First Report of Marginal Scorch Infecting Indigowoad Root in China

During 2015, marginal scorch symptoms were detected in the production base of indigowoad rootin Hubei, China. On the basis of morphological features and 18S rDNA sequences, the pathogen was identified as Cladosporium sp. Koch’s postulates were fulfilled by pathogenicity tests on potted indigowoad root seedlings. To our knowledge, this report is the first of marginal scorch on indigowoad root caused by Cladosporium sp. We propose the name “marginal scorch” for the new disease.

不同区域松蓝根、叶(板蓝根、大青叶)有效成分含量差异

以靛蓝、靛玉红为指标性成分,采用HPLC法对不同生长环境(产地)的板蓝根和大青叶中有效成分进行测定.结果表明,不同产地的板蓝根、大青叶中有效成分含量存在显著差异.板蓝根的有效成分总含量以陕西汉阴为最高(16.27mg.kg-1),其次为宁夏隆德(15.67mg.kg-1)、安徽亳州(14.90mg.kg-1)和安徽临泉(14.23mg.kg-1),黑龙江佳木斯最低(13.97mg.kg-1);大青叶中有效成分总含量以陕西汉阴为最高(698.32mg.kg-1),其次为宁夏隆德(683.68mg.kg-1)、安徽亳州(680.11mg.kg-1)和安徽临泉(654.19mg.kg-1),黑龙江佳木斯最低(642.73mg.kg-1);各产地大青叶HPLC图谱有所差异,不仅表现在指标性成分的峰面积所占比例不同,其成分的种类也存在较大差异.结合产品外观质量和内在品质等因素可以认为,菘蓝地道产区仍需进一步调查分析和确定.

板蓝根中靛蓝和靛玉红的提取及其质量分数的测定

采用直接比色法测定板蓝根中靛蓝、靛玉红的质量分数。对靛蓝、靛玉红在 2 4 0～ 70 0nm波段进行扫描 ,确定其最大吸收波长分别为 6 0 1和 5 31nm。分别通过单因素试验和正交试验 ,确定提取靛蓝、靛玉红的最佳工艺参数。结果表明 ,乙醇体积分数为 75 %时 ,靛蓝和靛玉红的提取物得率最高 ;提取时间为 4h时 ,靛蓝和靛玉红的提取物得率最高。正交试验确定的最佳提取工艺参数为 :药材粒度 4 0目 ,提取时间 4h ,乙醇体积分数 75 % ,此时 ,提取物得率达 1 74 %。

板蓝根和大青叶质量的化学模式识别研究

本文收集不同科属、不同产地的板蓝根样品27个、大青叶样品5个。对样品的化学成分进行高效液相色谱分析,获得反映样品整体化学特征的数据,同时选择体外抑菌药理指标进行药理活性测定。用典型相关分析(CCOR)揭示了化学信息和药理指标之间的相关关系,寻找与药理指标密切相关的化学成分,用ISODATA聚类分析技术将32个样品划分为5类。用本文建立的方法评价板蓝根、大青叶的质量,结果良好,正确率为90.6％。

板蓝根多糖的提取工艺及其清除自由基作用的初步研究

研究了水煮醇沉法从板蓝根中提取多糖的工艺条件,板蓝根多糖的最佳提取条件为:水煮温度100℃、水煮时间7 h、醇沉时间24 h.在此条件下板蓝根粗多糖提取率达到27.5%.通过自由基清除试验,对板蓝根多糖的活性进行了鉴定,结果显示其具有较强的自由基清除能力.

板蓝根多糖的提取及其对猪繁殖与呼吸综合征病毒的体外作用

用水煮醇沉法从中药板蓝根中提取板蓝根多糖,作为试验药物,观察其在Marc-145单层细胞上对猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的作用效果。结果表明,在安全浓度范围内,板蓝根多糖体外对PRRSV具有较好的阻断和抑制作用,最小阻断浓度为2.094μg/ml,最小抑制浓度为8.375μg/ml。

不同产地板蓝根中多糖及总氨基酸含量的分析比较

【目的】分析比较6个代表性的不同产地板蓝根中多糖及总氨基酸含量,为板蓝根多指标质量评价体系的建立提供科学依据。【方法】采用蒽酮-硫酸比色法测定板蓝根中多糖含量,以精氨酸为对照品、茚三酮为显色剂的比色法测定板蓝根中总氨基酸含量,比较分析产地对板蓝根中多糖及总氨基酸含量的影响。【结果】同种板蓝根中的多糖及总氨基酸含量因产地不同而有明显差别,其中以河北产样品中的总多糖含量最高,为19.69%,其次为黑龙江省明水县板蓝根基地栽培品,为18.39%,山西产样品的总多糖含量最低,为15.91%;对于总氨基酸含量,最高的是江苏产样品,为7.17%,其次为黑龙江省明水县样品,为6.91%,最低的是山西产样品,为5.89%。【结论】不同产地或不同生长环境下同种板蓝根中多糖和总氨基酸含量均存在明显差异,且多糖含量差异较总氨基酸含量差异幅度稍大。

