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基于In-Cell Western对Ryanodine受体2检测方法的建立 被引量:1
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作者 王德军 屠珏 +3 位作者 褚燕青 陈方明 蔡月琴 朱科燕 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期346-352,共7页
In-Cell Western技术是基于近红外激光成像系统而开发的检测技术,可应用于大分子ryanodine受体2(Ry R2)蛋白的检测。本研究通过对In-Cell Western固定剂的选择、细胞通透化、封闭液的选择、抗体工作浓度和心肌细胞密度等方面进行优化,... In-Cell Western技术是基于近红外激光成像系统而开发的检测技术,可应用于大分子ryanodine受体2(Ry R2)蛋白的检测。本研究通过对In-Cell Western固定剂的选择、细胞通透化、封闭液的选择、抗体工作浓度和心肌细胞密度等方面进行优化,建立心肌细胞Ry R2蛋白检测的InCell Western方法,并分别用SGF和Verapamil以及免疫细胞化学技术对研究结果及方法进行了验证。优化后的In-Cell Western参数:H9C2细胞的种板密度选择1×104个/孔,选择甲醛作为固定剂,细胞经过Triton X-100洗脱液通透化处理,选择酪蛋白作为封闭液,选择1∶500稀释的Ry R2一抗工作浓度。应用优化的参数检测心肌细胞Ry R2蛋白,并用前期已被证明能显著提高心肌细胞Ry R2蛋白荧光值的土茯苓黄酮和Verapamil进行验证,同时与免疫组化方法检测心肌细胞Ry R2蛋白相比,检测结果一致。表明本文建立的In-Cell Western方法检测大分子功能蛋白Ry R2是可行的。 展开更多
关键词 ryanodine受体2 in-cell WESTERN H9C2细胞
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In-cell Western和Cell ELISA在大分子量蛋白质相对定量中的应用 被引量:2
2
作者 高翔 骞爱荣 +1 位作者 李京宝 商澎 《细胞生物学杂志》 CSCD 2009年第6期882-886,共5页
探讨两种新的检测方法—In-cell Western和Cell ELISA在大分子量蛋白质相对定量中的应用。将培养细胞原位固定、通透化、封闭,然后加入目标蛋白质的一抗、红外荧光标记的二抗或酶标记的二抗,使用双红外成像系统或多功能酶标仪对目标蛋... 探讨两种新的检测方法—In-cell Western和Cell ELISA在大分子量蛋白质相对定量中的应用。将培养细胞原位固定、通透化、封闭,然后加入目标蛋白质的一抗、红外荧光标记的二抗或酶标记的二抗,使用双红外成像系统或多功能酶标仪对目标蛋白质进行相对定量。通过这两种方法检测模拟失重环境对成骨细胞中大分子量骨架相关蛋白——微管微丝交联因子(microtubule actin cross-linking factor 1,MACF1)含量的影响,结果表明模拟失重环境促进了MACF1表达,且这两种方法检测结果一致。In-cell Western和Cell ELISA这两种检测方法灵敏迅速、操作简便,可以用于大分子量蛋白质的相对定量。 展开更多
关键词 in-cell WESTERN CELL ELISA 大分子量蛋白质 相对定量
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The In-cell iR Compensation Using a Four-electrode System
3
作者 Xiang Qin LIN Liang Dong FENG 《Chinese Chemical Letters》 SCIE CAS CSCD 2006年第5期703-706,共4页
A novel idea of in-cell iR compensation was proposed by using a four-electrode electrochemical system, which was consisted of two working electrodes, one reference electrode (RE) and one auxiliary electrode (AE). ... A novel idea of in-cell iR compensation was proposed by using a four-electrode electrochemical system, which was consisted of two working electrodes, one reference electrode (RE) and one auxiliary electrode (AE). One of the two working electrodes was called the auxiliary working electrode (AWE), which was directly connected to the ground. Another working electrode was used as a regular working electrode (WE) for electrochemical testing. The reference electrode was set in a frit close to the AWE for potential sampling. The other electrodes, WE, RE and AE, were connected to a conventional potentiostat of three-electrode system for electrochemical measurements. A linear narrow electrochemical cell was designed for setting AE at one end and AWE with RE at another end, and setting WE in between AE and AWE. In this way, a positive feedback potential was generated at the working electrode from the solution resistance and the current flow in the solution. An formal iR compensation over 100%, as high as 500%, had been achieved without potential oscillation. The electrochemical cell design, the principle of the in-cell iR compensation, and the preliminary voltammetric characterization by using the redox reaction of ferrocyanide anions were reported. 展开更多
关键词 in-cell iR compensation four-electrode system cell design cyclic voltammetry.
