期刊文献+
共找到106篇文章
< 1 2 6 >
每页显示 20 50 100
Infectious laryngotracheitis virus in chickens 被引量:6
1
作者 Shan-Chia Ou Joseph J Giambrone 《World Journal of Virology》 2012年第5期142-149,共8页
Infectious laryngotracheitis(ILT) is an important respiratory disease of chickens and annually causes significant economic losses in the poultry industry worldwide. ILT virus(ILTV) belongs to alphaherpesvirinae and th... Infectious laryngotracheitis(ILT) is an important respiratory disease of chickens and annually causes significant economic losses in the poultry industry worldwide. ILT virus(ILTV) belongs to alphaherpesvirinae and the Gallid herpesvirus 1 species. The transmission of ILTV is via respiratory and ocular routes. Clinical and post-mortem signs of ILT can be separated into two forms according to its virulence. The characteristic of the severe form is bloody mucus in the trachea with high mortality. The mild form causes nasal discharge, conjunctivitis, and reduced weight gain and egg production. Conventional polymerase chain reaction(PCR), nested PCR, real-time PCR, and loop-mediated isothermal amplification were developed to detect ILTV samples from natural or experimentally infected birds. The PCR combined with restriction fragment length polymorphism(RFLP) can separate ILTVs into several genetic groups. These groups can separate vaccine from wild type field viruses. Vaccination is a common method to prevent ILT. However, field isolates and vaccine viruses can establish latent infected carriers. According to PCR-RFLP results, virulent field ILTVs can be derived from modified-live vaccines. Therefore, modified-live vaccine reversion provides a source for ILT outbreaks on chicken farms. Two recently licensed commercial recombinant ILT vaccines are also in use. Other recombinant and gene-deficient vaccine candidates are in the developmental stages. They offer additional hope for the control of this disease. However, in ILT endemic regions, improved biosecurity and management practices are critical for improved ILT control. 展开更多
关键词 infectious laryngotracheitis virus infectious laryngotracheitis Gallid herpesvirus-1 POLYMERASE chain reaction combined with RESTRICTION FRAGMENT length polymorphism RECOMBINANT laryngotracheitis vaccines
下载PDF
Screening of Chinese Herbal Medicines against Avian Infectious Laryngotracheitis Virus and Escherichia coli
2
作者 Yanying ZHANG Qiumei SHI +2 位作者 Guisheng GAO Guangping GAO Ping SHEN 《Agricultural Biotechnology》 CAS 2013年第5期25-27,31,共4页
