately aversive and in vitro aversively conditioned odors. In the present study, we examined spatiotemporal neural activity changes induced in the PC by those odors using the fluorescent voltage imaging technique. The results showed that innately aversive (onion and hexanol) and in vitro aversively conditioned (carrot, which is innately attractive) odors specifically induced an increase in propagation speed of the neural activity in the PC, while innately attractive odors did not induce it. The results also suggested that the avoidance behavior by those odors might be induced by the increase of propagation speed and the following increases in the discharges of the partial nerve that transmits the motor output.

<i>In Vitro</i>Germination and Early Vegetative Growth of Five Tomato (<i>Solanum lycopersicum</i>L.) Varieties under Water Stress Conditions

Water is the main limiting factor in the cultivation of tomato (Solanum lycopersicum L.) in Senegal. Thus, the selection of varieties tolerant to water stress would be an alternative solution for their production. In vitro germination, growth, total chlorophyll and proline levels were studied in five varieties of tomato subjected to increasing osmotic pressures (0, 5, 10 and 15 kPa) thanks to the PEG-8000 incorporated in an MS/2 medium for 30 days. A strong sensitivity to water stress for in vitro seed germination in the Rodeo variety (41%) is recorded at 5 kPa and maintained at 15 kPa (20.83%) while it was only noticed at 15 kPa in the other tomato varieties. The Xewel and Lady Nema varieties obtained the smallest reductions in the number of leaves of vitroplants, with 30.79% and 27.97% at 15 kPa, respectively, and the Rodeo variety recorded a reduction of 35.97%. From 5 kPa, the varieties record reductions in the number of secondary roots of more than 15%. The effect of osmotic pressures on decreasing the taproot height and length is not significant. The Xewel variety had the highest average fresh (0.483 g) and dry (0.082 g) weights of the aerial part at 15 kPa and the Rodeo variety had the lowest ones (0.308 g and 0.0501 g). The Lady Nema variety had the highest average fresh (0.171 g) and dry (0.039 g) root weights and the Rodeo variety had the lowest ones (0.086 and 0.020 g). The vitroplants of Rodeo variety recorded the highest decreases in total chlorophyll contents at all osmotic pressures and the lowest increase in proline content (53.37%) at 15 kPa. A contrario, the Xewel variety recorded the greatest increase in proline content (116.26%). Ultimately, the vitroplants of Lady Nema and Xewel varieties were more tolerant to water stress, the Ganila and Mongal varieties were moderately tolerant and the Rodeo variety was the most sensitive.

Effect of Growing Conditions of Rice Donor Plants on Anther Culture in Vitro

An experiment was conducted to find the effect of three types of donor plants growing conditions （growth chamber, open space ＋ growth chambers and open space） on callus induction and subsequent plant regeneration and productive shoot regeneration from the anthers culture in vitro of four rice hybrid （1-2, 2-1, 7-1, 13-3） developed by Primorsky Scientific Research Institute of Agriculture. Five variants of N6 medium （N6-I, N6-2, N6-3, Mix-l, N6-4） were used as basal medium. Mean value of callus induction frequency on three types of conditions ranged from 5.68% to 9.44% and the difference was non-significantly. In general, callus derived from donor plants grown on condition of open space ＋ growth chambers showed significantly better performances for plant regeneration （0.23 green regenerants on anther and 3.77 green regenerants on callus） and productive shoot regeneration （0.06 productive regenerants on anther and 0.56 productive regenerants on callus）. Favourable conditions for donor plant growth in open space positively affect on callus induction and regenaration. It is possible to get assured results on many hybrids, but not the highest. In growth chamber, frequency of callus induction can be the maximal only on some samples, few hybrids are resulted in deficiency of callus induction.