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In-Cell Nanoelectronics:Opening the Door to Intracellular Electrophysiology
4
作者 Dongxin Xu Jingshan Mo +1 位作者 Xi Xie Ning Hu 《Nano-Micro Letters》 SCIE EI CAS CSCD 2021年第8期191-217,共27页
Establishing a reliable electrophysiological recording platform is crucial for cardiology and neuroscience research.Noninvasive and label-free planar multitransistors and multielectrode arrays are conducive to perform... Establishing a reliable electrophysiological recording platform is crucial for cardiology and neuroscience research.Noninvasive and label-free planar multitransistors and multielectrode arrays are conducive to perform the large-scale cellular electrical activity recordings,but the signal attenua-tion limits these extracellular devices to record subthreshold activities.In recent decade,in-cell nanoelectronics have been rapidly developed to open the door to intracellular electrophysi-ology.With the unique three-dimensional nanotopography and advanced penetration strategies,high-throughput and high-fidelity action potential like signal recordings is expected to be realized.This review summarizes in-cell nanoelectronics from versatile nano-biointerfaces,penetration strategies,active/pas-sive nanodevices,systematically analyses the applications in electrogenic cells and especially evaluates the influence of nanodevices on the high-quality intracellular electrophysiological signals.Further,the opportunities,challenges and broad prospects of in-cell nanoelectronics are prospected,expecting to promote the development of in-cell electrophysiological platforms to meet the demand of theoretical investigation and clinical application. 展开更多
关键词 in-cell nanoelectronics Nano-biointerfaces Intracellular electrophysiology Electrogenic cells
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In-cell Western法测定人胰岛素生物学活性
5
作者 王绿音 杨艳枫 +3 位作者 梁誉龄 张慧 李晶 梁成罡 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期1000-1006,共7页