[ Objective] This study aimed to screen Chinese herbal medicines against avian infectious laryngotracheitis virus and Escherichia coli. [ Method ] Conventional Chinese medicine plate dilution method, plate punching me... [ Objective] This study aimed to screen Chinese herbal medicines against avian infectious laryngotracheitis virus and Escherichia coli. [ Method ] Conventional Chinese medicine plate dilution method, plate punching method and test tube method were applied to screen Chinese herbal medicines against avian infectious laryngotracheitis virus based on chicken embryo inoculation experiment. [ Result ] Forsythia suspensa, Radix lsatidis, Isatis iadigotica, Lonicera japonica, Codonopsis pilosula, Astragalus membranaceus, Rhizoma Atractylodis Macrocephalae, C, tyeyrrhiza uralensis and Pericarpium granati had relatively strong anti-ILTV effect; among the Chinese herbal medicines against avian E. coli, Sanguisorba offwinalis, Fructus Mume, Rheum palmatum, Anemarrhena asphodeloides, Radix Scutellariae and Fagopyrum cymosum had relatively strong effect against avian E. coli Os, while other Chinese herbal medicines had relatively weak or no inhibitory effect on avian E. coli 0s and 05. [ Conclusion] This study laid the foundation for further development of Chinese herbal medicine compound preparations to treat avian infectious laryngotracheitis, avian colibacillosis and other viral diseases and bacterial diseases. 展开更多
关键词 Chinese herbal medicine SCREENING Avian infectious laryngotracheitis virus Escherichia coli
下载PDF
Identification of A Field Strain of Infectious Laryngotracheitis Virus Isolated from Jiangsu Province
3
作者 ZHANG Jian-Jun WU Xiao-chun +4 位作者 MA Jian-yun DING Hai-jun ZHANG Wei ZHOU Yang ZHOU Yu-shuang 《Animal Husbandry and Feed Science》 CAS 2011年第1期22-24,共3页
[Objective] To isolate and identify infectious laryngotracheitis virus(ILTV) from chickens.[Method] Larynx,trachea,liver and other organs were collected from infectious laryngotracheitis(ILT)-suspected layers.And ILTV... [Objective] To isolate and identify infectious laryngotracheitis virus(ILTV) from chickens.[Method] Larynx,trachea,liver and other organs were collected from infectious laryngotracheitis(ILT)-suspected layers.And ILTV TK gene was amplified from these specimens by PCR for initial diagnosis.Virus fluid was isolated and inoculated into SPF chicken embryos via allantoic cavity and chorioallantoic membrane(CAM) ,respectively.Hyaluronic acid in allantoic fluid was detected,and CAM lesions were observed.The definite diagnosis was performed through animal regression test.