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Histopathological Study on Chickens Artificially Infected with Infectious Laryngotracheitis
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作者 史秋梅 董淑珍 +1 位作者 沈萍 沈文静 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2013年第10期1454-1456,共3页
[Objective] This study aimed to investigate the histopathological changes in chickens artificially infected with infectious laryngotracheitis(ILT). [Method] Through ar- tificial injection of allantoic liquid contain... [Objective] This study aimed to investigate the histopathological changes in chickens artificially infected with infectious laryngotracheitis(ILT). [Method] Through ar- tificial injection of allantoic liquid containing ILTV into chickens to induce infectious laryngotracheitis, the clinical symptoms in infected chickens were observed; tissues of trachea, lungs, heart, liver, kidney and spleen were collected from dead chickens, and prepared into paraffin sections, followed by histopathological observation under a microscope. [Results] This disease occured in the inoculated chickens 3d later, with a morbidity rate of 95%. The main symptoms were dyspnea, asthma and coughing up of bloody exudate; yellowish-white pseudomembrane was observed on dissected larynx trachea; swelling, haemorrhage, and further erosion were observed on the in- fected tracheal mucosa, resulting in death of chickens, with the mortality rate of 25%; histopathological observation showed that parenchymal organs exhibited exuda- tive inflammation; swelling, degeneration, necrosis and shedding of epithelial cells were observed; disturbance of blood circulation occured.[Conclusion] This study pro- vides reference bases for the treatment of ILT. 展开更多
关键词 Artificial infection infectious laryngotracheitis HISTOPATHOLOGY
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Infectious laryngotracheitis virus in chickens 被引量:7
2
作者 Shan-Chia Ou Joseph J Giambrone 《World Journal of Virology》 2012年第5期142-149,共8页
Infectious laryngotracheitis(ILT) is an important respiratory disease of chickens and annually causes significant economic losses in the poultry industry worldwide. ILT virus(ILTV) belongs to alphaherpesvirinae and th... Infectious laryngotracheitis(ILT) is an important respiratory disease of chickens and annually causes significant economic losses in the poultry industry worldwide. ILT virus(ILTV) belongs to alphaherpesvirinae and the Gallid herpesvirus 1 species. The transmission of ILTV is via respiratory and ocular routes. Clinical and post-mortem signs of ILT can be separated into two forms according to its virulence. The characteristic of the severe form is bloody mucus in the trachea with high mortality. The mild form causes nasal discharge, conjunctivitis, and reduced weight gain and egg