目的:利用in-cell Western(ICW)技术研究基于转基因细胞的人胰岛素生物学活性测定方法。方法:以CHO-INSR B1284为靶细胞,用不同浓度的人胰岛素刺激靶细胞,采用ICW技术检测人胰岛素受体酪氨酸磷酸化水平,进行人胰岛素的体外生物学活性测... 目的:利用in-cell Western(ICW)技术研究基于转基因细胞的人胰岛素生物学活性测定方法。方法:以CHO-INSR B1284为靶细胞,用不同浓度的人胰岛素刺激靶细胞,采用ICW技术检测人胰岛素受体酪氨酸磷酸化水平,进行人胰岛素的体外生物学活性测定;根据《中华人民共和国药典》2020年版通则9401“生物制品生物活性/效价测定方法”对该方法进行专属性、相对准确度、中间精密度、线性与范围等方法学验证;以重组人胰岛素国家标准品为参比品,采用本方法测定人胰岛素原料药及其他人胰岛素类似物的生物学活性相对效价。结果:不同浓度的人胰岛素作用于CHO-INSR B1284细胞后具有较好的剂量依赖性;5个效价浓度的待测品经8次测定,相对效价的几何均值分别为:(63.76±4.38)%,(78.01±5.97)%,(99.52±4.62)%,(122.84±7.4)%,(151.71±8.81)%,相对偏倚均在±5%范围内,对应的几何变异系数(GCV,%)均<11%,GCV的置信上限均<20%;采用该方法能有效检测人胰岛素及其胰岛素类似物的效价。结论:利用ICW技术的人胰岛素体外生物学活性测定法专属性强、准确度高、精密度好,可作为人胰岛素生物学活性的常规检测方法。 展开更多
关键词 生物学活性 人胰岛素 转基因细胞 in-cell Western 方法学验证
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玄参水提取物对高糖暴露条件下INS-1细胞AMPK的激活作用
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作者 郭旭 周俊 +6 位作者 李晓晗 陈仕琦 高艳果 张永红 王启斌 郑涛 陈黎 《医药导报》 CAS 北大核心 2024年第6期850-854,共5页
目的研究玄参水提取物(AESN)对高糖(HG)条件下INS-1细胞腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)活性的影响。方法将INS-1细胞培养于HG培养基中,并给予不同浓度AESN共孵育处理;利用细胞计数试剂-8(CCK-8)法检测AESN干预对细胞增殖/活力和焦亡小体形成... 目的研究玄参水提取物(AESN)对高糖(HG)条件下INS-1细胞腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)活性的影响。方法将INS-1细胞培养于HG培养基中,并给予不同浓度AESN共孵育处理;利用细胞计数试剂-8(CCK-8)法检测AESN干预对细胞增殖/活力和焦亡小体形成的影响,使用Western blotting法观察AESN对细胞内AMPK表达及磷酸化水平的影响;利用时间分辨-荧光共振能量转移(TR-FRET)实验检测AESN对AMPK激酶活性的影响。结果CCK-8检测结果显示同正常培养条件相比,HG暴露显著降低INS-1细胞增殖/活力并增加焦亡小体形成数量,Western blotting检测结果表明HG暴露可导致细胞内AMPK磷酸化水平下降;而AESN共孵育可呈浓度依赖性地增加INS-1细胞增殖/活力、抑制焦亡小体形成并激活AMPK。TR-FRET实验结果表明,AESN可浓度依赖性增加AMPK激酶活性。结论AESN对HG暴露条件下INS-1细胞AMPK具有激活作用。 展开更多
关键词 玄参 腺苷酸活化蛋白激酶 高糖暴露 INS-1细胞 荧光共振能量转移
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丝胶靶向Akt1调控PI3K/Akt信号通路促进STZ致损伤INS-1细胞增殖
7
作者 韩思雨 李雨欣 +2 位作者 易梦雅 李警耀 陈志宏 《承德医学院学报》 2024年第2期96-100,共5页
目的探讨丝胶是否通过靶向Akt1调控磷酸肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)信号通路促进链脲佐菌素(STZ)致损伤大鼠胰岛素瘤细胞(INS-1细胞)增殖。方法INS-1细胞随机分为4组:对照组(不予任何处理)、模型组(给予10 mmol/... 目的探讨丝胶是否通过靶向Akt1调控磷酸肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)信号通路促进链脲佐菌素(STZ)致损伤大鼠胰岛素瘤细胞(INS-1细胞)增殖。方法INS-1细胞随机分为4组:对照组(不予任何处理)、模型组(给予10 mmol/L STZ处理细胞)、丝胶组(给予10 mmol/L STZ+600μg/mL丝胶处理细胞)、抑制剂组(给予10 mmol/LSTZ+600μg/mL丝胶+0.3 mmol/L的Akt1抑制剂A-674563处理细胞)。