[Result] A 1.3 kbp fragment was amplified from larynx and its secretion of the ILT-suspected chickens.And its amino acid sequence had 98.5% homology to that of ILTV TK gene published in GenBank.After the chicken embryos were inoculated with the isolated ILTV fluid,pox spots,giant polynuclear syncytial cells having intranuclear inclusion bodies were observed in CAM.After being challenged by the ILTV fluid,the chickens showed typical respiratory symptoms and pathological changes of ILT.[Conclusion] A field strain named ILTV XZ09 was isolated from larynx and its secretion of ILT-suspected chickens. 展开更多
关键词 鸡传染性喉气管炎病毒 分离 鉴定 变异株 江苏省 GENBANK iltv 绒毛尿囊膜
下载PDF
Effect of the infectious laryngotracheitis virus (ILTV) glycoprotein G on virus attachment, penetration, growth curve and direct cell-to-cell spread
4
作者 SUN Zhaogang ZHANG Manfu 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 2005年第5期487-494,共8页
The secreted alphaherpesvirus glycoprotein G (gG) works differently from other proteins. Analysis of the role of ILTV gG in virus attachment, penetration, direct cell-to-cell spread (CTCS) and the growth curve showed ... The secreted alphaherpesvirus glycoprotein G (gG) works differently from other proteins. Analysis of the role of ILTV gG in virus attachment, penetration, direct cell-to-cell spread (CTCS) and the growth curve showed that gG or its antibody had no effect on ILTV attachment and penetration and that the gG antibody reduced the virus plaque size and the one-step growth curve on chicken embryo liver (CEL) cells, but gG did not affect the virus plaque size or the one-step growth curve on CEL cells. Laser scanning confocal microscopy (LSCM) detection showed that ILTV gG is located in the perinuclear region and the membrane of the CEL cells. These results suggested that ILTV gG might contribute to direct cell-to-cell transmission. 展开更多
关键词 infectious laryngotracheitis virus GLYCOPROTEIN G direct CELL-TO-CELL transmission.
原文传递
鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)王岗株糖蛋白gB基因序列比较分析 被引量:8
5
作者 张绍杰 孟松树 +5 位作者 仇华吉 王柳 倪键强 何召庆 王玫 童光志 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期544-547,共4页
根据已经发表的鸡传染性喉气管炎病毒 ( ILTV) SA2 株的 g B基因序列 ,设计了 1对引物 ,通过 PCR扩增了 ILTV王岗株的 g B基因 ,并克隆到 p UC1 1 9质粒的 Eco R 位点中 ,经酶切鉴定证实后 ,进行了序列测定。结果表明 ,g B基因长 2 6 1 ... 根据已经发表的鸡传染性喉气管炎病毒 ( ILTV) SA2 株的 g B基因序列 ,设计了 1对引物 ,通过 PCR扩增了 ILTV王岗株的 g B基因 ,并克隆到 p UC1 1 9质粒的 Eco R 位点中 ,经酶切鉴定证实后 ,进行了序列测定。结果表明 ,g B基因长 2 6 1 9bp,包含完整的阅读框架。序列比较分析表明 ,ILTV王岗株的 g B基因核苷酸序列与英国的 Throne882和美国的 6 32 2个强毒株的 g B基因序列完全一致 ,而与澳大利亚 SA2 疫苗株g B基因核苷酸同一性为 99.8% ,氨基酸的同一性为 98.4 %。与澳大利亚 SA2 疫苗株 g B基因核苷酸和氨基酸序列比较发现 ,ILTV 3个强毒株 (王岗株 ,Throne 882株和 6 32株 ) g B基因的核苷酸序列在第 89位上均缺失 1个碱基 G,而在第 1 0 2位核苷酸处又插入了 1个碱基 A,从而引起了在氨基酸序列中第 2 9~ 32位 5个氨基酸的移码突变。 展开更多