新生大鼠原代软骨细胞分离和培养方法的改进

目的:探讨新生大鼠原代软骨细胞分离和培养的改进方法,以建立高效经济的体外软骨细胞培养体系。方法:从新生大鼠关节中分离原代软骨细胞,分为过夜消化(OD)组和快速消化(RD)组进行分离,OD组软骨细胞采用Ⅱ型胶原酶过夜消化,RD组软骨细胞采用预消化的物理化学消化相结合的手段分离细胞。采用含0%(空白组1)、1%、2%、4%和10%胎牛血清(FBS),0(空白组2)、0.1、0.2、0.4、0.8、1.0、2.0 g·L^(-1)维生素C(VC)和0(空白组3)、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、10.0μg·L^(-1)聚乳酸-羟基乙酸共聚体(PLGA)纳米粒子的改良培养液培养软骨细胞。将杜氏改良Eagle培养基F12营养混合液(DMEM/F12)与含不同浓度FBS、VC和PLGA的培养液分别混合,并按照各成分浓度进行相应分组。采用细胞计数仪计数各组细胞并检测各组细胞存活率和直径,采用甲苯胺蓝特异性染色法检测各组细胞形态表现,采用CCK-8法检测各组细胞增殖活性,采用细胞黏附实验检测各组细胞黏附率,采用Hoechst/碘化丙碇(PI)染色检测各组细胞凋亡情况,采用MTT法检测改良培养液培养后各组细胞增殖活性,将细胞分为DMEM/F12+10%FBS组(对照组)、DMEM/F12+1%FBS组、DMEM/F12+1%FBS+0.4 g·L^(-1)VC+1μg·L^(-1)PLGA组,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测改良培养液培养后各组细胞中性别决定区域Y框转录因子9(SOX9)、Ⅱ型胶原α1链(Col2A1)、Ⅹ型胶原α1链(Col10A1)和基质金属蛋白酶13(MMP13)mRNA表达水平,采用免疫荧光染色检测改良培养液培养后各组细胞中Ⅱ型胶原(COLⅡ)和SOX9表达情况。结果:OD组原代软骨细胞存活率小于RD组,细胞平均直径大于RD组。OD组原代软骨细胞形态较大,呈梭形,大多数细胞出现伪足;RD组原代软骨细胞形态较小,大多数细胞呈菱形,仅部分细胞出现伪足。2组原代软骨细胞经甲苯胺蓝特异性染色均显色明显,但RD组消化时间较短,软骨细胞实际培养时间较OD组缩短9~13 h,原代软骨细胞形态更为幼稚。OD组原代软骨细胞在培养24 h时增殖较为缓慢,培养48 h时增殖速度升高,较培养12 h时增殖活性明显升高(P<0.01)。RD组原代软骨细胞在培养24 h时增殖稍缓,培养48 h时增殖速度加快,较培养12 h时增殖活性明显升高(P<0.01);培养24和48 h时,与OD组比较,RD组原代细胞增殖速度升高(P<0.05)。RD组软骨凋亡细胞数少于OD组,2组均无坏死软骨细胞。大鼠软骨细胞增殖活性随着培养液中FBS浓度升高而升高,与空白组1比较,培养液中含1%、2%、4%和10%FBS时,软骨大鼠细胞增殖活性明显升高(P<0.05)。与空白组2比较,培养液中含0.2~1.0 g·L^(-1)VC时大鼠软骨细胞增殖活性明显升高(P<0.05),其中含0.4 g·L^(-1)VC时大鼠软骨细胞增殖活性最高(P<0.01)。与空白组3比较,培养液中含1~4μg·L^(-1)PLGA时,大鼠软骨细胞增殖活性明显升高(P<0.05),其中含1μg·L^(-1)PLGA时大鼠软骨细胞增殖活性最高(P<0.05)。与DMEM/F12+10%FBS组比较,DMEM/F12+1%FBS组大鼠软骨细胞中SOX9 mRNA和COL2A1 mRNA表达水平均明显升高(P<0.05或P<0.01)。与DMEM/F12+10%FBS组比较,DMEM/F12+1%FBS+0.4 g·L^(-1)VC+1μg·L^(-1)PLGA组大鼠软骨细胞中SOX9 mRNA和COL2A1 mRNA表达水平明显升高(P<0.01)。免疫荧光染色,荧光显微镜下DMEM/F12+10%FBS组部分软骨细胞中出现COLⅡ绿色荧光信号和SOX9红色荧光信号,荧光强度弱;DMEM/F12+1%FBS组大多数软骨细胞中出现COLⅡ绿色荧光信号和SOX9红色荧光信号,荧光强度明显强于DMEM/F12+10%FBS组;DMEM/F12+1%FBS+0.4 g·L^(-1)VC+1μg·L^(-1)PLGA组软骨细胞中均出现COLⅡ绿色荧光信号和SOX9红色荧光信号,荧光强度较DMEM/F12+10%FBS组和DMEM/F12+1%FBS组明显升高。DMEM/F12+1%FBS组软骨细胞中COLⅡ和SOX9蛋白表达量明显高于DMEM/F12+10%FBS组,DMEM/F12+1%FBS+0.4 g·L^(-1)VC+1μg·L^(-1)PLGA组软骨细胞中COLⅡ和SOX9蛋白表达量明显高于DMEM/F12+10%FBS组。结论:改良后的大鼠原代软骨细胞分离和培养方法可以弥补传统方法的缺陷,缩短原代软骨细胞的分离时间,提高原代软骨细胞的体外培养质量。