药物作用时间均为24 h。CCK-8法检测各组INS-1细胞存活率。免疫蛋白印迹法(western blot)检测PI3K/Akt信号通路相关蛋白PI3K、p-Akt和增殖相关蛋白增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞核增殖相关抗原Ki67(Ki67)的表达情况。结果与对照组相比,模型组INS-1细胞存活率下降(P<0.05),PI3K、p-Akt1、PCNA和Ki67的蛋白表达显著下降(P<0.05);与模型组相比,丝胶组INS-1细胞存活率上升(P<0.05),PI3K、p-Akt1、PCNA和Ki67的蛋白表达显著增多(P<0.05);与丝胶组相比,抑制剂组INS-1细胞存活率下降(P<0.05),p-Akt1、PCNA和Ki67的蛋白表达显著下降(P<0.05)。结论丝胶具有促进STZ致损伤INS-1细胞增殖的作用,其作用机制与丝胶通过靶向Akt1调控PI3K/Akt信号通路有关。 展开更多
关键词 丝胶 2型糖尿病 INS-1细胞 增殖
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丝胶对STZ致损伤的INS-1细胞的保护作用 被引量:1
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作者 李金尧 韩思雨 +2 位作者 李雨欣 易梦雅 陈志宏 《承德医学院学报》 2023年第2期91-95,共5页
目的 探讨丝胶对链脲佐菌素(STZ)致损伤大鼠胰岛素瘤细胞(INS-1细胞)的保护作用。方法 实验以体外培养的INS-1细胞为研究对象,随机分为5组:正常对照组(常规条件培养细胞)、模型组(培养基中含10mmol/L的STZ)、丝胶低、中、高浓度组(培养... 目的 探讨丝胶对链脲佐菌素(STZ)致损伤大鼠胰岛素瘤细胞(INS-1细胞)的保护作用。方法 实验以体外培养的INS-1细胞为研究对象,随机分为5组:正常对照组(常规条件培养细胞)、模型组(培养基中含10mmol/L的STZ)、丝胶低、中、高浓度组(培养基中分别含10mmol/L的STZ,及150μg/mL、300μg/mL、600μg/mL的丝胶),每组细胞药物作用时间均为24h。蛋白印迹和实时荧光定量PCR法检测各组细胞BCL-2与P53蛋白及mRNA的表达情况。流式细胞术检测各组细胞的凋亡情况。结果 与正常对照组相比,在模型组中,INS-1细胞中BCL-2蛋白和mRNA的表达显著减少,P53蛋白和mRNA的表达显著增加,早期凋亡率显著升高(P<0.05)。与模型组相比,丝胶各组INS-1细胞BCL-2蛋白与mRNA的表达均显著增多,P53的蛋白与mRNA的表达均显著下降,早期凋亡率显著下降(P<0.05);3个丝胶组两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 丝胶对STZ致损伤INS-1细胞发挥保护作用的机制与调控凋亡蛋白,抑制INS-1细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 丝胶 糖尿病 INS-1细胞 凋亡
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桑叶多糖含药血清对体外高糖培养INS-1细胞氧化应激损伤的保护作用研究
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作者 刘冉 刘杨阳 +5 位作者 孙晓梅 黄淑贤 任春久 高绘菊 张升祥 殷培超 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期349-358,共10页
采用含桑叶多糖(mulberry leaf polysaccharide,MLP)的大鼠血清干预处理体外高糖培养的INS-1细胞,分别测定含MLP血清对高糖培养INS-1细胞中胰岛素含量、氧化应激标志物含量、细胞形态、抗氧化酶活性的影响,结果表明,MLP可明显提高高糖培... 采用含桑叶多糖(mulberry leaf polysaccharide,MLP)的大鼠血清干预处理体外高糖培养的INS-1细胞,分别测定含MLP血清对高糖培养INS-1细胞中胰岛素含量、氧化应激标志物含量、细胞形态、抗氧化酶活性的影响,结果表明,MLP可明显提高高糖培养INS-1细胞中胰岛素含量,有效降低8-OHdG和丙二醛(MDA)含量,细胞形态明显改善,细胞中抗氧化酶SOD、CAT和GPx的活性明显升高,ROS含量显著降低。采用酶联免疫吸附测定MLP对高糖培养INS-1细胞线粒体呼吸链酶活性的影响,结果表明,MLP可显著提高高糖培养INS-1细胞线粒体呼吸链ComplexⅠ-Ⅳ复合酶的活性。最后采用Hoechst 33342染色、JC-1染色和免疫荧光组化法检测MLP对高糖培养INS-1细胞凋亡的影响,结果表明,MLP可明显提高线粒体膜电位,减少细胞色素C(Cyt-C)在胞浆中的表达,抑制细胞凋亡。上述结果表明,MLP可能通过提高细胞中抗氧化酶含量,改善线粒体能量代谢来减少氧化应激导致的细胞凋亡。 展开更多