关键词 鸡传染性喉气管炎病毒 糖蛋白gB基因 序列分析
下载PDF
表达ILTV gB和UL32基因的重组鸡痘病毒疫苗安全性及稳定性分析 被引量:5
6
作者 徐美玉 赵烨 +4 位作者 朱发江 张圆圆 赵红玲 秦秀慧 张国中 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2015年第2期6-8,12,共4页
将重组疫苗在SPF鸡中进行连续传代评估表达ILTV g B和UL32基因的重组鸡痘病毒疫苗的安全性及稳定性。研究结果显示,将重组疫苗在SPF鸡体内连传5代,未观察到接种鸡有不良反应。接种鸡仅短暂排毒且重组病毒在环境中存在时间极短,而同居非... 将重组疫苗在SPF鸡中进行连续传代评估表达ILTV g B和UL32基因的重组鸡痘病毒疫苗的安全性及稳定性。研究结果显示,将重组疫苗在SPF鸡体内连传5代,未观察到接种鸡有不良反应。接种鸡仅短暂排毒且重组病毒在环境中存在时间极短,而同居非免疫鸡未被感染,表明重组病毒不具有水平传播能力。免疫后14 d对第1代和第5代接种鸡进行鸡痘强毒株攻击,保护率均在90%以上,表明重组疫苗具有较好的保护力。第5代病毒与第1代病毒相比,UL32基因的序列无任何变异,表明该疫苗具有良好的遗传稳定性,且各代次毒株毒价稳定,无毒力返强现象。以上结果显示,表达ILTV g B和UL32基因的重组鸡痘病毒疫苗具有良好安全性和稳定性。 展开更多
关键词 鸡传染性喉气管炎病毒 鸡痘病毒 安全性 稳定性
下载PDF
ILTVgB基因重组BCG菌株的构建及其免疫原性 被引量:1
7
作者 宋杰 苏钢 +1 位作者 裴艳涛 赵宝华 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期413-417,共5页
gB基因是传染性喉气管炎病毒(ILTV)的主要保护性抗原基因,本试验以ILTV基因组为模板,利用PCR特异扩增出gB基因,将其连接到含有人结核分枝杆菌启动子hsp70基因和堪萨斯分枝杆菌α信号肽基因的表达载体pRR3上,从而构建了大肠杆菌-分枝杆... gB基因是传染性喉气管炎病毒(ILTV)的主要保护性抗原基因,本试验以ILTV基因组为模板,利用PCR特异扩增出gB基因,将其连接到含有人结核分枝杆菌启动子hsp70基因和堪萨斯分枝杆菌α信号肽基因的表达载体pRR3上,从而构建了大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达质粒pR-α-gB,再电转化至BCG中,形成重组菌株rBCG-gB。热激后gB蛋白在耻垢分枝杆菌M.smegmatismc2155中高效表达,并且通过ELISA和Western blotting检测能够被抗ILTVgB蛋白的单克隆抗体识别。将106CFU的重组菌株rBCG-gB皮下注射免疫3周龄的SPF鸡,分别测定了淋巴细胞指数(SI)、吞噬细胞的吞噬能力以及血清中IL-2和IFN-γ的水平,结果表明重组菌株rBCG-gB作为载体疫苗具有较强的免疫反应。动物保护试验结果表明,重组菌株rBCG-gB对鸡具有一定的免疫保护效果,能够保护SPF鸡抵抗ILTV强毒株的攻击,血凝抑制试验表明血凝抑制抗体滴度能够显著增加。 展开更多
关键词 鸡传染性喉气管炎病毒 gB糖蛋白基因 rBCG 免疫原性
下载PDF
传染性喉气管炎病毒河南株ILTV-CG GX基因的克隆与序列分析 被引量:2
8
作者 陈红英 崔保安 +3 位作者 李新生 杨明凡 赵丽 方剑玉 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2007年第4期29-32,共4页
根据GenBank中收录的鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)GX基因核苷酸序列,设计并合成了1对引物,应用PCR技术扩增ILTV河南株(ILTV-CG)GX基因。将ILTV-CG接种10日龄鸡胚,提取ILTV基因组DNA进行PCR扩增。将回收的PCR产物与pGEM-T Easy载体进行连... 根据GenBank中收录的鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)GX基因核苷酸序列,设计并合成了1对引物,应用PCR技术扩增ILTV河南株(ILTV-CG)GX基因。将ILTV-CG接种10日龄鸡胚,提取ILTV基因组DNA进行PCR扩增。将回收的PCR产物与pGEM-T Easy载体进行连接,转化JM109感受态细胞,经蓝白斑筛选,对菌液PCR和酶切鉴定为阳性的菌株进行测序。测序结果表明,所克隆的GX基因全长为950 bp,含有一个开放阅读框,编码299个氨基酸的多肽。推导的氨基酸有4个潜在的N-糖基化位点,有11个与二硫键形成有关的半胱氨酸。序列分析表明,克隆的ILTV-CGGX基因与GenBank中发表的ILTV-SA2株GX基因核苷酸同源性为97.2%,变异点为第124位插入1个碱基G,第136位又插入2个碱基C,从而引起该毒株GX基因推导的氨基酸序列在第33位插入1个亮氨酸,还存在多处氨基酸发生变化,氨基酸同源性为95.3%。GX基因的成功克隆为构建ILTVGX基因缺失的病毒活载体奠定基础。 展开更多
关键词 传染性喉气管炎病毒 GX基因 聚合酶链反应 序列分析
下载PDF
鸡白细胞介素-18真核表达载体构建与ILTV弱毒疫苗联合免疫 被引量:1
9