板蓝根多糖对无初乳仔鼠十二指肠IgG^+和SIgA^+细胞表达的影响

目的研究不同浓度板蓝根多糖(Indigowoad Root Polysaccharide,IRP)对SD系无初乳仔鼠十二指肠IgG+和SIgA+细胞表达的影响。方法 40窝0 d仔鼠随机分为A～E组:(A)初乳组,(B)常乳组,(C)常乳+高IRP组,(D)常乳+中IRP组,(E)常乳+低IRP组。各组分别灌胃生理盐水,生理盐水,低、中、高剂量的IRP,于0、7、14、21、28 d随机取6只进行取材,运用免疫组织化学技术,通过Moticam 2306图像处理系统对各实验组仔鼠十二指肠中IgG+和SIgA+细胞及分泌物的分布和面积进行统计分析。结果 IgG+和SIgA+细胞首先出现于腺体周围固有层,然后在绒毛固有层、上皮细胞之间和肌层也有分布。IgG+和SIgA+细胞数量随日龄增大而增加,且C、D、E组的IgG+和SIgA+细胞数量在7～28 d高于B组。在7～14 d、14～21 d、21～28 d发挥最佳效果的组别依次为E、D、C组。结论 IRP可以促进无初乳仔鼠十二指肠黏膜IgG+和SIgA+细胞的表达。随着日龄增大,发挥最佳免疫效应的IRP浓度逐渐减小。

微波技术在板蓝根多糖提取中的应用

通过正交试验确定微波处理的最佳工艺参数 ,用水煎煮法提取板蓝根多糖 ,用苯酚硫酸比色法测定多糖含量。结果表明 ,微波处理后 ,板蓝根粗多糖得率达到 33.0 6 2 ,多糖质量分数达到 75 .2 11 ,优于单独使用水煎煮法。微波处理板蓝根的最佳工艺参数为水浸泡 1h,微波功率 4 80 W,处理时间 6 min;此工艺参数下 。

板蓝根提取物对小鼠免疫功能的影响

目的观察板蓝根提取物Fructopyrano-(1→4)-glucopyranose(FG)对小鼠免疫功能的影响。方法连续灌胃FG10 d后,处死小鼠,测定体质量、脾脏及胸腺重量,计算脾指数与胸腺指数,观察小鼠免疫器官重量的变化;采用小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验测试FG对小鼠非特异性免疫的影响;采用血清溶血素形成实验测试FG对小鼠体液免疫的影响。结果 FG能够增加小鼠免疫器官重量,提高巨噬细胞吞噬功能及增加B细胞产生抗体能力。结论 FG具有调节免疫功能,对非特异性免疫和体液免疫均有一定的增强作用。

复方板蓝根颗粒化学成分的质谱研究

利用电喷雾多级串联质谱(ESI-MSn)和傅里叶变换离子回旋共振质谱(FT-ICR-MS)技术,对复方板蓝根颗粒经溶剂萃取后的95%(体积分数)醇提和水提部位的化学成分进行了系统研究,鉴定出多种氨基酸成分、糖及其衍生物、有机酸、氨基酸和单糖的梅拉德反应初级产物以及含硫化合物表告依春.该方法灵敏快速,适宜于中药提取物的化学成分分析.

RP-HPLC法测定板蓝根、大青叶中靛蓝、靛玉红的含量

用RP HPLC以安宫黄体酮为内标物同时测定板蓝根、大青叶中靛蓝、靛玉红的含量 .色谱条件 :色谱柱为SpherisorbC18柱 ;流动相为甲醇 水 (6 2∶38,V∶V) ;检测波长 2 80nm ;靛蓝和靛玉红的平均回收率分别为 (99 0± 1 1) %和 (10 4 2± 3 5 ) % .本法操作简便 。

节水灌溉制度对板蓝根耗水特征及产量的影响

通过2003-2005年的田间试验，研究了不同灌水定额、灌水次数下板蓝根的耗水特征，确定了适合甘肃民乐地区的板蓝根的经济灌溉制度：灌溉定额2250m^3／hm^2；灌水次数2次；第1次灌水时间为7月上旬，第2次为8月上旬。通过回归分析建立了需水量与产量的函数关系。对各处理的产量进行方差分析，各处理间的产量差异极显著。

板蓝根抗氧化成分的提取及活性分析

采用95%乙醇提取板蓝根,并用石油醚、氯仿和正丁醇依次萃取,醇提后药渣通过水提醇沉法制备粗多糖。采用铁氰化钾还原反应、超氧阴离子自由基和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基三种抗氧化模型,比较上述极性部位的抗氧化活性,并考察抗氧化活性与总糖含量的关系。结果表明,板蓝根不同极性部位的抗氧化活性差异较大,与总糖含量相关性较小。其中,氯仿萃取物对超氧阴离子自由基和DPPH自由基的清除率最高,IC50值分别为3.38、0.19mg/mL,是从板蓝根中筛选非多糖类天然抗氧化剂的重要部位。醇提后药渣通过水提醇沉法制得的粗多糖部位总糖含量最高,为18.66%。板蓝根所具有的抗氧化活性可能是该药发挥解"内毒"作用的重要机制。