关键词 桑叶多糖 INS-1细胞 氧化应激 线粒体 凋亡
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褪黑素对胰岛β细胞增殖与功能及p38 MAPK蛋白表达的影响
10
作者 王伟业 尹威 李泽同 《承德医学院学报》 2023年第3期186-190,共5页
目的探讨褪黑素对胰岛β细胞增殖、功能和p38 MAPK蛋白表达的影响。方法采用小鼠胰岛β细胞株INS-1细胞作为研究对象。按褪黑素加药浓度分6个处理组和1个对照组,观察褪黑素对INS-1细胞的增殖和功能影响的剂量效应关系,CCK-8法检测细胞... 目的探讨褪黑素对胰岛β细胞增殖、功能和p38 MAPK蛋白表达的影响。方法采用小鼠胰岛β细胞株INS-1细胞作为研究对象。按褪黑素加药浓度分6个处理组和1个对照组,观察褪黑素对INS-1细胞的增殖和功能影响的剂量效应关系,CCK-8法检测细胞的增殖率,ELISA法检测细胞的葡萄糖刺激胰岛素分泌(GSIS)功能。分4组以观察褪黑素对p38 MAPK蛋白表达的影响,Western blot法检测p38 MAPK和p-p38 MAPK蛋白表达水平。结果与对照组相比较,各褪黑素组增殖率均显著下降,且细胞增殖率随褪黑素浓度的增加先升后降,以10 nmol/L褪黑素处理组的增殖率最高。GSIS实验结果显示,与对照组相比较,1 nmol/L、5 nmol/L、25 nmol/L、50 nmol/L和100 nmol/L褪黑素组的胰岛素浓度均显著下降,差异均有统计学意义(均P<0.05),且GSIS功能随褪黑素浓度的增加先升后降,以10 nmol/L褪黑素组最高。Western blot实验结果显示,与对照组相比,褪黑素组和SB203580组均能显著降低p38 MAPK和p-p38 MAPK蛋白的表达水平(均P<0.05);与褪黑素组或SB203580组相比,褪黑素联合SB203580处理组p38 MAPK和p-p38 MAPK蛋白的表达水平均显著降低(均P<0.05)。结论褪黑素对胰岛β细胞呈现倒U型损害作用,10 nmol/L褪黑素损害最小;褪黑素对胰岛β细胞p38 MAPK信号通路产生抑制作用。 展开更多
关键词 褪黑素 糖尿病 胰岛素 INS-1细胞 p38 MAPK 增殖
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2013年触摸屏产业发展动态 被引量:4
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作者 王莹 《电子产品世界》 2013年第4期11-18,21,共9页
本文介绍了触摸屏的市场与技术发展态势。
关键词 触摸屏 OGS in-cell 噪声
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^(19)F NMR技术在蛋白质研究中的应用
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作者 王桂芳 张则婷 +6 位作者 徐国华 刘晓黎 吴琼 白佳 叶炎生 李从刚 刘买利 《波谱学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期621-637,共17页
因为19F核自身的特性,如自旋为1/2;丰度高(100%),具有与1 H相当的灵敏度;化学位移分布广且对环境敏感;绝大部分生物体内都不含19 F因而无背景干扰等;19F NMR自诞生以来就成为非常有吸引力的研究手段.现在,19F NMR已被广泛用于核磁共振... 因为19F核自身的特性,如自旋为1/2;丰度高(100%),具有与1 H相当的灵敏度;化学位移分布广且对环境敏感;绝大部分生物体内都不含19 F因而无背景干扰等;19F NMR自诞生以来就成为非常有吸引力的研究手段.现在,19F NMR已被广泛用于核磁共振成像、药物化学及生物大分子的研究,各个方面均有较多的相关文献综述.该综述将集中讨论19 FNMR在蛋白质研究中的应用,包括蛋白质19 F标记方法,19F NMR在蛋白质结构、动力学、蛋白质折叠、蛋白质与药物的相互作用及In-cell NMR中的应用. 展开更多