作者 邵攀峰 陈红英 +4 位作者 崔保安 王振亚 宋亚鹏 管倩 刘金朋 《四川农业大学学报》 CSCD 北大核心 2009年第4期487-492,共6页
为了探索鸡IL-18在传染性喉气管炎病毒(ILTV)弱毒疫苗中的免疫佐剂作用,将鸡IL-18(ChIL-18)克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建重组真核表达质粒pcDNA3.1/ChIL-18(简称pIL-18)。用pIL-18、ILTV弱毒疫苗及其两者联合分别免疫21日龄SP... 为了探索鸡IL-18在传染性喉气管炎病毒(ILTV)弱毒疫苗中的免疫佐剂作用,将鸡IL-18(ChIL-18)克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建重组真核表达质粒pcDNA3.1/ChIL-18(简称pIL-18)。用pIL-18、ILTV弱毒疫苗及其两者联合分别免疫21日龄SPF雏鸡,免疫后每周抽取外周血及外周抗凝血,应用ELISA和流式细胞仪分别检测免疫鸡的体液免疫及细胞免疫水平。免疫后第4周用100 ELD50ILTV强毒进行攻击。结果pIL-18与ILTV弱毒疫苗联合免疫组的淋巴细胞亚群CD3+、CD3+CD4+、CD3+CD8+明显高于ILTV弱毒疫苗免疫组(P<0.01),ILTV强毒攻毒后发病鸡数量少,并且发病症状较轻。 展开更多
关键词 白细胞介素-18 真核表达载体 传染性喉气管炎病毒 疫苗
下载PDF
鸡传染性喉气管炎病毒微滴式数字PCR定量检测方法的建立
10
作者 谢志勤 谢芝勋 +14 位作者 张艳芳 范晴 谢丽基 万丽军 罗思思 李孟 张民秀 曾婷婷 黄娇玲 王盛 李丹 韦悠 李小凤 任红玉 阮志华 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期381-388,共8页
旨在建立检测鸡传染性喉气管炎病毒(infectious laryngotracheitis virus, ILTV)绝对定量方法。根据已发表的鸡ILTV的TK基因序列,针对其保守区域分别设计1对特异引物和1条探针,建立检测鸡ILTV的微滴式数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR... 旨在建立检测鸡传染性喉气管炎病毒(infectious laryngotracheitis virus, ILTV)绝对定量方法。根据已发表的鸡ILTV的TK基因序列,针对其保守区域分别设计1对特异引物和1条探针,建立检测鸡ILTV的微滴式数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)方法,并评价其特异性、敏感性和重复性。结果显示,建立方法的最佳引物浓度为20μmol/μL,最佳探针浓度为10μmol/μL,最佳退火温度为56℃。特异性检测结果显示,建立的方法只检出ILTV,没有检出其他病原株。敏感性检测结果显示,采用建立的方法定量检出ILTV重组质粒标准品的最低限为4.6拷贝/μL。对3个连续稀释的pMD18-ILTV重组质粒DNA进行检测,3次重复检测结果的变异系数均小于5%。对83份病鸡喉拭子、肺及脾组织样品进行检测,采用建立的ddPCR检出ILTV阳性样品10份,荧光定量PCR检出ILTV阳性样品9份,ddPCR的阳性检出率(12.05%)高于荧光定量PCR的阳性检出率(10.84%)。结果表明,建立的ddPCR方法定量检测ILTV特异性强、敏感性高、重复性好,为绝对定量检测ILTV提供更好的技术支撑。 展开更多
关键词 鸡传染性喉气管炎病毒 微滴式数字PCR 定量检测
下载PDF
ILTV Glycoprotein B(gB)与鸡Interleukin-18(IL-18)真核双表达载体的构建及表达
11
作者 王淑娟 商艳红 +5 位作者 陈红英 邵攀峰 刘金朋 朱前磊 王子馨 崔保安 《四川农业大学学报》 CSCD 北大核心 2011年第4期549-554,共6页
将ILTVgB基因和鸡IL-18基因插入到真核双表达载体pIRES中,构建共表达gB和IL-18基因的重组质粒pIRES-gB/IL18和表达gB基因的pIRES-gB质粒。通过脂质体将其转染鸡胚成纤维细胞,利用RT-PCR及间接免疫荧光检测重组质粒在体外的表达。将重组... 将ILTVgB基因和鸡IL-18基因插入到真核双表达载体pIRES中,构建共表达gB和IL-18基因的重组质粒pIRES-gB/IL18和表达gB基因的pIRES-gB质粒。通过脂质体将其转染鸡胚成纤维细胞,利用RT-PCR及间接免疫荧光检测重组质粒在体外的表达。将重组质粒通过腿部肌肉多点注射免疫21日龄雏鸡,应用ELISA和流式细胞仪分别检测免疫鸡的体液免疫及细胞免疫水平。结果显示,pIRES-gB/IL18和pIRES-gB转染细胞中分别含gB/IL-18基因的mRNA和gB基因的mRNA。间接免疫荧光检测表明,pIRES-gB/IL18和pIRES-gB在CEF细胞中有效地转录并表达gB蛋白。pIRES-gB/IL18和pIRES-gB免疫雏鸡后均能促进外周血T淋巴细胞亚群数量和血清中特异性抗体水平的增加,但前者的免疫效果明显优于后者,表明gB基因和鸡IL-18基因均获得了表达,且鸡IL-18能明显增强ILTV DNA疫苗诱发的免疫应答。 展开更多
关键词 传染性喉气管炎病毒(iltv) GLYCOPROTEIN B(gB) 鸡Interleukin-18基因 真核表达 DNA疫苗
下载PDF
实时荧光定量RT-PCR检测ICP4、IFN-γ和IL-18基因在ILTV感染鸡三叉神经节中的表达 被引量:2
12
作者 木古丽 王云峰 +3 位作者 石星明 童光志 何来 王玫 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1150-1153,1166,共5页