玉米花粉离体萌发的研究

本研究旨在探究不同培养基组分对玉米花粉萌发的影响,并筛选出最适宜玉米花粉离体萌发的培养基。通过单因素实验,比较了不同浓度的蔗糖、葡萄糖、乳糖、麦芽糖、硼酸和氯化钙对多个玉米品种花粉活力的作用。结果表明,含有0.35 mol/L蔗糖、0.85%琼脂、0.01%硼酸和0.03%氯化钙的培养基能够使对照花粉达到最佳萌发效果,为51.6%。然而,该培养基对于不同品种的玉米花粉影响差异显著,实验中8个玉米品种的花粉萌发率在1.8%~21%之间,显示出‘e12’品种的花粉萌发最为适宜,而‘e11’品种的花粉萌发则不适宜。本研究筛选出的最适培养条件为玉米花粉离体萌发机制的研究及玉米遗传育种提供了重要的理论依据和参考。

踝关节假体磨损测试及仿真研究进展

假体磨损造成的无菌性松动是人工踝关节失效的主要原因,而人工踝关节磨损的模拟机测试和数值仿真是临床前评估假体磨损性能的重要方法。本文对国内外踝关节假体磨损研究中采用的力学和运动学曲线进行了对比,并对相关研究结果进行总结、归纳和分析。结果表明:①早期研究没有ISO测试标准,造成各研究的加载条件主要在轴向载荷和前后位移上存在差异,因此很难通过横向对比得到踝关节假体的磨损规律。②国外研究了踝关节假体的设计、材料、测试条件及润滑介质等因素对磨损测试结果的影响,然而国内暂未检索到相关文献发表。③人工踝关节磨损的数值仿真结果与体外测试结果相近,这表明经验证的磨损模型能够用于预测踝关节假体的磨损性能。

捕蝇草花粉活力及柱头的可授性研究

采用TTC、I_(2)-KI、孢粉染色法和离体萌发法分别检测了4个捕蝇草品种的花粉活力,筛选出了离体萌发法是最有效的测定方法。在此基础上,优化捕蝇草花粉离体萌发的培养条件和培养基组分,获得了最佳方案,并利用该方案,比较了4个品种捕蝇草在不同时间段内的花粉活力,利用联苯胺—过氧化氢法测定了不同开花阶段的捕蝇草柱头的可授性。结果表明:虽然TTC染色法、I_(2)-KI染色法和孢粉染色法都能使捕蝇草花粉染色,但无法有效地区分花粉是否有活力,而离体萌发法能够准确、直观地反映捕蝇草花粉活力的状况,是一种有效测定捕蝇草花粉活力的方法。通过单因素试验得出:在pH值5.0、温度30℃的条件下,捕蝇草花粉的萌发率最高。培养基组分对捕蝇草花粉萌发的影响大小依次为硼酸>蔗糖>MES,最佳组合为:0.1 g/L硼酸+2 g/L硫酸镁+0.08 g/L氯化钾+0.6 g/L氯化钙+1.8 g/L肌醇+3 g/L MES+100 g/L蔗糖,此组合下捕蝇草的花粉萌发率高,达62.23%;不同品种之间的捕蝇草花粉活力存在极显著差异,其花粉活力最高达62.14%,最低仅为2.60%;在一天之中,9:00~11:00的捕蝇草花粉活力最强,达51.83%;捕蝇草柱头的可授性随着花朵的开放而增强,开花后第4~5天的可授性最强。