关键词 19F NMR 蛋白质结构 蛋白质动力学 药物识别 in-cell NMR
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投射式多点触控电容触摸屏 被引量:1
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作者 金梦 王文晓 +1 位作者 李欢欢 崔志鹏 《河南科技》 2014年第6X期79-81,共3页
电容式触摸屏是在玻璃表面贴上一层透明的金属导电物质(ITO),当有带电物体(如人体)接触屏幕时,金属导电物质会对带电物体进行感应,接触位置的表面电容产生改变,依据改变的电容计算接触位置。电容式触摸屏是电容式接触按键、触摸板、TFT... 电容式触摸屏是在玻璃表面贴上一层透明的金属导电物质(ITO),当有带电物体(如人体)接触屏幕时,金属导电物质会对带电物体进行感应,接触位置的表面电容产生改变,依据改变的电容计算接触位置。电容式触摸屏是电容式接触按键、触摸板、TFT等多种技术结合的产物,并在发展过程中出现了诸多问题。本文主要针对投射式多点触控电容触摸屏技术存在的问题和改进进行了阐述,并对嵌入式电容触摸屏的结构和原理进行介绍。 展开更多
关键词 自电容 互电容 交叉点扫描 in-cell
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芍药苷对STZ损伤的INS-1细胞的保护和修复作用 被引量:7
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作者 任文辉 张保丽 +3 位作者 李中平 陈红梅 蔺美玲 郑天珍 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期230-232,共3页
目的研究中药单体芍药苷对INS-1细胞的影响,及对链脲佐菌素(STZ)损伤的胰岛细胞的保护、修复作用,并初步探讨其保护机制。方法 INS-1细胞传代培养后,用四氮唑蓝(MTT)比色法测定细胞增殖活力,并测定细胞培养液中胰岛素浓度、丙二醛(MDA)... 目的研究中药单体芍药苷对INS-1细胞的影响,及对链脲佐菌素(STZ)损伤的胰岛细胞的保护、修复作用,并初步探讨其保护机制。方法 INS-1细胞传代培养后,用四氮唑蓝(MTT)比色法测定细胞增殖活力,并测定细胞培养液中胰岛素浓度、丙二醛(MDA)浓度、总抗氧化能力(T-AOC)。结果芍药苷可促进INS-1细胞释放胰岛素。STZ损伤后,INS-1细胞活力降低;胰岛素分泌量减少;MDA含量明显升高;T-AOC下降。芍药苷保护组能不同程度改善STZ引起的上述指标的改变。结论芍药苷可促进INS-1细胞释放胰岛素,对STZ损伤的INS-1细胞有显著的保护作用,这种作用可能是通过提高INS-1细胞的抗氧化能力实现的。 展开更多
关键词 芍药苷 INS-1细胞 STZ 抗氧化能力
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沙棘籽渣黄酮诱导人乳腺癌细胞凋亡相关基因的表达谱变化 被引量:8
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作者 章平 毛玉昌 +2 位作者 孙斌 钱旻 瞿伟菁 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第4期454-460,共7页
背景与目的:研究显示,沙棘含有多种黄酮类化合物,具有抗氧化、防辐射等作用。cDNA基因表达谱芯片技术具有高通量、高效、快捷的特点,本实验拟利用cDNA基因表达谱芯片研究沙棘籽渣黄酮(flavonoidsfromseedresiduesofHippophaerhamnoidesL... 背景与目的:研究显示,沙棘含有多种黄酮类化合物,具有抗氧化、防辐射等作用。cDNA基因表达谱芯片技术具有高通量、高效、快捷的特点,本实验拟利用cDNA基因表达谱芯片研究沙棘籽渣黄酮(flavonoidsfromseedresiduesofHippophaerhamnoidesL.,FHR)诱导人乳腺癌细胞Bcap鄄37凋亡相关基因的表达谱变化。方法:抽提FHR作用前后的Bcap鄄37细胞总RNA,经逆转录合成荧光分子(Cy3/Cy5)标记的cDNA探针,与含有13824个cDNA基因的人14K基因表达谱芯片杂交,利用Genespring软件分析实验组和对照组之间差异表达的基因,对所获得的基因进行生物信息学分析。结果:实验组与对照组中表达上调的基因有305条,表达下调的基因有361条。差异表达的与细胞凋亡相关的基因有32条,占芯片基因总数的0.23%,其中表达上调的有25条(平均Ratio值为3.071),下调的有7条(平均Ratio值为0.418)。生物信息学分析表明,FHR在对Bcap鄄37细胞作用的过程中,该32条差异表达基因与Bcap鄄37细胞凋亡有关,其中包括CTNNB1、TSSC3、IGFBP4、IGFBP6、GADD34、TNFRSF10B、Caspase鄄9和PCNA等。结论:FHR诱导Bcap鄄37细胞凋亡的机制是由多基因协同,并通过胞内和胞外信号转导途径共同调节完成。 展开更多