将20只4月龄SPF鸡人工感染传染性喉气管炎病毒(ILTV)WG株,于感染后39d翅静脉和肌肉注射地塞米松(DEX),感染后5、9、10、11、12、39d及DEX处理后1、2、3、5、6、7、8d采喉拭子,检测病毒DNA,并于感染前和感染后6、10、20、31d及DEX处理后2... 将20只4月龄SPF鸡人工感染传染性喉气管炎病毒(ILTV)WG株,于感染后39d翅静脉和肌肉注射地塞米松(DEX),感染后5、9、10、11、12、39d及DEX处理后1、2、3、5、6、7、8d采喉拭子,检测病毒DNA,并于感染前和感染后6、10、20、31d及DEX处理后2、4、7、10、30d每组各取1只鸡颈静脉放血致死后无菌采集三叉神经节,提总RNA后利用real-timeRT-PCR的方法定量检测ICP4、IFN-γ和IL-18特异性mRNA。结果表明,在人工感染后处于潜伏状态的病毒能再被激活,并且ICP4基因在病毒还未被激活时就能低水平表达,这种低水平的立即早期(IE)基因的表达能提供持续的抗原刺激来维持神经节中的炎性细胞分泌IFN-γ和IL-18,以至于维持病毒处于潜伏状态而不致激活后感染其他的健康宿主;DEX处理后2d,IFN-γ的表达达到峰值,对病毒的再激活起抑制作用,尽管DEX处理前后IL-18的表达量没有明显变化,推测当潜伏的病毒一旦被激活时,IFN-γ可协同IL-18起到抑制IL-TV的作用。 展开更多
关键词 传染性喉气管炎病毒 地塞米松(DEX) 基因表达定量分析 实时荧光定量RT—PCR
下载PDF
鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)WG株ICP4基因的鉴定及其在潜伏位点的表达
13
作者 木古丽 王云峰 +4 位作者 侯绍华 石星明 王玫 冉多良 童光志 《广西农业生物科学》 CAS CSCD 2006年第B09期213-214,共2页
根据传染性喉气管炎病毒(Infectious Laryngotracheitis Virus,ILTV)SA2株ICP4基因序列设计并合成3对引物,以ILTV中国王岗株(WG)株DNA为模板扩增ICP4基因,并对其进行了序列测定。将ILTV WG株的ICP4基因及其推导的氨基酸序列分别... 根据传染性喉气管炎病毒(Infectious Laryngotracheitis Virus,ILTV)SA2株ICP4基因序列设计并合成3对引物,以ILTV中国王岗株(WG)株DNA为模板扩增ICP4基因,并对其进行了序列测定。将ILTV WG株的ICP4基因及其推导的氨基酸序列分别与ILTVSA-2株、BHV-1、EHV-1、EHV-4、MDV-1、MDV-2、HVT、PRV、VZV、HSV-1和HSV-2的ICP4基因及其推导的氨基酸序列比较后发现,ILTV毒株之间ICP4基因相对保守,核苷酸和氨基酸水平的同源性分别为99.7%和99.19/5,但与其他α-疱疹病毒的ICP4基因的同源性则较低,低于3.0%。对潜伏感染鸡三叉神经节中病毒基因的检测显示,在人工感染ILTVWG株后第10460d内均能检测到低水平的ICP4特异RNA,而gB、gC、TK则未能检出。鉴于目前国内外对α-疱疹病毒潜伏感染相关基因以及ICP4基因序列和结构功能的研究,ILTVWG株ICP4基因的克隆和序列测定,以及病毒基因在潜伏感染鸡三叉神经节中的差异表达,为进一步研究ICP4基因的功能及确定潜伏感染相关基因奠定了基础。 展开更多
关键词 传染性喉气管炎病毒 WG株 ICP4基因 序列分析 潜伏感染
下载PDF
表达鸡传染性喉气管炎病毒gB基因的重组鸡痘病毒rFPV-ILTVgB的理化特性及遗传稳定性研究
14
作者 李诗 他蕾 +3 位作者 许霄 秦涛 陈素娟 彭大新 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第8期806-811,共6页
为检测各理化因子对表达鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)gB基因的重组鸡痘病毒rFPV-ILTVgB的影响,并探究其在体内体外的遗传稳定性,本研究将rFPV-ILTVgB经热、酸、碱、氯仿、乙醚和胰酶分别处理后,接种于鸡胚成纤维细胞(CEF)中,测定病毒的... 为检测各理化因子对表达鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)gB基因的重组鸡痘病毒rFPV-ILTVgB的影响,并探究其在体内体外的遗传稳定性,本研究将rFPV-ILTVgB经热、酸、碱、氯仿、乙醚和胰酶分别处理后,接种于鸡胚成纤维细胞(CEF)中,测定病毒的半数感染量(TCID50),结果显示:rFPV-ILTVgB经55℃水浴30 min或60℃水浴15 min可被完全灭活;经pH3~pH9的酸碱作用或经24 h的乙醚作用,病毒滴度变化不明显;经胰蛋白酶或氯仿处理后,病毒滴度下降明显;将rFPV-ILTVgB在CEF中连续培养30代,取第0、5、10、15、20、25、30代rFPV-ILTVgB分别扩增g B基因并测序,通过间接免疫荧光试验鉴定gB蛋白的表达,结果显示:rFPV-ILTVgB能在CEF细胞中稳定传代,gB基因序列在传代过程中未发生任何突变,gB蛋白稳定表达;同时将rFPV-ILTVgB在SPF鸡体内连续传代,结果显示,rFPV-ILTVgB在SPF鸡体内的传代过程中,gB基因的阳性检出率逐渐降低,对鸡体的致病性逐渐降低,不存在毒力返强的可能,符合生物制品的相关要求。本研究选取表达ILTV优势流行株gB基因的rFPV-ILTVgB,首次从分子生物学和遗传学等角度研究该疫苗候选株,为后续该疫苗的生产、运输提供参考。 展开更多
关键词 传染性喉气管炎 重组鸡痘病毒 GB基因 理化特性 遗传稳定性
下载PDF
一株鸡传染性喉气管炎病毒流行毒株的鉴定与致病性分析
15
作者 王静文 张敏 +2 位作者 陈玲 杨承槐 蒋桃珍 《中国兽药杂志》 2023年第1期12-18,共7页