大豆皮发酵酶解条件优化效果研究

本试验旨在优化菌酶发酵水解大豆皮的条件,并通过体外仿生法探究发酵酶解对大豆皮营养成分和微生物群落的影响,评价其对大豆皮营养价值的改善效果。利用正交试验优化发酵酶解大豆皮条件,其中发酵温度分别为33、35和37℃,料水比分别为1.0∶1.9、1.0∶2.0和1.0∶2.1,发酵时间分别为5、6和7 d,纤维素酶与木聚糖酶比例分别为1.0∶1.5、1.0∶2.0和1.0∶2.5。然后检测大豆皮在最优发酵酶解条件下营养价值的改善效果,并通过体外模拟猪胃、小肠和结肠环境,评价发酵酶解后的大豆皮在体外消化和发酵的情况。体外模拟消化试验设2组,分别为未处理的大豆皮组(对照组)和菌酶处理的大豆皮组(发酵酶解组),每组4个重复。结果表明:1)正交试验确定的最优发酵酶解条件为发酵温度33℃、料水比1.0∶2.1、发酵时间6 d以及纤维素酶与木聚糖酶比例1.0∶2.5。2)在最优发酵酶解条件下,与对照组相比,发酵酶解组大豆皮中粗蛋白质、还原糖和乳酸含量显著提高(P<0.05),粗纤维、中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维含量显著降低(P<0.05),脲酶活性以及大豆球蛋白和β-伴大豆球蛋白含量也显著降低(P<0.05)。3)与对照组相比,发酵酶解组大豆皮干物质和粗蛋白质体外消化率显著提高(P<0.05);发酵酶解组发酵液中乙酸、丙酸、异丁酸和总短链脂肪酸含量显著降低(P<0.05),pH显著提高(P<0.05)。4)与对照组相比,发酵酶解组体外发酵体系中微生物群落Chao1指数显著提高(P<0.05),表明发酵酶解显著提高了发酵液微生物的丰富度;发酵酶解组与产纤维素酶相关菌和与产丁酸、丙酸及异丁酸相关菌的相对丰度显著降低(P<0.05),与氢代谢相关菌的相对丰度显著提高(P<0.05)。由此表明,菌酶发酵水解大豆皮能够显著改善大豆皮的营养价值。

石蒜与萱草远缘杂交育种研究

目的:为培育石蒜属植物新品种(系)提供参考依据。方法:以石蒜属(Lycoris)、朱顶红属(Hippeastrum)、萱草属(Hemerocallis)植物为试材,采用花粉离体培养、田间杂交、胚拯救等方法,研究了石蒜属植物在远缘杂交过程中的生殖隔离。结果:1、在花粉活力测定中,所得最适宜朱顶红花粉萌发的培养基组成为:70 g/L蔗糖+5 mg/L硼酸+0.01 g/L氯化钙+50 g/LPEG-4000;萱草组花粉的最适培养基组成为:100 g/L蔗糖+0.3 mg/L硼酸+0.4 mg/L氯化钙。2、以石蒜属植物作母本,设计8个杂交组合试验,结果表明子房膨大率随杂交组合的不同而呈现差异性,其中与四倍体萱草杂交组合所得平均子房膨大率为59.81%,高于二倍体萱草组(33.12%)。3、胚拯救初期,各组合获得胚珠0~44个,其中鹿葱×萱草‘金娃娃’组合最多,中国石蒜×萱草‘金娃娃’组合最少。胚珠膨大率随杂交组合的不同出现差异,7个杂交组合的胚珠均发生膨大,膨大率在1.79%~96.15%之间。其中鹿葱×'Custard Candy'组合胚珠膨大率较高(96.15%),稻草石蒜×'Custard Candy'组合的胚珠膨大率极低(1.79%)。4、石蒜属植物与多倍体萱草杂交后代胚拯救最适培养基配方为MS+1.0 mg/LNAA+2.0 mg/L 6-BA+60.0 g/L蔗糖和MS+2.0 mg/LNAA+1.0 mg/L 6-BA+60.0 g/L蔗糖,60 d后1个胚珠萌发,诱导率为0.709%,不定芽繁殖系数为4;5个胚珠存活未萌发。结论:石蒜与萱草存在严重生殖隔离,通过胚拯救,远缘杂交所得胚珠已萌动,还需进行杂种鉴定以及后续分析。