production. Conventional polymerase chain reaction(PCR), nested PCR, real-time PCR, and loop-mediated isothermal amplification were developed to detect ILTV samples from natural or experimentally infected birds. The PCR combined with restriction fragment length polymorphism(RFLP) can separate ILTVs into several genetic groups. These groups can separate vaccine from wild type field viruses. Vaccination is a common method to prevent ILT. However, field isolates and vaccine viruses can establish latent infected carriers. According to PCR-RFLP results, virulent field ILTVs can be derived from modified-live vaccines. Therefore, modified-live vaccine reversion provides a source for ILT outbreaks on chicken farms. Two recently licensed commercial recombinant ILT vaccines are also in use. Other recombinant and gene-deficient vaccine candidates are in the developmental stages. They offer additional hope for the control of this disease. However, in ILT endemic regions, improved biosecurity and management practices are critical for improved ILT control. 展开更多
关键词 infectious laryngotracheitis virus infectious laryngotracheitis Gallid herpesvirus-1 POLYMERASE chain reaction combined with RESTRICTION FRAGMENT length polymorphism RECOMBINANT laryngotracheitis vaccines
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Effects of Pak Ning Powder and Oral Liquid Treating Chicken Infectious Laryngotracheitis
3
作者 GAO Gui-sheng GAO Guang-ping +4 位作者 SHI Qiu-mei ZHANG Yan-ying SHEN Ping SHAO Xin-hua LIANG Yin-ju 《Animal Husbandry and Feed Science》 CAS 2012年第4期161-165,共5页
[ Objective] To investigate the therapeutic effects of Chinese herbal medicine compound preparation "Pak Ning" on chicken infectious la- ryngotracheitis. E Methodl "Pak Ning" with different dosage forms and dosage... [ Objective] To investigate the therapeutic effects of Chinese herbal medicine compound preparation "Pak Ning" on chicken infectious la- ryngotracheitis. E Methodl "Pak Ning" with different dosage forms and dosage time were used to carry out clinical observation of artificial infectious and natural infectious ILT of chickens. [ Result] The therapeutic efficacy of "Pak Ning" oral liquid water was better than powder with high cure rate, the difference was significant (P〈0.05). compared with Ribavirin, the difference was significant (P 〈0.01 ), and the preventive effects of feeding in advance were very well. I Conctusionl "Pak Ning" plays an important role in the treatment and prevention of ILl- with strong infectiosity and high mortality. 展开更多
关键词 Chinese herbal medicine infectious laryngotracheitis Therapeutic effects
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Screening of Chinese Herbal Medicines against Avian Infectious Laryngotracheitis Virus and Escherichia coli
4
