不同温度对体外模拟体内生理环境寄养断肢系统的影响研究

目的探讨不同温度对体外模拟体内生理环境寄养断肢系统的影响。方法健康成年雄性巴马小型猪6只,体重22～30 kg。取6只猪24个肢体随机分为4组(n=6),将肢体置于体外模拟体内生理环境寄养断肢系统,A组于常温(26℃)下,B、C、D组分别于4、10、18℃低温下体外寄养断肢。12 h后取各组肢体骨骼肌,行组织学及透射电镜观察骨骼肌结构,实时定量RT-PCR检测TNF-α及IL-1βmRNA表达。结果组织学观察示,A组肌纤维变性,肌细胞严重破坏,断裂肌纤维间有大量炎性细胞浸润;B、C、D组组织间轻度水肿,肌膜完整,血管周围偶见炎性细胞浸润,其中C组细胞形态良好。透射电镜观察示,A组肌纤维排列紊乱,可见多处局灶溶解性坏死;B组肌纤维排列较整齐,肌膜尚完整,线粒体轻度肿胀,絮状变性;C组可见大量肌纤维排列整齐规则,肌节清晰;D组肌纤维排列紊乱、不规则,肌纤维溶解。实时定量RT-PCR示,A组TNF-α、IL-1βmRNA表达水平均显著高于B、C、D组(P<0.05);B、C组表达均低于D组,C组低于B组,比较差异亦均有统计学意义(P<0.05)。结论在体外模拟体内生理环境寄养断肢系统中,温度对断肢的保存具有重要作用,其中10℃保存离断肢体可显著抑制再灌注致骨骼肌细胞损伤。