外植体及培养条件对葡萄不定芽再生的影响

以优良无核葡萄品种莫利莎、皇家夏天为试材,分别从外植体类型、叶片接种部位、接种方式及培养条件等方面进行不定芽再生技术研究。结果表明,2品种葡萄试管苗离体叶片切割后接种较节间和叶柄容易诱导不定芽再生;将叶片切分为叶尖、叶中、叶基部叶块分别接种,其不定芽再生能力没有差异;取自培养30～50d继代苗上的叶片,其不定芽再生效果相同;叶块以近轴面或远轴面接触培养基的接种方式对不定芽再生影响不大,不过叶片远轴面贴近培养基接种,产生的愈伤组织状态较好;25℃左右小幅变温或恒温的条件能诱发2个葡萄品种产生较多的不定芽;葡萄不定芽再生须经黑暗培养或弱光培养,暗培养时间在2周与4周之间再生效果差异不显著。

CO_2施肥时非无菌条件下树脂膜容器内文心兰试管苗接种技术

以文心兰 (Oncidium)品种‘AlohaIwanaga’为实验植物材料 ,采用高透气性的树脂膜培养容器 (有利于有毒气体的排放 ) ,在培养基中添加不同浓度 (0 %、0 0 0 1%、0 0 0 5 %、0 0 1%、0 0 5 % )的NaClO ,进行非无菌环境下 (不使用超净工作台 )文心兰试管苗的接种实验 .结果表明 ,常规培养条件下使用有糖培养基NaClO浓度为 0 0 1%与CO2 施肥条件下使用无糖培养基NaClO浓度为 0 0 0 5 %和 0 0 1%时 ,培养过程中均未见污染现象发生 .培养后的试管苗在主要生长指标方面与对照 (不添加NaClO、无菌条件下接种 )相比无明显差异 ,表明采用树脂膜培养容器可以在有菌条件下进行文心兰试管苗的接种 .

薄壳山核桃花粉离体萌发和花粉管生长特性研究

以6年生薄壳山核桃优良品种‘金华’的新鲜花粉为试材,采用离体培养法,研究了不同复水时间、不同培养基组分、不同培养温度及培养时间对薄壳山核桃花粉萌发和花粉管生长的影响。结果显示：（1）薄壳山核桃花粉萌发试验前进行4h复水处理可显著提高萌发率,萌发率可达51.78%,为对照（2.51%）的20.68倍。（2）蔗糖、H3BO3、Ca（NO3）2·4H2O在一定浓度范围内均具有促进花粉萌发和花粉管生长的作用,但浓度过高则起抑制作用。（3）正交试验结果经实验验证表明,薄壳山核桃花粉萌发和花粉管生长的最适培养基为20%蔗糖＋0.02%~0.03%H3BO3＋0.05%Ca（NO3）2·4H2O,最佳培养条件为25℃下恒温培养24h,此时的花粉萌发率高达74.46%,花粉管平均长度为258.84μm。

培养基和培养条件对4个梨基因型试管苗生根的影响

试验以4种基因型梨试管苗为试材,在含有MS、ASH、1/2MS、1/4MS及不同IBA和蔗糖浓度的培养基上,采用前期光、暗培养各10d,然后转入有无活性碳(AC)和IBA的处理中在光照下生根。试验用L16(45)正交设计,通过生根率、平均根数、平均根长、平均株根鲜重和平均株根干重5个指标考查了基本培养基、IBA、AC以及光照对梨试管苗生根的影响。结果表明:IBA和蔗糖对于梨根的诱导是十分必要的,而在根的生长阶段IBA不是必需的;1.0～5.0mg/LIBA+5.0～15.0g/L蔗糖+0.5～1.0g/LAC组合下梨的生根率为75%～100%;前期暗培养能有效促进东方梨品种早酥梨和身不知根的发生,而对西洋梨品种巴梨和考密斯根的诱导效果较差。