作者 Yanying ZHANG Qiumei SHI +2 位作者 Guisheng GAO Guangping GAO Ping SHEN 《Agricultural Biotechnology》 CAS 2013年第5期25-27,31,共4页
[ Objective] This study aimed to screen Chinese herbal medicines against avian infectious laryngotracheitis virus and Escherichia coli. [ Method ] Conventional Chinese medicine plate dilution method, plate punching me... [ Objective] This study aimed to screen Chinese herbal medicines against avian infectious laryngotracheitis virus and Escherichia coli. [ Method ] Conventional Chinese medicine plate dilution method, plate punching method and test tube method were applied to screen Chinese herbal medicines against avian infectious laryngotracheitis virus based on chicken embryo inoculation experiment. [ Result ] Forsythia suspensa, Radix lsatidis, Isatis iadigotica, Lonicera japonica, Codonopsis pilosula, Astragalus membranaceus, Rhizoma Atractylodis Macrocephalae, C, tyeyrrhiza uralensis and Pericarpium granati had relatively strong anti-ILTV effect; among the Chinese herbal medicines against avian E. coli, Sanguisorba offwinalis, Fructus Mume, Rheum palmatum, Anemarrhena asphodeloides, Radix Scutellariae and Fagopyrum cymosum had relatively strong effect against avian E. coli Os, while other Chinese herbal medicines had relatively weak or no inhibitory effect on avian E. coli 0s and 05. [ Conclusion] This study laid the foundation for further development of Chinese herbal medicine compound preparations to treat avian infectious laryngotracheitis, avian colibacillosis and other viral diseases and bacterial diseases. 展开更多
关键词 Chinese herbal medicine SCREENING Avian infectious laryngotracheitis virus Escherichia coli
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Identification of A Field Strain of Infectious Laryngotracheitis Virus Isolated from Jiangsu Province
5
作者 ZHANG Jian-Jun WU Xiao-chun +4 位作者 MA Jian-yun DING Hai-jun ZHANG Wei ZHOU Yang ZHOU Yu-shuang 《Animal Husbandry and Feed Science》 CAS 2011年第1期22-24,共3页
[ Objective] To isolate and identify infectious laryngotracheitis virus (ILTV) from chickens. [ Method] Larynx, trachea, liver and other organs were collected from infectious laryngotracheitis (ILT)-suspected laye... [ Objective] To isolate and identify infectious laryngotracheitis virus (ILTV) from chickens. [ Method] Larynx, trachea, liver and other organs were collected from infectious laryngotracheitis (ILT)-suspected layers. And ILTV TK gene was amplified from these specimens by PCR for initial diagnosis. Virus fluid was isolated and inoculated into SPF chicken embryos via allantoic cavity and chorioallantoic membrane (CAM), respectively. Hyaluronic acid in allantoic fluid was detected, and CAM lesions were observed. The definite diagnosis was performed through animal regression test. [Result] A 1.3 kbp fragment was amplified from larynx and its