关键词 沙棘 基因芯片 人乳腺癌细胞Bcap-37 细胞凋亡
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不同葡萄糖浓度对INS-1细胞PPARδ表达的影响 被引量:4
16
作者 姜友昭 张玲 +1 位作者 郑江 陈兵 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期247-249,共3页
目的研究不同葡萄糖浓度对大鼠INS-1细胞PPARδ表达的影响,以初步阐明PPARδ在胰岛细胞糖脂代谢关联中的作用。方法分别用含3、11、20mmol/L葡萄糖的RPMI1640培养基,培养INS-1细胞24h后,冻融法裂解细胞,检测INS-1细胞内的甘油三酯水平... 目的研究不同葡萄糖浓度对大鼠INS-1细胞PPARδ表达的影响,以初步阐明PPARδ在胰岛细胞糖脂代谢关联中的作用。方法分别用含3、11、20mmol/L葡萄糖的RPMI1640培养基,培养INS-1细胞24h后,冻融法裂解细胞,检测INS-1细胞内的甘油三酯水平。提取RNA和核蛋白,RT-PCR半定量检测PPARδmRNA,Westernblot检测PPARδ蛋白表达。结果随着葡萄糖浓度的升高INS-1细胞内甘油三酯含量增高,而PPARδmRNA和蛋白的表达均明显降低。结论葡萄糖促进,INS-1细胞内甘油三酯沉积,而PPARδ的表达下降可能是高糖条件下胰岛细胞脂质沉积的重要原因。 展开更多
关键词 PPARΔ INS-1细胞 RT-PCR WESTERN BLOT
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枸杞多糖通过抑制H_2O_2诱导的INS-1细胞凋亡促进胰岛素分泌 被引量:5
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作者 张学军 尹长江 +2 位作者 杨坤宝 张海峰 史华宁 《中国中医基础医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1215-1217,共3页
目的:探讨枸杞多糖对H2O2诱导胰岛INS-1细胞凋亡和胰岛素分泌功能的影响。方法:采用H2O2诱导INS-1细胞凋亡模型,用100 mg/L枸杞多糖处理INS-1细胞,MTT法检测细胞活力,放射免疫法检测胰岛素含量,流式细胞仪检测细胞凋亡,荧光定量PCR检测B... 目的:探讨枸杞多糖对H2O2诱导胰岛INS-1细胞凋亡和胰岛素分泌功能的影响。方法:采用H2O2诱导INS-1细胞凋亡模型,用100 mg/L枸杞多糖处理INS-1细胞,MTT法检测细胞活力,放射免疫法检测胰岛素含量,流式细胞仪检测细胞凋亡,荧光定量PCR检测Bcl-2、Bax和Caspase-3的mRNA表达。结果 100 mg/L枸杞多糖能明显提高H2O2处理INS-1细胞的活力(P<0.01),促进细胞基础和葡萄糖刺激的胰岛素分泌(P<0.05,P<0.01),减少细胞凋亡(P<0.01),同时Bcl-2的表达明显升高(P<0.01),Bax和Caspase-3的表达明显降低(P<0.01,P<0.01)。结论:枸杞多糖可能通过促进Bcl-2的表达,抑制Bax和Caspase-3的表达,以降低H2O2诱导的INS-1凋亡,同时促进INS-1细胞的胰岛素分泌。 展开更多
关键词 枸杞多糖 INS-1 细胞凋亡 胰岛素分泌
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地骨皮醇提液对胰岛β细胞增殖和凋亡的影响 被引量:7
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作者 王东 叶真 黄琦 《浙江中医药大学学报》 CAS 2015年第6期478-481,共4页