为评价一株鸡传染性喉气管炎病毒流行毒株在疫苗效力评价中的应用表现,对制备的一株强毒株进行了系统鉴定,包括性状、纯净性、真空度、病毒含量、特异性等,尤其重点关注不同病毒含量对不同日龄鸡只的致病力情况。结果显示,本研究制备的... 为评价一株鸡传染性喉气管炎病毒流行毒株在疫苗效力评价中的应用表现,对制备的一株强毒株进行了系统鉴定,包括性状、纯净性、真空度、病毒含量、特异性等,尤其重点关注不同病毒含量对不同日龄鸡只的致病力情况。结果显示,本研究制备的鸡传染性喉气管炎病毒冻干物性状良好,无细菌、支原体和外源病毒污染,可被特异性血清完全中和,病毒含量稳定在105.1EID50/0.2mL。该毒株致病力表现稳定,100 EID50可使80%鸡只发病或死亡,可作为一株良好的检验用强毒,为后续疫苗评价奠定基础。 展开更多
关键词 鸡传染性喉气管炎 疫苗 效力检验 检验用强毒
下载PDF
鸡传染性喉气管炎病毒gG蛋白间接竞争ELISA方法的建立及初步应用 被引量:2
16
作者 郭鹏宇 赵妍 刘胜旺 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期704-709,728,共7页
鸡传染性喉气管炎是由鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)引起鸡的一种急性、高度接触性呼吸道传染病。为建立检测该病毒g G蛋白的间接竞争ELISA方法,本研究以原核系统表达ILTV g G蛋白,并采用切胶纯化该重组g G蛋白(rg G)后经western blot检... 鸡传染性喉气管炎是由鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)引起鸡的一种急性、高度接触性呼吸道传染病。为建立检测该病毒g G蛋白的间接竞争ELISA方法,本研究以原核系统表达ILTV g G蛋白,并采用切胶纯化该重组g G蛋白(rg G)后经western blot检测纯化的rg G (P-rg G)与本研究室制备的g G蛋白单克隆抗体(MAb) 3C8的反应原性。将MAb 3C8采用Protein G亲和层析柱纯化后与HRP偶联(HRP-3C8),利用间接ELISA法测定纯化HRP-3C8的效价。结果显示,P-rg G与MAb 3C8发生了特异性反应,在30 ku处出现特异性条带。纯化的HRP-3C8效价达1∶51 200。以P-rg G作为包被抗原,以纯化的HRP-3C8作为检测抗体,通过对各反应条件优化后初步建立了ILTV g G蛋白间接竞争ELISA (ic-ELISA)检测方法。条件优化结果显示,P-rg G包被量为12.5 ng/孔,HRP-3C8抗体稀释度为1∶10 000,将待检样品与HRP-3C8抗体在37℃孵育40 min后加入ELISA板再反应20 min,TMB底物反应10 min。将待检样品的抑制率(PI)≥31.08%判为阳性;采用该方法分别检测ILTV、新城疫病毒(NDV)、传染性支气管炎病毒(IBV)、鸡痘病毒(FPV),通过计算PI,评估该方法的特异性;按照Reed-Muench法测定ILTV K317株的鸡胚半数感染量(EID_(50)),再将该病毒2倍倍比稀释(1∶10~1∶2 560)后,以该ic-ELISA方法检测,评估该方法的敏感性;利用同批次和不同批次P-rg G分别包被ELISA板,采用该ic-ELISA方法检测ILTV阳性及阴性样品,评估该方法的重复性。结果显示,该方法除了能检测ILTV外,其余相关病毒均为阴性结果;将ILTV稀释至1∶320时检测结果仍为阳性,相当于75 EID_(50)/0.1 m L;批内、批间重复性试验的变异系数均小于10%。利用该方法及荧光定量PCR (q PCR)分别检测50份临床ILTV、IBV和FPV感染鸡的口咽拭子和喉头组织、10份ILTV活疫苗,该方法检测结果显示,阳性检测率为73.3%(44/60),阴性率为26.7%(16/60)。q PCR的检测结果显示,阳性检测率为81.7%(49/60),阴性率为18.3%(11/60),二者的阴、阳性符合率分别为90.9%和87.8%,总符合率为88.3%。本研究建立的ILTV g G蛋白ic-ELISA方法特异性强、敏感性高、重复性好,可以用于检测实验室和临床ILTV感染的不同样品,为ILTV及其疫苗的检测提供了新的技术手段。 展开更多
关键词 鸡传染性喉气管炎病毒 gG蛋白 单克隆抗体 间接竞争ELISA
下载PDF
鸡传染性喉气管炎病毒WF03株关键抗原基因和毒力基因的遗传演化与致病性分析
17
作者 张翼 王晨燕 +2 位作者 杨骁 邵国青 侯博 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第8期3435-3444,共10页
本研究旨在分析近年分离自鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)活疫苗免疫失败鸡群的ILTV WF03株的部分关键抗原基因及毒力基因的变异情况和对鸡的致病力,为ILTV活疫苗的有效性评价提供一个稳定、可靠的攻毒毒株。通过ILTV临床分离株WF03的部分... 本研究旨在分析近年分离自鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)活疫苗免疫失败鸡群的ILTV WF03株的部分关键抗原基因及毒力基因的变异情况和对鸡的致病力,为ILTV活疫苗的有效性评价提供一个稳定、可靠的攻毒毒株。通过ILTV临床分离株WF03的部分免疫原性基因和毒力相关基因进行克隆和测序,并与疫苗株和早期分离株进行遗传进化分析,同时在28和56日龄SPF鸡测定了该毒株的致病力。遗传进化分析结果表明:WF03株主要免疫原性基因和毒力相关基因与我国早期的分离株和现在部分商品化的疫苗株处在同一个大的进化分支,亲缘关系较近。