加工对饲料蛋白质体外消化率和糊化度的影响

采用胃蛋白酶-胰蛋白酶两步法和β-淀粉酶法分别测定饲料蛋白质体外消化率和淀粉糊化度，探讨了粉碎、调质和制粒对二者的影响。试验结果表明：饲料调质前的蛋白质体外消化率与粉碎粒度呈显著负相关（P〈0．01），而淀粉糊化度受粒度影响很小；调质使蛋白质体外消化率和淀粉糊化度增加9％～12％和11％。15％，二者的增加值与粒度也呈负相关；制粒使蛋白质体外消化率和淀粉糊化度进一步增加2％～3％和3％～5％。对于蛋白质体外消化率，原料性质和粉碎贡献率为82％～83％，调质为13％～15％，制粒为3％～4％；对于淀粉糊化度，原料性质和粉碎贡献率为52％-56％，调质为30％～38％，制粒为10％-14％。

百合不同品种间花粉萌发活力检测分析

以不同类型百合的花粉为研究对象,探讨不同品种百合花粉萌发的特点以及不同类型百合花粉的萌发是否具有一定的规律性,旨在为百合杂交育种中父本材料的选择以及授粉方法的改良提供依据。以百合5个类型共43个品种的花粉为材料,利用离体萌发法,探讨不同品种百合花粉萌发活力,筛选适用于大部分品种的最佳培养基,结果表明,在蔗糖100g·L^(-1)、硼酸20mg·L^(-1)、琼脂10g·L^(-1)的固体培养基上可以较好地萌发。大多数百合品种都能在12h内达到最大萌发率,也有少数品种在24h还处于萌发状态。百合会因自身遗传特性导致萌发率不同,其中,TR类百合总体萌发活力最强,平均萌发率80.98%;LA类百合萌发率最低,平均为13.49%;OT类、A类和AT类萌发率居中,分别为49.06%,46.05%和50.06%。百合花粉管自身寿命也存在明显差异,在43个百合品种中,发现有18个品种在培养后期花粉萌发率明显下降,这主要是由于培养后期花粉管自身破裂所导致的。因此,在进行杂交育种的过程中,可根据育种目的有针对性地选择父本材料,其中,TR类百合是非常好的父本材料;其他萌发率低于50%的资源做父本时可加大授粉量、采取二次授粉或切割花柱等方式提高授粉成功率;本试验中花粉不能萌发的资源建议不做父本应用。

用发酵法制备桑叶蛋白的工艺优化和产品的体外消化率测定

为了多元化开发利用桑叶蛋白质资源,将桑叶粉用枯草芽孢杆菌发酵制备桑叶蛋白。以桑叶蛋白得率为响应值,通过Plackett-Burman试验设计、最陡爬坡试验和Box-Behnken试验设计对桑叶发酵条件进行优化,并对发酵后桑叶蛋白的体外消化能力进行评价。结果表明,桑叶粉质量浓度、装液量、蔗糖质量浓度和发酵时间对桑叶蛋白得率具有显著影响(P<0.05),其影响大小依次为桑叶粉质量浓度>装液量>蔗糖质量浓度>发酵时间,发酵最优条件为桑叶粉质量浓度2.64mg/mL、装液量105 mL、蔗糖质量浓度22 mg/mL、发酵时间45.1 h。在此优化条件下,桑叶蛋白得率的预测值为16.43%,验证值为16.29%,试验结果重现性良好,建立的桑叶蛋白得率与主要发酵条件因子的数学回归模型可靠。体外消化试验表明,该方法制备桑叶蛋白的体外消化能力得到显著提高(P<0.05),体外消化率比发酵前提高了4.29个百分点。