secretion of the ILT-suspected chickens. And its amino acid sequence had 98.5% homology to that of ILTV TKgene published in GenBank. After the chicken embryos were inoculated with the isolated ILFV fluid, pox spots, giant polynuclear syncytial cells having intranuclear inclusion bodies were observed in CAM. After being challenged by the IL TV fluid, the chickens showed typical respiratory symptoms and pathological changes of ILT. [Coudusion] A field strain named ILTV XZ09 was isolated from larynx and its secretion of ILT-suspected chickens. 展开更多
关键词 infectious laryngotracheitis infectious laryngotracheitis virus ISOLATION IDENTIFICATION
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Protection Efficacy of Recombinant Infectious Laryngotracheitis Vaccine in Chicks
6
作者 K. Chumpolbanchorn P. Anankeatikul +2 位作者 R. Thampisarn S. Jittakhot S. Leethochawalit 《Journal of Agricultural Science and Technology(A)》 2011年第8期1112-1114,共3页
A commercial recombinant fowl pox vectored infectious laryngotracheitis (ILT) vaccine was examined its protection efficacy in one-day-old chicks by subcutaneous route with various dose-strength. The treatment groups... A commercial recombinant fowl pox vectored infectious laryngotracheitis (ILT) vaccine was examined its protection efficacy in one-day-old chicks by subcutaneous route with various dose-strength. The treatment groups I-III birds were vaccinated with a full, 1/2 and 1/3 dose of recommendation dose, respectively. Thereafter, at 6 wk post vaccination, they were challenged with 5x labeled dose of live ILT vaccine. Protection efficacy of the vaccine was compared among groups based on antibody production and eye lesion score. The results of eye lesion score showed that there was a significant difference between control and treatment groups, whereas the difference was not found among the treatment groups. For seroconversion, there was no significant difference between birds in group I and II. However, higher number of seroconversion birds in groups I and II than group III was observed (P 〈 0.05). It was concluded that a half dose of recommendation dose had the same protection efficacy as a full dose of recombinant YP-LT vaccine. 展开更多
关键词 Recombinant vaccine infectious laryngotracheitis fowl pox vectored SEROCONVERSION eye lesion score
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鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)王岗株糖蛋白gB基因序列比较分析 被引量:8
7
作者 张绍杰 孟松树 +5 位作者 仇华吉 王柳 倪键强 何召庆 王玫 童光志 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期544-547,共4页