复方板蓝根颗粒APCI-MS指纹图谱及化学成分的LC-APCI-MS^n研究

建立了复方板蓝根颗粒提取物的大气压化学电离质谱(APCI-MS)的指纹图谱分析方法,并利用液相色谱-大气压化学电离-串联质谱(LC-APCI-MS^n)技术对主要指纹峰的归属进行确认。结果表明:质谱指纹图谱确定了10批不同来源复方板蓝根颗粒提取物的10个共有峰,各提取物的指纹图谱相似度均在97%以上。化学成分的LC-APCI-MS^n分析鉴别了复方板蓝根颗粒提取物中吲哚类、奎唑酮类、有机酸类和卟啉类等12个化合物,并确定了5个质谱指纹峰的归属。采用体外实验研究对复方板蓝根颗粒提取物的抗病毒活性进行评价,结果表明,其具有一定的抗病毒活性。该指纹图谱的精密度、稳定性和重现性良好,化学成分分析快捷、灵敏,结合化学成分分析和药效学研究,可为复方板蓝根颗粒质量控制标准的制订奠定基础,同时也为深入研究其药效物质基础和谱效关系提供理论依据。

复方板蓝根颗粒中靛蓝和靛玉红含量的近红外光谱检测模型研究

[目的]提出一种用近红外光谱技术快速检测复方板蓝根颗粒中靛蓝和靛玉红含量的新方法。[方法]首先应用光谱仪获得6种复方板蓝根颗粒的光谱曲线,用主成分分析法进行聚类分析,再结合人工神经网络技术建立模型进行检测。在主成分分析的基础上,以每一个样品的前7个主成分作为神经网络的输入节点,成分类型作为神经网络的输出节点,建立一个7(输入节点)-7(隐含层节点)-2(输出节点)的3层BP人工神经网络模型。[结果]复方板蓝根颗粒中靛蓝和靛玉红2项指标人工神经网络模型预测值的平均相对误差分别为4.14%和4.72%,与高效液相色谱法测定值的符合程度很高,该模型具有很好的预测能力。[结论]新模型可用于复方板蓝根颗粒的质量检测和生产加工过程中的质量控制。

板蓝根中靛玉红的含量测定及其影响因素分析

目的研究影响板蓝根中靛玉红含量的因素。方法考察不同来源以及不同性状板蓝根中靛玉红含量的差异,同时对靛玉红提取工艺、靛玉红的稳定性作进一步的研究。结果来源不同、性状不同、提取工艺不同的板蓝根中靛玉红含量不同。结论通过对板蓝根中靛玉红含量考察,对指导用药有重要作用。

板蓝根配方颗粒成型工艺的初探

目的考察板蓝根配方颗粒成型工艺的影响因素:辅料用量、空气相对湿度(RCH)、工艺要求温度。方法L9(34)正交实验法。结果选择两倍辅料用量、空气相对湿度40%、工艺要求温度20℃为最佳的制粒工艺条件。结论板蓝根水提取的浸膏剂可用该工艺制成颗粒。

薄层层析法检测板蓝根所含靛玉红、靛蓝的方法研究

目的:对板蓝根所含靛玉红、靛蓝的薄层色谱进行实验性研究。方法:采用硅胶G板点样,选择最佳展开系统和样品最低检出量。结果:获得最佳色谱条件①硅胶G板为吸附剂;②石油醚-乙酸乙酯-氯仿(1∶1∶8)为展开剂。该色谱条件下,样品所含靛玉红、靛蓝的最低检出量分别为20μl、12μl。结论:本方法简便、快速、有效,可以作为板蓝根提取液靛玉红及靛蓝的相对含量的检测方法。

板蓝根多糖对缺乳仔鼠免疫器官发育及T淋巴细胞亚群的影响

试验应用流式细胞术检测缺乳仔鼠CD3+、CD4+和CD8+T淋巴细胞含量来研究添加不同剂量的板蓝根多糖(RIP)对缺乳仔鼠免疫器官及T淋巴细胞亚群的影响。结果表明:①RIP可增加缺乳仔鼠胸腺指数和脾脏指数。对胸腺指数和脾脏指数效果最好的RIP剂量随日龄增大而减小。②RIP可以增加缺乳仔鼠外周血CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞数量。7～28日龄时初乳组(A组)、缺乳+中RIP组(C组)和缺乳+高RIP组(D组)3组CD3+T淋巴细胞含量与缺乳组(B组)相比差异显著(P<0.05)。7～21日龄时初乳组(A组)、缺乳+中RIP组(C组)和缺乳+高RIP组(D组)3组CD4+T淋巴细胞含量与缺乳组(B组)相比差异显著(P<0.05)。各处理组CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞含量及CD4+/CD8+比值随着日龄的增加有所下降。适宜剂量的RIP可促进缺乳仔鼠免疫器官发育,提高T淋巴细胞亚群的水平。