[目的]以大鼠INS-1胰岛素瘤细胞株作为研究对象,用中药地骨皮(Cortex Lycii)醇提液干预INS-1细胞株,观察不同浓度地骨皮醇提液对胰岛β细胞增殖、凋亡变化的影响,为中药保护胰岛β细胞提供实验室依据。[方法]将INS-1细胞株分为正常糖对... [目的]以大鼠INS-1胰岛素瘤细胞株作为研究对象,用中药地骨皮(Cortex Lycii)醇提液干预INS-1细胞株,观察不同浓度地骨皮醇提液对胰岛β细胞增殖、凋亡变化的影响,为中药保护胰岛β细胞提供实验室依据。[方法]将INS-1细胞株分为正常糖对照组(control)、高糖组(high glucose,HG)、HG+Cortex Lycii(1g·L-1)组、HG+Cortex Lycii(2g·L-1)组以及HG+Cortex Lycii(4g·L-1)组,分别于药物干预24h、48h、72h后通过CCK-8法检测各组INS-1细胞的增殖率、采用流式细胞术检测细胞的凋亡率,并行相应统计学分析。[结果]48h、72h时与HG组相比,HG+Cortex Lycii各浓度组INS-1细胞的增殖率均有提高(P<0.01);与另外两个药物浓度组相比,72h时HG+Cortex Lycii(2g·L-1)组细胞增殖率最高,差异有统计学意义(P<0.05)。与HG组相比,HG+Cortex Lycii(1g·L-1)组、HG+Cortex Lycii(2g·L-1)组和HG+Cortex Lycii(4g·L-1)组INS-1细胞凋亡率显著下降,差异有统计学意义(P<0.01);HG+Cortex Lycii(2g·L-1)组凋亡率低于HG+Cortex Lycii(1g·L-1)组,差异有统计学意义(P<0.05)。[结论]地骨皮醇提液可促进高糖环境下INS-1细胞的增殖,抑制高糖环境下INS-1细胞的凋亡,其最佳的药物浓度为2g·L-1。 展开更多
关键词 糖尿病 地骨皮醇提液 浓度 胰岛Β细胞 INS-1 增殖 凋亡
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糖毒性下UCP2介导的胰岛功能紊乱的研究 被引量:9
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作者 陈莹晖 李裕明 +3 位作者 邓波 李丽华 高海波 陈璐璐 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期193-196,共4页
目的研究不同浓度高糖对胰岛INS-1细胞解偶联蛋白2(UCP2)基因表达的影响,探讨UCP2基因与高糖刺激下氧化应激和胰岛素分泌之间的关系,进一步了解糖尿病糖毒性的发病机制。方法将不同浓度的葡萄糖作用于INS-1细胞,镜下观察INS-1细胞的形... 目的研究不同浓度高糖对胰岛INS-1细胞解偶联蛋白2(UCP2)基因表达的影响,探讨UCP2基因与高糖刺激下氧化应激和胰岛素分泌之间的关系,进一步了解糖尿病糖毒性的发病机制。方法将不同浓度的葡萄糖作用于INS-1细胞,镜下观察INS-1细胞的形态改变,应用可见分光光度计测定丙二醛(MDA)含量,运用ELISA方法检测葡萄糖刺激的胰岛素分泌(GSIS),同时应用RT-PCR方法检测UCP2基因的表达。结果①随着糖浓度的增加,INS-1细胞的凋亡增多,MDA含量逐渐增加,GSIS值逐渐下降,不同糖浓度组比较,差异具有显著性意义(P<0.01)。②随着葡萄糖浓度增加,INS-1细胞UCP2 mRNA的表达总体逐渐增强。结论高糖可促进INS-1细胞凋亡,在高糖作用下活性氧物质(ROS)代谢产物MDA增多,通过激活UCP2的途径引起胰岛细胞胰岛素分泌功能受损。这可能也是糖毒性对胰岛β细胞损害的一个重要环节。 展开更多
关键词 解偶联蛋白2 INS-1细胞 糖毒性 氧化应激 高糖刺激的胰岛素分泌
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蜜环菌多糖对损伤性胰岛细胞分泌功能的影响 被引量:8
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作者 操玉平 于敏 +2 位作者 沈业寿 陆军 许宝奎 《中国食用菌》 北大核心 2009年第1期39-41,44,共4页
培养大鼠胰岛素瘤细胞(INS-1),以四氧嘧啶(AXN)损伤细胞,培养液中加入不同浓度的多糖AMP-1,检测不同浓度AMP-1对INS-1细胞葡萄糖刺激的胰岛素和C肽分泌量的影响,同时检测细胞存活率。结果表明,一定浓度范围AMP-1对AXN损伤的INS-1细胞分... 培养大鼠胰岛素瘤细胞(INS-1),以四氧嘧啶(AXN)损伤细胞,培养液中加入不同浓度的多糖AMP-1,检测不同浓度AMP-1对INS-1细胞葡萄糖刺激的胰岛素和C肽分泌量的影响,同时检测细胞存活率。结果表明,一定浓度范围AMP-1对AXN损伤的INS-1细胞分泌胰岛素和C肽均具有一定的促进作用,尤其是在葡萄糖刺激浓度为16.7mmol·L-1时,效果显著;AMP-1可减少AXN对INS-1细胞的损伤,使INS-1细胞存活率增加。 展开更多
关键词 蜜环菌 菌索多糖 四氧嘧啶 胰岛素瘤细胞 胰岛素 C肽
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