根据已经发表的鸡传染性喉气管炎病毒 ( ILTV) SA2 株的 g B基因序列 ,设计了 1对引物 ,通过 PCR扩增了 ILTV王岗株的 g B基因 ,并克隆到 p UC1 1 9质粒的 Eco R 位点中 ,经酶切鉴定证实后 ,进行了序列测定。结果表明 ,g B基因长 2 6 1 ... 根据已经发表的鸡传染性喉气管炎病毒 ( ILTV) SA2 株的 g B基因序列 ,设计了 1对引物 ,通过 PCR扩增了 ILTV王岗株的 g B基因 ,并克隆到 p UC1 1 9质粒的 Eco R 位点中 ,经酶切鉴定证实后 ,进行了序列测定。结果表明 ,g B基因长 2 6 1 9bp,包含完整的阅读框架。序列比较分析表明 ,ILTV王岗株的 g B基因核苷酸序列与英国的 Throne882和美国的 6 32 2个强毒株的 g B基因序列完全一致 ,而与澳大利亚 SA2 疫苗株g B基因核苷酸同一性为 99.8% ,氨基酸的同一性为 98.4 %。与澳大利亚 SA2 疫苗株 g B基因核苷酸和氨基酸序列比较发现 ,ILTV 3个强毒株 (王岗株 ,Throne 882株和 6 32株 ) g B基因的核苷酸序列在第 89位上均缺失 1个碱基 G,而在第 1 0 2位核苷酸处又插入了 1个碱基 A,从而引起了在氨基酸序列中第 2 9~ 32位 5个氨基酸的移码突变。 展开更多
关键词 鸡传染性喉气管炎病毒 糖蛋白gB基因 序列分析
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表达ILTV gB和UL32基因的重组鸡痘病毒疫苗安全性及稳定性分析 被引量:5
8
作者 徐美玉 赵烨 +4 位作者 朱发江 张圆圆 赵红玲 秦秀慧 张国中 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2015年第2期6-8,12,共4页
将重组疫苗在SPF鸡中进行连续传代评估表达ILTV g B和UL32基因的重组鸡痘病毒疫苗的安全性及稳定性。研究结果显示,将重组疫苗在SPF鸡体内连传5代,未观察到接种鸡有不良反应。接种鸡仅短暂排毒且重组病毒在环境中存在时间极短,而同居非... 将重组疫苗在SPF鸡中进行连续传代评估表达ILTV g B和UL32基因的重组鸡痘病毒疫苗的安全性及稳定性。研究结果显示,将重组疫苗在SPF鸡体内连传5代,未观察到接种鸡有不良反应。接种鸡仅短暂排毒且重组病毒在环境中存在时间极短,而同居非免疫鸡未被感染,表明重组病毒不具有水平传播能力。免疫后14 d对第1代和第5代接种鸡进行鸡痘强毒株攻击,保护率均在90%以上,表明重组疫苗具有较好的保护力。第5代病毒与第1代病毒相比,UL32基因的序列无任何变异,表明该疫苗具有良好的遗传稳定性,且各代次毒株毒价稳定,无毒力返强现象。以上结果显示,表达ILTV g B和UL32基因的重组鸡痘病毒疫苗具有良好安全性和稳定性。 展开更多
关键词 鸡传染性喉气管炎病毒 鸡痘病毒 安全性 稳定性
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传染性喉气管炎病毒河南株ILTV-CG GX基因的克隆与序列分析 被引量:2
9
作者 陈红英 崔保安 +3 位作者 李新生 杨明凡 赵丽 方剑玉 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2007年第4期29-32,共4页
根据GenBank中收录的鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)GX基因核苷酸序列,设计并合成了1对引物,应用PCR技术扩增ILTV河南株(ILTV-CG)GX基因。将ILTV-CG接种10日龄鸡胚,提取ILTV基因组DNA进行PCR扩增。将回收的PCR产物与pGEM-T Easy载体进行连... 根据GenBank中收录的鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)GX基因核苷酸序列,设计并合成了1对引物,应用PCR技术扩增ILTV河南株(ILTV-CG)GX基因。将ILTV-CG接种10日龄鸡胚,提取ILTV基因组DNA进行PCR扩增。将回收的PCR产物与pGEM-T Easy载体进行连接,转化JM109感受态细胞,经蓝白斑筛选,对菌液PCR和酶切鉴定为阳性的菌株进行测序。测序结果表明,所克隆的GX基因全长为950 bp,含有一个开放阅读框,编码299个氨基酸的多肽。推导的氨基酸有4个潜在的N-糖基化位点,有11个与二硫键形成有关的半胱氨酸。序列分析表明,克隆的ILTV-CGGX基因与GenBank中发表的ILTV-SA2株GX基因核苷酸同源性为97.2%,变异点为第124位插入1个碱基G,第136位又插入2个碱基C,从而引起该毒株GX基因推导的氨基酸序列在第33位插入1个亮氨酸,还存在多处氨基酸发生变化,氨基酸同源性为95.3%。GX基因的成功克隆为构建ILTVGX基因缺失的病毒活载体奠定基础。 展开更多
关键词 传染性喉气管炎病毒 GX基因 聚合酶链反应 序列分析
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ILT对孔雀部分血液化学指标的影响观察 被引量:2
10
作者 张云美 吴登虎 +1 位作者 杨晓黎 潘永全 《医学动物防制》 2003年第12期705-707,共3页
目的:观察在孔雀传染性喉气管炎(ILT)时的主要血液化学变化特征,为药物治疗该病提供基础资料。方法:通过临床特征和血清学检查将受检孔雀分为正常组(正常健康孔雀)与ILT组(患ILT病孔雀),同时测定两组血液化学指标,并统计分析比较。结果:... 目的:观察在孔雀传染性喉气管炎(ILT)时的主要血液化学变化特征,为药物治疗该病提供基础资料。方法:通过临床特征和血清学检查将受检孔雀分为正常组(正常健康孔雀)与ILT组(患ILT病孔雀),同时测定两组血液化学指标,并统计分析比较。结果:ILT组的尿素氮(Urea)、肌酐(Cr)、尿酸(UA)高于正常组(p<0.01),总蛋白(TP)、总胆红素(TB)、直接胆红素(DB)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆汁酸(TBA)和球蛋白(GLB)也显著高于正常组(p〈0.05);总钙(Tca)、镁(Mg)、磷(PI)、谷丙转氨酶(ALT)、钾(K)、钠(Na)、氯(Cl)两组间差异无显著性(P>0.05),而前白蛋白(PA)、谷草转氨酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)ILT组结果却低于正常组(P〈0.01)。结论;患ILT病的孔雀部分的血液化学指标与正常健康孔雀间存在显著差异。 展开更多
关键词 ilt 血液化学指标 孔雀 传染性喉气管炎 动物实验
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ILTVgB基因重组BCG菌株的构建及其免疫原性 被引量:1
11