培养基和培养条件对葡萄试管苗生根的影响

以矢荚罗莎等4种葡萄试管苗为材料，研究了蔗糖浓度、琼脂浓度、pH、光强及温度对葡萄试管苗生根的影响．结果表明：蔗糖浓度为15～20g／L对葡萄试管苗的生根最有利；pH值对试管苗平均根系数量、根粗、根长和根冠比影响显著。生根数与平均根长随pH值升高而减小，平均根粗与根冠比随pH值的增大而增大；琼脂浓度显著影响葡萄试管苗生根．随着琼脂浓度的增加，根源基产生时间延迟，平均根长和根冠比降低，而平均根粗和生根数增加；生根数在3种温度条件下无显著差异，平均根粗随温度的升高略有下降，平均根长和根冠比随培养温度的升高而增加，在35℃时降低；平均生根数、根长、根冠比和根粗均随光照强度的增强而增大．

黄百香果花粉离体培养基筛选及贮藏试验

【目的】分析不同配方培养基及贮藏条件对大果型黄百香果花粉离体萌发效果的影响,为大果型黄百香果花粉活力鉴定、人工辅助授粉及杂交育种提供理论依据。【方法】采集花瓣刚好完全展开大果型黄百香果花朵的花粉,采用L_(25)(5^(4))正交试验设计,筛选适宜其离体培养的蔗糖、硼酸、硝酸钙浓度及pH;利用最适宜花粉离体培养基,开展花朵不同采样时间、花粉离体贮藏湿度和温度对花粉活力影响试验,确定适宜大果型黄百香果花粉的离体贮藏条件。【结果】正交试验分析结果表明,影响大果型黄百香果花粉萌发率的因素排序为硝酸钙>蔗糖>硼酸>pH,确定花粉离体萌发的最适培养基为100.00 g/L蔗糖+0.02 g/L硼酸+0.40 g/L硝酸钙,培养基pH 5.0。在最适培养基中,大果型黄百香果花粉的萌发率为85.55%;于11:30—17:30采集大果型黄百香果花粉的萌发率均在80.00%以上,其中,开花后3 h(16:30)花粉的活力最强,显著高于除13:30和15:30外的其他时间采集花粉的萌发率(P<0.05,下同)。花粉贮藏试验结果表明,平铺在硫磺纸上自然风干处理3~48 h的花粉萌发率均显著高于同时间段密封于离心管中常温贮藏和平铺在硫磺纸上置于干燥器中贮藏处理,其中在硫磺纸上自然风干贮藏48 h的花粉萌发率仍达34.28%;自然风干5 h后密封于离心管中4℃贮藏24 h的花粉萌发率为61.49%,显著高于自然风干5 h后密封于离心管中-20℃贮藏24 h的花粉萌发率(55.22%)。【结论】大果型黄百香果花粉离体萌发最适培养基为100.00 g/L蔗糖+0.02 g/L硼酸+0.40 g/L硝酸钙及pH 5.0;当天采集花朵的花粉自然风干5 h后密封于离心管4℃贮藏其萌发效果最佳。

草鱼肠道离体培养的适宜条件

取 1龄草鱼 (体长 2 0～ 2 5cm)肠道制成常规肠囊样本 ,分别使用Ringer’s液、山本液、今村液以及 1mmol/L亮氨酸 (Leu)溶液和 1uci/mlH3-Leu溶液进行体外培养 ,并设定培养条件分别为 :培养温度 2 0、2 5、30和 37℃ ,培养时间 5、10、30及 6 0min。测定在各条件下草鱼肠道碱性磷酸酶 (AKP)活性和Leu的吸收积累量。结果显示 ,1龄草鱼肠道离体培养最佳条件为 :培养液为山本液 (NaCl 0 .75 % ,KCl 0 .0 2 % ,Ca Cl2 0 .0 2 % ,NaHCO30 .0 0 2 % ) ,培养时间为 5min ,培养温度为 2 5℃。此时 ,草鱼肠道AKP活性为 5 1.6 1金氏单位 ,对Leu的吸收速率为 0 .0 4 72 μmol/ (g·min)。