致病力试验显示WF03株以10^(4.5)、10^(4).0、10^(3.5)和10^(3.0)EID_(50)·羽^(-1)的剂量感染28日龄SPF鸡后发病率分别为100%、100%、95%和85%,死亡率分别为45%、30%、35%和10%;以10^(4).0 EID_(50)·羽^(-1)的剂量感染56日龄SPF鸡的发病率和死亡率分别为100%和27.3%;所有发病鸡临床症状主要表现为咳血、呼吸困难、张口呼吸等典型的喉气管炎发病症状。结果表明:ILTV临床分离株WF03主要抗原基因和毒力基因与我国早期分离株和疫苗株相比未发生明显变异,属于强致病力毒株,其对SPF鸡的发病能力稳定,在10^(4.5)、10^(4).0、10^(3.5)和10^(3.0)EID_(50)·羽^(-1)攻毒剂量时均可以使80%以上的鸡发病。结果提示目前我国鸡群中存在着强致病力ILTV毒株流行,且WF03株可以作为疫苗效力评价的攻毒毒株,这将丰富我国当前ILTV毒株的流行病学数据库。 展开更多
关键词 传染性喉气管炎病毒 遗传特征 致病力
下载PDF
鸡传染性喉气管炎疫苗研究进展 被引量:1
18
作者 徐少珠 张国丽 +4 位作者 丘成文 邝贞结 吴燕华 卢丽平 齐冬梅 《广东畜牧兽医科技》 2023年第4期35-41,共7页
鸡传染性喉气管炎(Infectious Laryngotracheitis,ILT)是由喉气管炎病毒(Infectious Laryngotracheitis Virus,ILTV)引起的鸡的一种病毒性呼吸道传染病。ILT是一种较为严重的禽病毒病;根据ILT的临床表现分为急性型和温和型,急性型发病... 鸡传染性喉气管炎(Infectious Laryngotracheitis,ILT)是由喉气管炎病毒(Infectious Laryngotracheitis Virus,ILTV)引起的鸡的一种病毒性呼吸道传染病。ILT是一种较为严重的禽病毒病;根据ILT的临床表现分为急性型和温和型,急性型发病率和死亡率均较高,温和型死亡率低但在养殖密集地区感染逐渐增多。ILT可引起家禽死亡和蛋鸡产蛋率下降,给养禽业带来严重的经济损失。目前,通过使用疫苗接种和生物安全相结合的综合防控措施,在集约化养禽地区ILT已得到较好的控制。该文对多个国家已商品化的ILT减毒活疫苗和重组病毒载体活疫苗,以及正在研发中的ILT重组病毒载体活疫苗、基因缺失活疫苗、病毒样颗粒疫苗等新型ILT疫苗进行综述,以期为更好地防控ILT提供理论参考。 展开更多
关键词 鸡传染性喉气管炎 减毒活疫苗 灭活疫苗 重组载体活疫苗 基因缺失活疫苗 病毒样颗粒疫苗
下载PDF
应用多重聚合酶链反应同时检测鉴别鸡新城疫病毒、鸡传染性支气管炎病毒、鸡传染性喉气管炎病毒和鸡毒支原体的研究 被引量:25
19
作者 谢芝勋 谢志勤 +2 位作者 庞耀珊 刘加波 邓显文 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第6期443-446,共4页
本文建立了一种同时检测NDV、IBV、ILTV和MG 4种病原体的多重PCR技术。根据NDV、IBV、ILTV和MG的基因文库 ,设计了 4对分别与NDV、IBV、ILTV和MG某段基因序列互补的引物 ,用这 4对引物对同一样品中的NDV、IBV、ILTV、MGRVA或DNA模板进... 本文建立了一种同时检测NDV、IBV、ILTV和MG 4种病原体的多重PCR技术。根据NDV、IBV、ILTV和MG的基因文库 ,设计了 4对分别与NDV、IBV、ILTV和MG某段基因序列互补的引物 ,用这 4对引物对同一样品中的NDV、IBV、ILTV、MGRVA或DNA模板进行多重PCR扩增 ,结果均同时得到了 4条特异性大小与实验设计相符的 310bp(NDV)、172 0bp(IBV)、6 47bp(ILTV)、和 732bp(MG)多重PCR扩增带 ,而对其他 6种禽病病原的PCR扩增结果均为阴性 ;敏感性测定结果表明 ,该多重PCR技术能检出 10pg的IBV、1pg的NDVRNA模板和 10pg的ILTV、1pg的MGDNA模板。 展开更多
关键词 多重聚合酶链式反应 检测 鸡新城疫病毒 鸡传染性支气管炎病毒 鸡传染性喉气管炎病毒 鸡毒支原体
下载PDF
抗鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗同居感染试验 被引量:6
20
作者 王云峰 智海东 +6 位作者 王玫 孙永科 仇华吉 周艳君 田志军 张绍杰 童光志 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期51-54,共4页
疫苗的接触传播是疫苗免疫接种需要考虑的重要因素,为了检测重组鸡痘病毒载体疫苗水平传播的能力,对隔离条件下饲养的SPF鸡用重组鸡痘病毒基因工程疫苗接种,同时设立非免疫对照鸡,饲养期间特意延长清粪时间以增加感染的机会,1个月之后... 疫苗的接触传播是疫苗免疫接种需要考虑的重要因素,为了检测重组鸡痘病毒载体疫苗水平传播的能力,对隔离条件下饲养的SPF鸡用重组鸡痘病毒基因工程疫苗接种,同时设立非免疫对照鸡,饲养期间特意延长清粪时间以增加感染的机会,1个月之后攻击传染性喉气管炎WG株强毒和鸡痘102株强毒,疫苗免疫鸡全部获得保护,而非免疫鸡则全部发病。在试验动物饲养场的自然条件下,将免疫鸡和试验对照两组鸡饲养在同一个鸡舍内,让疫苗毒的传播更接近自然条件。在每个月的攻毒试验中,对照鸡都没有获得对鸡痘和传染性喉气管炎强毒的保护。在疫苗免疫期间进行连续5个月的跟踪检测,同居未免疫鸡没有检测到抗传染性喉气管炎病毒gB抗体。这些实验结果表明抗鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗不能通过接触传播。 展开更多
关键词 传染性喉气管炎病毒 鸡痘病毒 抗鸡传染性喉气管炎重组鸡痘病毒基因工程疫苗 同居感染试验 免疫接种
下载PDF
上一页 1 2 6 下一页 到第
使用帮助 返回顶部