作者 宋杰 苏钢 +1 位作者 裴艳涛 赵宝华 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期413-417,共5页
gB基因是传染性喉气管炎病毒(ILTV)的主要保护性抗原基因,本试验以ILTV基因组为模板,利用PCR特异扩增出gB基因,将其连接到含有人结核分枝杆菌启动子hsp70基因和堪萨斯分枝杆菌α信号肽基因的表达载体pRR3上,从而构建了大肠杆菌-分枝杆... gB基因是传染性喉气管炎病毒(ILTV)的主要保护性抗原基因,本试验以ILTV基因组为模板,利用PCR特异扩增出gB基因,将其连接到含有人结核分枝杆菌启动子hsp70基因和堪萨斯分枝杆菌α信号肽基因的表达载体pRR3上,从而构建了大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达质粒pR-α-gB,再电转化至BCG中,形成重组菌株rBCG-gB。热激后gB蛋白在耻垢分枝杆菌M.smegmatismc2155中高效表达,并且通过ELISA和Western blotting检测能够被抗ILTVgB蛋白的单克隆抗体识别。将106CFU的重组菌株rBCG-gB皮下注射免疫3周龄的SPF鸡,分别测定了淋巴细胞指数(SI)、吞噬细胞的吞噬能力以及血清中IL-2和IFN-γ的水平,结果表明重组菌株rBCG-gB作为载体疫苗具有较强的免疫反应。动物保护试验结果表明,重组菌株rBCG-gB对鸡具有一定的免疫保护效果,能够保护SPF鸡抵抗ILTV强毒株的攻击,血凝抑制试验表明血凝抑制抗体滴度能够显著增加。 展开更多
关键词 鸡传染性喉气管炎病毒 gB糖蛋白基因 rBCG 免疫原性
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鸡白细胞介素-18真核表达载体构建与ILTV弱毒疫苗联合免疫 被引量:1
12
作者 邵攀峰 陈红英 +4 位作者 崔保安 王振亚 宋亚鹏 管倩 刘金朋 《四川农业大学学报》 CSCD 北大核心 2009年第4期487-492,共6页
为了探索鸡IL-18在传染性喉气管炎病毒(ILTV)弱毒疫苗中的免疫佐剂作用,将鸡IL-18(ChIL-18)克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建重组真核表达质粒pcDNA3.1/ChIL-18(简称pIL-18)。用pIL-18、ILTV弱毒疫苗及其两者联合分别免疫21日龄SP... 为了探索鸡IL-18在传染性喉气管炎病毒(ILTV)弱毒疫苗中的免疫佐剂作用,将鸡IL-18(ChIL-18)克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建重组真核表达质粒pcDNA3.1/ChIL-18(简称pIL-18)。用pIL-18、ILTV弱毒疫苗及其两者联合分别免疫21日龄SPF雏鸡,免疫后每周抽取外周血及外周抗凝血,应用ELISA和流式细胞仪分别检测免疫鸡的体液免疫及细胞免疫水平。免疫后第4周用100 ELD50ILTV强毒进行攻击。结果pIL-18与ILTV弱毒疫苗联合免疫组的淋巴细胞亚群CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+明显高于ILTV弱毒疫苗免疫组(P<0.01),ILTV强毒攻毒后发病鸡数量少,并且发病症状较轻。 展开更多
关键词 白细胞介素-18 真核表达载体 传染性喉气管炎病毒 疫苗
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鸡传染性喉气管炎(AILT)油乳剂灭活疫苗的制备及应用 被引量:1
13
作者 胡建和 赵坤 +2 位作者 王天有 李敬玺 张彦明 《河南科技学院学报》 2003年第4期49-51,共3页
20世纪90年代以来,豫北地区间歇性地暴发了鸡传染性喉气管炎(AILT)。由于传统的弱毒疫苗毒性较强,尤其是对雏鸡,免疫后出现一定的发病率。因此,我们从发病鸡分离到了当地的强毒,经提纯后,制备了油乳剂灭活苗。经使用,其保护率和安全性... 20世纪90年代以来,豫北地区间歇性地暴发了鸡传染性喉气管炎(AILT)。由于传统的弱毒疫苗毒性较强,尤其是对雏鸡,免疫后出现一定的发病率。因此,我们从发病鸡分离到了当地的强毒,经提纯后,制备了油乳剂灭活苗。经使用,其保护率和安全性均优于市售弱毒疫苗,有效地预防和控制了该病的发生和流行。 展开更多
关键词 鸡传染性喉气管炎 病毒分离 油乳剂灭活苗
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ILTV Glycoprotein B(gB)与鸡Interleukin-18(IL-18)真核双表达载体的构建及表达
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作者 王淑娟 商艳红 +5 位作者 陈红英 邵攀峰 刘金朋 朱前磊 王子馨 崔保安 《四川农业大学学报》 CSCD 北大核心 2011年第4期549-554,共6页
将ILTVgB基因和鸡IL-18基因插入到真核双表达载体pIRES中,构建共表达gB和IL-18基因的重组质粒pIRES-gB/IL18和表达gB基因的pIRES-gB质粒。通过脂质体将其转染鸡胚成纤维细胞,利用RT-PCR及间接免疫荧光检测重组质粒在体外的表达。将重组... 将ILTVgB基因和鸡IL-18基因插入到真核双表达载体pIRES中,构建共表达gB和IL-18基因的重组质粒pIRES-gB/IL18和表达gB基因的pIRES-gB质粒。通过脂质体将其转染鸡胚成纤维细胞,利用RT-PCR及间接免疫荧光检测重组质粒在体外的表达。将重组质粒通过腿部肌肉多点注射免疫21日龄雏鸡,应用ELISA和流式细胞仪分别检测免疫鸡的体液免疫及细胞免疫水平。结果显示,pIRES-gB/IL18和pIRES-gB转染细胞中分别含gB/IL-18基因的mRNA和gB基因的mRNA。间接免疫荧光检测表明,pIRES-gB/IL18和pIRES-gB在CEF细胞中有效地转录并表达gB蛋白。pIRES-gB/IL18和pIRES-gB免疫雏鸡后均能促进外周血T淋巴细胞亚群数量和血清中特异性抗体水平的增加,但前者的免疫效果明显优于后者,表明gB基因和鸡IL-18基因均获得了表达,且鸡IL-18能明显增强ILTV DNA疫苗诱发的免疫应答。 展开更多
关键词 传染性喉气管炎病毒(iltV) GLYCOPROTEIN B(gB) 鸡Interleukin-18基因 真核表达 DNA疫苗
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血清单稀释 ELISA 检测鸡 ILT 抗体的初步研究
15
作者 毛春生 尹凤阁 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 1989年第1期25-32,共8页
应用鸡胚皮肤细胞培养传染性喉气管炎(ILT)病毒,经超速离心浓缩后制成抗原,兔抗鸡IgG 经辣根过氧化物酶标记,制成酶标抗体,进行酶联免疫吸附试验(ELISA),确定了该实验的最适条件。血清单稀释度(1:80)的光密度值(OD 值)与终点法所测定的E... 应用鸡胚皮肤细胞培养传染性喉气管炎(ILT)病毒,经超速离心浓缩后制成抗原,兔抗鸡IgG 经辣根过氧化物酶标记,制成酶标抗体,进行酶联免疫吸附试验(ELISA),确定了该实验的最适条件。血清单稀释度(1:80)的光密度值(OD 值)与终点法所测定的ELISA 滴度(ET)的自然对数间有良好的线性关系:Ln(ET)=5.80(OD)+3.76(r=0.94>r0.01),说明可利用血清的单稀释度测定鸡血清中ILT 抗体,同终点法相比,单稀释ELISA 可将检查效率提高8~10倍,是一种快速、敏感的实用方法。本实验还研究了人工感染、疫苗免疫后鸡血清中的抗体消长情况,比较了单稀释ELISA、血清中和实验(SN)、琼脂扩散沉淀试验(AGP)的特点。 展开更多
关键词 鸡传染性喉气管炎 血清单稀释酶联免疫吸附试验 抗体检测
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实时荧光定量RT-PCR检测ICP4、IFN-γ和IL-18基因在ILTV感染鸡三叉神经节中的表达 被引量:2
16
作者 木古丽 王云峰 +3 位作者 石星明 童光志 何来 王玫 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1150-1153,1166,共5页
将20只4月龄SPF鸡人工感染传染性喉气管炎病毒(ILTV)WG株,于感染后39d翅静脉和肌肉注射地塞米松(DEX),感染后5、9、10、11、12、39d及DEX处理后1、2、3、5、6、7、8d采喉拭子,检测病毒DNA,并于感染前和感染后6、10、20、31d及DEX处理后2... 将20只4月龄SPF鸡人工感染传染性喉气管炎病毒(ILTV)WG株,于感染后39d翅静脉和肌肉注射地塞米松(DEX),感染后5、9、10、11、12、39d及DEX处理后1、2、3、5、6、7、8d采喉拭子,检测病毒DNA,并于感染前和感染后6、10、20、31d及DEX处理后2、4、7、10、30d每组各取1只鸡颈静脉放血致死后无菌采集三叉神经节,提总RNA后利用real-timeRT-PCR的方法定量检测ICP4、IFN-γ和IL-18特异性mRNA。结果表明,在人工感染后处于潜伏状态的病毒能再被激活,并且ICP4基因在病毒还未被激活时就能低水平表达,这种低水平的立即早期(IE)基因的表达能提供持续的抗原刺激来维持神经节中的炎性细胞分泌IFN-γ和IL-18,以至于维持病毒处于潜伏状态而不致激活后感染其他的健康宿主;DEX处理后2d,IFN-γ的表达达到峰值,对病毒的再激活起抑制作用,尽管DEX处理前后IL-18的表达量没有明显变化,推测当潜伏的病毒一旦被激活时,IFN-γ可协同IL-18起到抑制IL-TV的作用。 展开更多
关键词 传染性喉气管炎病毒 地塞米松(DEX) 基因表达定量分析 实时荧光定量RT—PCR
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表达鸡传染性喉气管炎病毒gB基因的重组鸡痘病毒rFPV-ILTVgB的理化特性及遗传稳定性研究 被引量:1
17
作者 李诗 他蕾 +3 位作者 许霄 秦涛 陈素娟 彭大新 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期806-811,共6页
为检测各理化因子对表达鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)gB基因的重组鸡痘病毒rFPV-ILTVgB的影响,并探究其在体内体外的遗传稳定性,本研究将rFPV-ILTVgB经热、酸、碱、氯仿、乙醚和胰酶分别处理后,接种于鸡胚成纤维细胞(CEF)中,测定病毒的... 为检测各理化因子对表达鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)gB基因的重组鸡痘病毒rFPV-ILTVgB的影响,并探究其在体内体外的遗传稳定性,本研究将rFPV-ILTVgB经热、酸、碱、氯仿、乙醚和胰酶分别处理后,接种于鸡胚成纤维细胞(CEF)中,测定病毒的半数感染量(TCID50),结果显示:rFPV-ILTVgB经55℃水浴30 min或60℃水浴15 min可被完全灭活;经pH3~pH9的酸碱作用或经24 h的乙醚作用,病毒滴度变化不明显;经胰蛋白酶或氯仿处理后,病毒滴度下降明显;将rFPV-ILTVgB在CEF中连续培养30代,取第0、5、10、15、20、25、30代rFPV-ILTVgB分别扩增g B基因并测序,通过间接免疫荧光试验鉴定gB蛋白的表达,结果显示:rFPV-ILTVgB能在CEF细胞中稳定传代,gB基因序列在传代过程中未发生任何突变,gB蛋白稳定表达;同时将rFPV-ILTVgB在SPF鸡体内连续传代,结果显示,rFPV-ILTVgB在SPF鸡体内的传代过程中,gB基因的阳性检出率逐渐降低,对鸡体的致病性逐渐降低,不存在毒力返强的可能,符合生物制品的相关要求。本研究选取表达ILTV优势流行株gB基因的rFPV-ILTVgB,首次从分子生物学和遗传学等角度研究该疫苗候选株,为后续该疫苗的生产、运输提供参考。 展开更多
关键词 传染性喉气管炎 重组鸡痘病毒 GB基因 理化特性 遗传稳定性
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鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)WG株ICP4基因的鉴定及其在潜伏位点的表达
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作者 木古丽 王云峰 +4 位作者 侯绍华 石星明 王玫 冉多良 童光志 《广西农业生物科学》 CAS CSCD 2006年第B09期213-214,共2页
根据传染性喉气管炎病毒(Infectious Laryngotracheitis Virus,ILTV)SA2株ICP4基因序列设计并合成3对引物,以ILTV中国王岗株(WG)株DNA为模板扩增ICP4基因,并对其进行了序列测定。将ILTV WG株的ICP4基因及其推导的氨基酸序列分别... 根据传染性喉气管炎病毒(Infectious Laryngotracheitis Virus,ILTV)SA2株ICP4基因序列设计并合成3对引物,以ILTV中国王岗株(WG)株DNA为模板扩增ICP4基因,并对其进行了序列测定。将ILTV WG株的ICP4基因及其推导的氨基酸序列分别与ILTVSA-2株、BHV-1、EHV-1、EHV-4、MDV-1、MDV-2、HVT、PRV、VZV、HSV-1和HSV-2的ICP4基因及其推导的氨基酸序列比较后发现,ILTV毒株之间ICP4基因相对保守,核苷酸和氨基酸水平的同源性分别为99.7%和99.19/5,但与其他α-疱疹病毒的ICP4基因的同源性则较低,低于3.0%。对潜伏感染鸡三叉神经节中病毒基因的检测显示,在人工感染ILTVWG株后第10460d内均能检测到低水平的ICP4特异RNA,而gB、gC、TK则未能检出。鉴于目前国内外对α-疱疹病毒潜伏感染相关基因以及ICP4基因序列和结构功能的研究,ILTVWG株ICP4基因的克隆和序列测定,以及病毒基因在潜伏感染鸡三叉神经节中的差异表达,为进一步研究ICP4基因的功能及确定潜伏感染相关基因奠定了基础。 展开更多
关键词 传染性喉气管炎病毒 WG株 ICP4基因 序列分析 潜伏感染
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鸡传染性喉气管炎病毒SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测方法的建立与应用
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作者 张玉霞 董雯雯 +2 位作者 袁小远 孟凯 徐怀英 《山东农业科学》 北大核心 2024年第6期128-132,共5页
鸡传染性喉气管炎病毒(Infectious laryngotracheitis virus,ILTV)以往多感染蛋鸡,近年来在蛋种鸡、商品肉鸡中连续多发,表明该病毒感染谱有扩大风险,因此有必要加强对ILTV的监测。为建立高效、灵敏的ILTV检测方法,本研究以ILTV的TK基... 鸡传染性喉气管炎病毒(Infectious laryngotracheitis virus,ILTV)以往多感染蛋鸡,近年来在蛋种鸡、商品肉鸡中连续多发,表明该病毒感染谱有扩大风险,因此有必要加强对ILTV的监测。为建立高效、灵敏的ILTV检测方法,本研究以ILTV的TK基因为靶基因设计引物,扩增并构建pMD18-T-TK质粒标准品,建立SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR检测方法和标准曲线,对其特异性、敏感性和重复性进行验证,并对临床疑似病例进行检测。结果发现,该检测方法特异性良好,与其他常见症状相似病原无交叉反应;最低检测浓度为1.55拷贝/μL,灵敏度是普通PCR方法的10倍;重复性好,批内、批间变异系数在0.79%~1.83%之间。表明本研究建立的ILTV实时荧光定量PCR方法特异性强、灵敏度高,可为ILTV的临床诊断和流行病学研究等提供有效的检测方法。 展开更多
关键词 鸡喉气管炎病毒 TK基因 实时荧光定量PCR 特异性 敏感性 重复性
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药理激活p38/MAPK体外抗传染性喉气管炎病毒效应的检测
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作者 崔露 刘柘一 +3 位作者 张宇 韩宗玺 刘胜旺 李海 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期723-730,746,共9页
鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)是一种严重危害我国和世界养禽业的重要病原。本研究以ILTV-LJS09株感染的鸡LMH细胞系作为研究模型,对该病毒的全基因组转录谱分析,采用基因富集分析(GSEA)分析细胞中的信号通路。结果发现MAPK通路是ILTV感染... 鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)是一种严重危害我国和世界养禽业的重要病原。本研究以ILTV-LJS09株感染的鸡LMH细胞系作为研究模型,对该病毒的全基因组转录谱分析,采用基因富集分析(GSEA)分析细胞中的信号通路。结果发现MAPK通路是ILTV感染LMH细胞后最显著激活的通路。进一步采用western blot鉴定,结果显示ILTV感染可以显著激活宿主细胞p38/MAPK信号通路。本研究同时采用脱氢紫堇碱(DHC)和佛波酯(PMA)作为p38/MAPK激活剂,采用特异性荧光定量PCR检测病毒基因组拷贝数,通过测定病毒的TCID_(50)检测病毒滴度,利用荧光定量PCR检测细胞中代谢相关基因的转录水平,使用高内涵成像技术结合Annexin V-FITC/碘化丙啶双染法检测细胞凋亡,从而探究药理激活p38/MAPK对ILTV感染的影响。病毒特异性荧光定量PCR检测结果显示,DHC和PMA均显著降低ILTV基因组的复制(P<0.05)。TCID_(50)测定结果显示,DHC和PMA还显著抑制ILTV感染性病毒粒子的增殖(P<0.05)。荧光定量PCR检测结果显示,无论DHC还是PMA对感染细胞代谢基因的总体转录水平均无明显影响。高内涵成像技术检测结果显示,DHC和PMA显著加剧ILTV感染细胞的凋亡(P<0.05)。综上所述,本研究结果显示DHC和PMA均能够在不影响感染细胞代谢基因表达的情况下,通过加剧ILTV感染细胞的凋亡有效抑制ILTV的感染。本研究在ILTV体外感染模型中证明药理激活p38/MAPK信号通路具有高效的抗病毒作用,为治疗ILTV的感染提供了新的思路,对其他疱疹病毒感染的防治研究也具有借鉴意义。 展开更多
关键词 传染性喉气管炎病毒 P38丝裂原活化蛋白激酶 转录谱 凋亡
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